2x SYBR Green qPCR Mix (Low ROX) 是SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試(shi)劑(ji)，為2x 預(yu)混(hun)液(ye)，包(bao)含(han)除引(yin)物(wu)和DNA樣(yang)品(pin)以(yi)外的所(suo)有(you)qPCR組分，可減(jian)少(shao)操(cao)作步驟，縮短(duan)加(jia)樣時(shi)間，降(jiang)低汙染(ran)幾(ji)率(lv)。其(qi)核(he)心組分是全(quan)新的Hotmaster Taq DNA聚合酶，配合精心優(you)化(hua)的Buffer體系(xi)，有(you)效抑制非特異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)
2×SYBR Green qPCR Mix 熒光定(ding)量(liang)

諾(nuo)博(bo)萊德(de) 2×SYBR Green qPCR Mix  熒光定(ding)量(liang)

2x SYBR Green qPCR Mix (Low ROX)

目錄號(hao):71610

產(chan)品(pin)內(nei)容(rong)

保存條(tiao)件

-20℃保存，有(you)效期(qi) 24 個月(yue)。使(shi)用前(qian)，充(chong)分融解(jie)，輕輕(qing)顛倒混勻(yun)，短(duan)期(qi)使用可放(fang)在(zai) 4 ℃，避免(mian)反復凍(dong)融(rong)。

具(ju)體(ti)產(chan)品(pin)的參(can)數(shu)以收(shou)到(dao)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)的參(can)數(shu)為準

產(chan)品(pin)簡介

2x SYBR Green qPCR Mix (Low ROX) 是(shi)SYBR Green I 嵌合染料法專用的qPCR試(shi)劑(ji)，為2x 預(yu)混(hun)液(ye)，包(bao)含(han)除引(yin)物(wu)和DNA樣(yang)品(pin)以(yi)外的所(suo)有(you)qPCR組分，可減(jian)少(shao)操(cao)作步驟，縮短(duan)加(jia)樣時(shi)間，降(jiang)低汙染(ran)幾(ji)率(lv)。其(qi)核(he)心組分是全(quan)新的Hotmaster Taq DNA聚合酶，配合精心優(you)化(hua)的Buffer體系(xi)，有(you)效抑制非特異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)，可對寬(kuan)廣濃度範(fan)圍的模(mo)板(ban)進(jin)行(xing)準確(que)定量(liang)，獲得(de)穩(wen)定可靠的qPCR結(jie)果(guo)，具(ju)有(you)靈敏度(du)高、特(te)異性(xing)強(qiang)、穩(wen)定性(xing)好等特(te)點。

預(yu)混(hun)液(ye)中(zhong)已(yi)加(jia)入低濃度ROX參(can)比(bi)染料，適(shi)用於(yu)ABI 7500，7500 Fast, QuantStudio 3/5 System, ViiA™7, QuantStudio 6/7Flex；Stratagene MX4000, MX 3005, MX 3000；Corbett Rotor Gene 3000等需(xu)要(yao)低濃度ROX機(ji)型(xing)。

操(cao)作步驟：

1. 將DNA模(mo)板(ban)、引(yin)物(wu)、2x SYBR Green qPCR Mix (Low ROX)、RNase-Free H2O溶解(jie)並(bing)置(zhi)於(yu)冰(bing)上(shang)備用。

2. 冰(bing)上(shang)配制qPCR反應體(ti)系：（以(yi)20μl反(fan)應(ying)體系(xi)為例）

1） 推(tui)薦模(mo)板(ban)加(jia)樣量(liang)為1-2μl / 20μl反應(ying)體系(xi)，cDNA原(yuan)液(ye)≤總(zong)反(fan)應體(ti)系的10%，基因組DNA的量(liang)為10-100 ng。因不同(tong)種類(lei)的DNA模(mo)板(ban)中(zhong)含(han)有(you)的靶基(ji)因拷貝數(shu)不同(tong)，可對模(mo)板(ban)進(jin)行(xing)梯度稀釋(shi)，以確(que)定最佳的模(mo)板(ban)使(shi)用量(liang)。

