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| 品(pin)牌(pai) | NobleRyder/諾(nuo)博萊德 | 貨號 | 71313 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 500次(ci)/5ml | 供(gong)貨周期(qi) | 現(xian)貨 |
| 主要(yao)用(yong)途(tu) | 用(yong)於不(bu)需(xu)要(yao)ROX校準(zhun)的(de)儀(yi)器 | 應用(yong)領(ling)域 | 環保(bao),化(hua)工(gong),生(sheng)物(wu)產業(ye),農林(lin)牧(mu)漁,制(zhi)藥(yao)/生(sheng)物(wu)制(zhi)藥(yao) |
諾博萊德2x SYBR Green qPCR Mix 熒(ying)光定(ding)量(liang)
2x SYBR Green qPCR Mix(NO ROX)
目錄號:71313
產品(pin)內(nei)容(rong)
Components | 71313-500 500 rxns (20 μl/rxn) | 71313-2500 2500 rxns (20 μl/rxn) |
2x SYBR Green qPCR Mix | 1.25 ml x4 | 1.25 ml x20 |
RNase-Free H2O | 5 ml | 5 ml x5 |
保(bao)存條件(jian)
-20℃保存,有(you)效(xiao)期(qi) 24 個(ge)月(yue)。使用(yong)前(qian),充分(fen)融解,輕(qing)柔(rou)顛倒(dao)混勻(yun),短(duan)期(qi)使用(yong)可(ke)放在(zai) 4 ℃,避免反復凍融。
具(ju)體(ti)產品(pin)的參(can)數以收(shou)到(dao)產品(pin)說明(ming)書(shu)的參數為(wei)準
產品(pin)簡介(jie)
2x SYBR Green qPCR Mix是SYBR Green I 嵌合(he)染(ran)料(liao)法專用(yong)的(de)qPCR試劑(ji),為(wei)2x 預(yu)混液,包(bao)含除(chu)引物(wu)和(he)DNA樣(yang)品(pin)以外的(de)所(suo)有(you)qPCR組(zu)分(fen),可(ke)減(jian)少操(cao)作步驟(zhou),縮(suo)短加(jia)樣時(shi)間,降低汙(wu)染(ran)幾率(lv)。其核心組(zu)分(fen)是(shi)全(quan)新(xin)的Hotmaster Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei),配合(he)精(jing)心(xin)優化(hua)的Buffer體(ti)系(xi),有(you)效(xiao)抑(yi)制(zhi)非(fei)特(te)異性擴增(zeng),可對寬廣(guang)濃度範圍的模板進(jin)行準確(que)定量,獲(huo)得(de)穩定可(ke)靠的qPCR結(jie)果(guo),具有(you)靈(ling)敏(min)度高、特(te)異性強、穩定性好等特點。
本(ben)品(pin)不含(han)參比(bi)染料(liao)ROX,適(shi)用(yong)於不(bu)需(xu)要(yao)ROX校準(zhun)的(de)儀(yi)器,常(chang)見(jian)的是(shi)Bio-rad系(xi)列、Roche、國(guo)產qPCR儀(yi)。
操(cao)作步驟(zhou):
1. 將(jiang)DNA模板、引(yin)物(wu)、2 x SYBR qPCR Mix、RNase-Free H2O溶解並置(zhi)於冰(bing)上(shang)備用(yong)。
2. 冰上配制(zhi)qPCR反(fan)應體(ti)系(xi):(以20μl反(fan)應體(ti)系(xi)為例)
Components | Volume (20μl) | Final Concentration |
2x SYBR Green qPCR Mix | 10 μl | 1× |
DNA Template | Variable | As required |
Forward Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
Reverse Primer (10μM) | 0.4 μl | 0.2 μM each |
RNase-Free H2O | Up to 20 μl | Not applicable |
註意(yi):
1) 推薦模板加(jia)樣量(liang)為(wei)1-2μl / 20μl反(fan)應體(ti)系(xi),cDNA原液≤總(zong)反(fan)應體(ti)系(xi)的10%,基因(yin)組(zu)DNA的(de)量(liang)為(wei)10-100 ng。因(yin)不同(tong)種(zhong)類(lei)的(de)DNA模板中(zhong)含有(you)的(de)靶(ba)基(ji)因(yin)拷(kao)貝(bei)數不(bu)同(tong),可(ke)對模板進(jin)行梯度稀(xi)釋,以確(que)定(ding)最佳(jia)的(de)模板使用(yong)量(liang)。
