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| 品牌(pai) | NobleRyder/諾博萊德 | 貨號 | 71600 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格 | 500次/5ml | 供貨周(zhou)期(qi) | 現(xian)貨 |
| 主(zhu)要(yao)用途(tu) | 用於所有(you)qPCR儀(yi) | 應用(yong)領域 | 環保,化工(gong),生(sheng)物(wu)產業(ye),農林(lin)牧漁,制藥/生(sheng)物(wu)制(zhi)藥 |
諾博萊德 2 xUniversalSYBRGreenqPCRMix熒(ying)光(guang)定量(liang)
2 x Universal SYBR Green qPCR Mix
目(mu)錄號:71600
產品內容(rong)
Components | 71600-500 500 rxns (20 μl/rxn) | 71600-2500 2500 rxns(20μl/rxn) |
2x Universal SYBR GreenqPCRMix | 1 ml x5 | 1 ml x25 |
保(bao)存(cun)條件(jian)
-20℃保(bao)存(cun),有效期 24 個(ge)月。使用(yong)前,充(chong)分(fen)融解(jie),輕輕顛倒(dao)混(hun)勻,短期使用(yong)可(ke)放在 4 ℃,避(bi)免(mian)反復凍融。
具體產品的(de)參數以收(shou)到(dao)產品說明(ming)書的參數為準
產品簡介(jie)
2× Universal SYBR Green qPCR Mix是(shi)SYBR Green I 嵌(qian)合染(ran)料(liao)法(fa)專(zhuan)用的(de)qPCR試(shi)劑,為2x 預混液(ye),包含除(chu)引(yin)物和DNA樣(yang)品以外的所有(you)qPCR組分,可(ke)減(jian)少操(cao)作步(bu)驟(zhou),縮(suo)短(duan)加樣時間,降低汙染幾率。其核心(xin)組分是(shi)全(quan)新(xin)的(de)Hotmaster Taq DNA聚(ju)合酶(mei),配合精心(xin)優化的(de)Buffer體系(xi),有(you)效抑(yi)制(zhi)非特異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng),可(ke)對(dui)寬廣濃度(du)範圍的模(mo)板進(jin)行準確定量(liang),獲(huo)得(de)穩定可(ke)靠的qPCR結(jie)果(guo),具有(you)靈(ling)敏(min)度(du)高(gao)、特異(yi)性(xing)強(qiang)、穩定性(xing)好(hao)等特(te)點。
預(yu)混(hun)液(ye)中含有(you)通(tong)用型ROX,適(shi)用於所有(you)qPCR儀(yi),使(shi)用(yong)qPCR Mix時(shi)不(bu)需(xu)要(yao)額外添加ROX來(lai)校正儀(yi)器(qi)。
操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou):
1. 將DNA模(mo)板、引(yin)物、2 x Universal SYBR Green qPCR Mix、RNase-Free H2O溶解並(bing)置於冰上(shang)備用(yong)。
2. 冰(bing)上(shang)配制qPCR反應體系(xi):(以(yi)20μl反應體系(xi)為例)
Components | Volume (20μl) | Final Concentration |
2 x Universal SYBR Green qPCR Mix | 10 μl | 1× |
DNA Template | Variable | As required |
Forward Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
Reverse Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
RNase free H2O | Up to 20 μl | Not applicable |
註(zhu)意:
1) 推薦(jian)模(mo)板加樣量為1-2μl / 20μl反應體系(xi),cDNA原(yuan)液(ye)≤總反應體系(xi)的(de)10%,基因組DNA的量(liang)為10-100 ng。因不(bu)同種(zhong)類的(de)DNA模(mo)板中(zhong)含有(you)的(de)靶基因拷貝(bei)數不(bu)同,可(ke)對(dui)模(mo)板進(jin)行梯度(du)稀釋(shi),以(yi)確定最(zui)佳(jia)的(de)模(mo)板使(shi)用(yong)量(liang)。