2） 通(tong)常(chang)推薦引(yin)物(wu)濃度(du)為0.2 μM，就可以(yi)得(de)到(dao)較好的結(jie)果(guo)，反(fan)應(ying)效(xiao)果不佳時可在(zai)0.1 - 1.0 μM範(fan)圍內(nei)進(jin)行(xing)調整。擴(kuo)增(zeng)效率(lv)不高的情況下，可提高引(yin)物(wu)濃度(du)；發(fa)生(sheng)非特異性反應(ying)時，可降(jiang)低引(yin)物(wu)濃度(du)，由(you)此優(you)化(hua)反應(ying)體(ti)系。

3. qPCR反(fan)應(ying)程序(xu)

註(zhu)意：

1） 絕(jue)大多數(shu)情況下使用二步法和(he)三步法均(jun)可獲得(de)良(liang)好效果(guo)。壹般(ban)來(lai)說(shuo)，二(er)步法擴(kuo)增(zeng)特異(yi)性(xing)高，三(san)步法擴(kuo)增(zeng)效率(lv)高。如(ru)果融(rong)鏈(lian)曲線較差，可以(yi)嘗(chang)試(shi)兩步法擴(kuo)增(zeng)或提高退火(huo)溫(wen)度；如(ru)果因使用Tm值較低的引(yin)物(wu)等原(yuan)因，得不到(dao)良(liang)好的實驗結(jie)果(guo)時(shi)，可嘗(chang)試(shi)加(jia)長延(yan)伸(shen)時(shi)間或者(zhe)進(jin)行(xing)三步法PCR擴(kuo)增(zeng)。

2） 根據(ju)引(yin)物(wu)的Tm值進(jin)行(xing)退火(huo)&延(yan)伸(shen)（退火(huo)）溫(wen)度的設定；

3） 延(yan)伸(shen)（退火(huo)&延(yan)伸(shen)）時(shi)間的設置還需(xu)要(yao)根據(ju)您所(suo)使(shi)用的qPCR儀所(suo)需(xu)要(yao)的最短(duan)數據(ju)采(cai)集(ji)時(shi)間自(zi)行調(tiao)整(zheng)。

4） 融(rong)解(jie)曲(qu)線分析(xi)請以(yi)所(suo)使(shi)用的熒光定(ding)量(liang)PCR儀(yi)推薦的程序(xu)進(jin)行(xing)設定。

相(xiang)關(guan)產(chan)品(pin)：

91011 RNAzol Reagent（Trizol）

91013 通(tong)用型總(zong)RNA快(kuai)速提取試(shi)劑(ji)盒(he)（TRIzol+吸(xi)附柱(zhu)） 免氯(lv)仿，升級(ji)版(ban)

91017 動(dong)物(wu)組織(zhi)/細(xi)胞/昆蟲(chong)總RNA快(kuai)速提取試(shi)劑(ji)盒(he)() 免(mian)氯(lv)仿，同(tong)RNeasy Mini Kit

91218 動(dong)物(wu)組織(zhi)/細(xi)胞/昆蟲(chong)總RNA快(kuai)速提取試(shi)劑(ji)盒(he)(帶(dai)gDNA過(guo)濾器) 免氯(lv)仿，同(tong)RNeasy Plus Mini Kit

91019 植(zhi)物(wu)總(zong)RNA提取試(shi)劑(ji)盒(he) 免(mian)氯(lv)仿，同(tong)RNeasy Plant Mini Kit

91318 多(duo)糖(tang)多(duo)酚(fen)植物總(zong)RNA快(kuai)速提取試(shi)劑(ji)盒(he)(帶(dai)gDNA過(guo)濾器) 免氯(lv)仿

91513 果(guo)實/種子(zi)總RNA快(kuai)速提取試(shi)劑(ji)盒(he)(帶(dai)gDNA過(guo)濾器) 難(nan)題(ti)樣(yang)本(ben)：果實、種子(zi)、中草(cao)藥等

71118 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（With dsDNase） 同(tong)RT reagent Kit

71514 Script III RT Kit With gDNA Eraser 同(tong)RT reagent Kit with gDNA Eraser

71519 2x SYBR Green qPCR Mix (With 100x ROX) 同(tong)TB Green Premix Ex Taq

71710 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase 同(tong)T公(gong)司的AE341，V公司(si)的R333

71600 2x Universal SYBR Green qPCR Mix 同(tong)V公(gong)司的Q711

2×SYBR Green qPCR Mix  熒光定(ding)量(liang)