2) 通(tong)常推薦引物(wu)濃度為0.2 μM,就可以得(de)到(dao)較(jiao)好(hao)的結(jie)果(guo),反應效(xiao)果不佳(jia)時可在(zai)0.1 - 1.0 μM範圍內(nei)進(jin)行調(tiao)整。擴增(zeng)效率(lv)不(bu)高(gao)的情況下,可提(ti)高(gao)引物(wu)濃度;發生非(fei)特(te)異性反應時(shi),可降低引(yin)物(wu)濃度,由此優化(hua)反應體(ti)系(xi)。
3. qPCR反(fan)應程(cheng)序(xu)
註意(yi):
1) 本產品(pin)兼(jian)容性強,適用(yong)於不(bu)同(tong)廠家、型號的(de)熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀(yi),絕大(da)多(duo)數情況下使用(yong)二步法和三(san)步法均可(ke)獲得(de)良(liang)好(hao)效(xiao)果。建(jian)議(yi)采(cai)用(yong)兩步法qPCR反應程(cheng)序(xu)。壹(yi)般(ban)來(lai)說(shuo),二步法擴增(zeng)特異性高,三(san)步法擴增(zeng)效率(lv)高(gao)。如(ru)果融鏈(lian)曲(qu)線(xian)較差,可以嘗(chang)試兩步法擴增(zeng)或(huo)提(ti)高退火溫度;如果(guo)因使用(yong)Tm值(zhi)較低的(de)引(yin)物(wu)等(deng)原(yuan)因(yin),得(de)不(bu)到(dao)良(liang)好(hao)的(de)實驗結(jie)果(guo)時,可嘗試加(jia)長(chang)延(yan)伸時(shi)間或(huo)者(zhe)進(jin)行三(san)步法PCR擴增(zeng)。
2) 根(gen)據(ju)引物(wu)的(de)Tm值(zhi)進(jin)行退火&延伸(退火)溫度的設(she)定;
3) 延(yan)伸(退火&延伸)時(shi)間的設(she)置(zhi)還(hai)需(xu)要(yao)根(gen)據(ju)您所使用(yong)的(de)qPCR儀(yi)所需(xu)要(yao)的(de)最短(duan)數據(ju)采(cai)集(ji)時間自行調(tiao)整。
4) 融解曲(qu)線(xian)分析請(qing)以所(suo)使用(yong)的(de)熒光定(ding)量(liang)PCR儀(yi)推薦的程(cheng)序(xu)進(jin)行設定(ding)。
相(xiang)關(guan)產品(pin):
91011 RNAzol Reagent(Trizol)
91013 通(tong)用(yong)型總RNA快速提(ti)取試劑(ji)盒(he)(TRIzol+吸(xi)附柱) 免(mian)氯(lv)仿,升(sheng)級版
91017 動(dong)物(wu)組(zu)織/細(xi)胞(bao)/昆蟲(chong)總(zong)RNA快(kuai)速提取試劑(ji)盒(he)() 免(mian)氯仿,同(tong)RNeasy Mini Kit
91218 動(dong)物(wu)組(zu)織/細(xi)胞(bao)/昆蟲(chong)總(zong)RNA快(kuai)速提取試劑(ji)盒(he)(帶gDNA過(guo)濾(lv)器) 免(mian)氯仿,同(tong)RNeasy Plus Mini Kit
91019 植物(wu)總(zong)RNA提(ti)取試劑(ji)盒(he) 免(mian)氯仿,同(tong)RNeasy Plant Mini Kit
91318 多(duo)糖多(duo)酚(fen)植物(wu)總(zong)RNA快(kuai)速(su)提(ti)取試劑(ji)盒(he)(帶gDNA過(guo)濾(lv)器) 免(mian)氯仿
91513 果(guo)實/種子(zi)總RNA快(kuai)速提(ti)取試劑(ji)盒(he)(帶gDNA過(guo)濾(lv)器) 難(nan)題(ti)樣本(ben):果實、種子(zi)、中草藥等
71118 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(With dsDNase) 同(tong)RT reagent Kit
71514 Script III RT Kit With gDNA Eraser 同(tong)RT reagent Kit with gDNA Eraser
71519 2x SYBR Green qPCR Mix (With 100x ROX) 同(tong)TB Green Premix Ex Taq
71710 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase 同(tong)T公(gong)司(si)的(de)AE341,V公(gong)司的R333
71600 2x Universal SYBR Green qPCR Mix 同(tong)V公(gong)司(si)的(de)Q711
2x SYBR Green qPCR Mix 熒(ying)光定(ding)量(liang)