2) 通(tong)常(chang)推薦(jian)引(yin)物濃度(du)為0.2 μM,就可(ke)以得(de)到(dao)較好(hao)的(de)結果(guo),反應效果(guo)不(bu)佳(jia)時(shi)可(ke)在0.1 - 1.0 μM範圍內進(jin)行調整(zheng)。擴(kuo)增(zeng)效率不(bu)高(gao)的情況下,可(ke)提高(gao)引(yin)物濃度(du);發(fa)生(sheng)非特異(yi)性(xing)反應時(shi),可(ke)降低引(yin)物濃度(du),由(you)此(ci)優(you)化反應體系(xi)。
3. qPCR反應程(cheng)序
註(zhu)意:
1) 本(ben)產品兼(jian)容(rong)性(xing)強(qiang),絕(jue)大(da)多數情況下使用二(er)步(bu)法和三步(bu)法均可(ke)獲(huo)得(de)良(liang)好(hao)效果(guo)。壹(yi)般來(lai)說,二(er)步(bu)法擴增(zeng)特(te)異(yi)性(xing)高(gao),三步(bu)法擴增(zeng)效率高(gao)。如果(guo)融(rong)鏈(lian)曲(qu)線(xian)較差(cha),可(ke)以嘗試(shi)兩步(bu)法擴增(zeng)或提高(gao)退(tui)火(huo)溫(wen)度(du);如果(guo)因(yin)使(shi)用Tm值較低的(de)引(yin)物等原(yuan)因(yin),得(de)不(bu)到(dao)良(liang)好(hao)的(de)實驗(yan)結(jie)果(guo)時(shi),可(ke)嘗試(shi)加長延伸(shen)時間或者(zhe)進行三步(bu)法PCR擴增(zeng)。
2) 根(gen)據引(yin)物的Tm值(zhi)進行退(tui)火(huo)&延伸(shen)(退(tui)火(huo))溫(wen)度(du)的(de)設(she)定(ding);
3) 延(yan)伸(shen)(退(tui)火(huo)&延伸(shen))時間的(de)設(she)置(zhi)還(hai)需要(yao)根據您(nin)所(suo)使(shi)用的qPCR儀(yi)所(suo)需(xu)要(yao)的最(zui)短數據采集(ji)時間自行調整(zheng)。
4) 融(rong)解(jie)曲(qu)線(xian)分(fen)析(xi)請(qing)以(yi)所使(shi)用的(de)熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR儀(yi)推薦(jian)的程(cheng)序進行設(she)定(ding)。
相(xiang)關(guan)產品:
91011-100 RNAzol Reagent(Trizol)
91013-50 通(tong)用型總(zong)RNA快速提取(qu)試(shi)劑盒(TRIzol+吸附(fu)柱(zhu)) 免氯(lv)仿,升(sheng)級(ji)版(ban)
91017-50 動(dong)物(wu)組織/細(xi)胞/昆(kun)蟲(chong)總RNA快(kuai)速提取(qu)試(shi)劑盒 免氯(lv)仿,同RNeasy Mini Kit
91218-50 動(dong)物(wu)組織/細(xi)胞/昆(kun)蟲(chong)總RNA快(kuai)速提取(qu)試(shi)劑盒(帶(dai)gDNA過(guo)濾器) 免(mian)氯(lv)仿,同RNeasy Plus Mini Kit
91019-50 植(zhi)物(wu)總RNA提取(qu)試(shi)劑盒 免氯(lv)仿,同RNeasy Plant Mini Kit
91318-50 多(duo)糖(tang)多酚(fen)植物(wu)總RNA快(kuai)速提取(qu)試(shi)劑盒(帶(dai)gDNA過(guo)濾器) 免(mian)氯(lv)仿
91513-50 果(guo)實(shi)/種(zhong)子總(zong)RNA快速提取(qu)試(shi)劑盒(帶(dai)gDNA過(guo)濾器) 難題樣(yang)本(ben):果(guo)實(shi)、種(zhong)子、中(zhong)草藥等
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(for PCR or qPCR) 同RT reagent Kit
71514-100 Script III RT Kit With gDNA Eraser(for qPCR) 同RT reagent Kit with gDNA Eraser
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase(for qPCR) 同T公司的(de)AE341,V公司的(de)R333
71519-500 2x SYBR Green qPCR Mix (With 100x ROX) 同TB Green Premix Ex Taq
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適(shi)用(yong)於所有(you)qPCR儀(yi)) 同V公司的(de)Q711
2 xUniversalSYBRGreenqPCRMix熒(ying)光(guang)定量(liang)