2x SYBR Green qPCR Mix (High ROX) 是SYBR Green I 嵌(qian)合染(ran)料法(fa)專(zhuan)用的(de)qPCR試劑(ji)，為(wei)2x 預(yu)混液(ye)，包(bao)含(han)除(chu)引物(wu)和DNA樣品(pin)以(yi)外(wai)的(de)所(suo)有(you)qPCR組分，可(ke)減(jian)少(shao)操作步(bu)驟(zhou)，縮短(duan)加(jia)樣時(shi)間(jian)，降(jiang)低(di)汙染(ran)幾率(lv)。
2 x SYBR Green qPCR Mix 熒光(guang)定量

諾(nuo)博(bo)萊(lai)德 2 x SYBR Green qPCR Mix  熒光(guang)定量

2x SYBR Green qPCR Mix (High ROX)

目錄(lu)號:71611

產(chan)品(pin)內容(rong)

保(bao)存(cun)條(tiao)件(jian)

-20℃保(bao)存(cun)，有(you)效期(qi) 24 個月(yue)。使(shi)用前(qian)，充(chong)分融(rong)解，輕(qing)輕(qing)顛倒(dao)混勻，短(duan)期(qi)使(shi)用可(ke)放(fang)在 4 ℃，避(bi)免反復(fu)凍融(rong)。

具(ju)體產(chan)品(pin)的(de)參數以(yi)收(shou)到(dao)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書的(de)參數為(wei)準

產(chan)品(pin)簡(jian)介(jie)

2x SYBR Green qPCR Mix (High ROX) 是SYBR Green I 嵌(qian)合染(ran)料法(fa)專(zhuan)用的(de)qPCR試劑(ji)，為(wei)2x 預(yu)混液(ye)，包(bao)含(han)除(chu)引物(wu)和DNA樣品(pin)以(yi)外(wai)的(de)所(suo)有(you)qPCR組分，可(ke)減(jian)少(shao)操作步(bu)驟(zhou)，縮短(duan)加(jia)樣時(shi)間(jian)，降(jiang)低(di)汙染(ran)幾率(lv)。其核(he)心(xin)組分是全(quan)新的(de)Hotmaster Taq DNA聚合酶，配(pei)合(he)精(jing)心優(you)化(hua)的(de)Buffer體系，有(you)效抑(yi)制(zhi)非(fei)特異(yi)性擴增，可(ke)對(dui)寬廣(guang)濃(nong)度(du)範圍的(de)模板(ban)進(jin)行(xing)準確(que)定量，獲得穩定可靠(kao)的(de)qPCR結果，具(ju)有(you)靈敏(min)度(du)高、特異(yi)性強(qiang)、穩定性好等特(te)點(dian)。

預(yu)混液(ye)中(zhong)已(yi)加入高濃(nong)度(du)的(de)ROX參比(bi)染(ran)料，適(shi)用(yong)於ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT and 7900HT Fast,ABI Step One, ABI Step One Plus以(yi)及(ji)其它(ta)需要高濃(nong)度(du)ROX機(ji)型(xing)。

操作步(bu)驟(zhou)：

1. 將DNA模板(ban)、引(yin)物(wu)、2x SYBR Green qPCR Mix (High ROX)、RNase-Free H2O溶(rong)解並置於冰上(shang)備(bei)用。

2. 冰(bing)上(shang)配(pei)制(zhi)qPCR反應體系：（以(yi)20μl反應體系為例）

1） 推薦模板(ban)加(jia)樣量為1-2μl / 20μl反應體系，cDNA原液(ye)≤總(zong)反應體系的(de)10%，基因組DNA的(de)量為10-100 ng。因(yin)不同(tong)種(zhong)類(lei)的(de)DNA模板(ban)中(zhong)含(han)有(you)的(de)靶基因拷(kao)貝數不(bu)同(tong)，可(ke)對(dui)模板(ban)進(jin)行(xing)梯(ti)度(du)稀(xi)釋(shi)，以(yi)確(que)定最(zui)佳的(de)模板(ban)使(shi)用量。

2） 通(tong)常推薦引物(wu)濃(nong)度(du)為(wei)0.2 μM，就(jiu)可(ke)以(yi)得到(dao)較好的(de)結果，反應效果不佳時(shi)可(ke)在0.1 - 1.0 μM範圍內進(jin)行(xing)調整(zheng)。擴增效(xiao)率(lv)不高的(de)情況下(xia)，可(ke)提高引物(wu)濃(nong)度(du)；發生非(fei)特異(yi)性反應時(shi)，可(ke)降(jiang)低(di)引物(wu)濃(nong)度(du)，由(you)此(ci)優化(hua)反應體系。

3. qPCR反應程(cheng)序(xu)

註(zhu)意(yi)：

1） 絕(jue)大(da)多(duo)數情況下(xia)使(shi)用二步(bu)法(fa)和三步(bu)法(fa)均可(ke)獲得良(liang)好效果。建議(yi)采用兩(liang)步(bu)法(fa)qPCR反應程(cheng)序(xu)。壹(yi)般(ban)來說，二步(bu)法(fa)擴增特(te)異(yi)性高，三步(bu)法(fa)擴增效(xiao)率(lv)高。如果融(rong)鏈曲線較差，可以(yi)嘗(chang)試(shi)兩(liang)步(bu)法(fa)擴增或(huo)提(ti)高退火(huo)溫(wen)度(du)；如果因使(shi)用Tm值(zhi)較低(di)的(de)引物(wu)等原(yuan)因，得不到(dao)良(liang)好的(de)實驗(yan)結果時(shi)，可(ke)嘗(chang)試(shi)加(jia)長延(yan)伸(shen)時(shi)間(jian)或者進(jin)行(xing)三步(bu)法(fa)PCR擴增。

2） 根據(ju)引(yin)物(wu)的(de)Tm值(zhi)進(jin)行(xing)退(tui)火(huo)&延(yan)伸(shen)（退(tui)火(huo)）溫(wen)度(du)的(de)設定；

3） 延(yan)伸(shen)（退(tui)火(huo)&延(yan)伸(shen)）時(shi)間(jian)的(de)設置(zhi)還(hai)需要根據(ju)您(nin)所(suo)使(shi)用的(de)qPCR儀所(suo)需要的(de)最(zui)短(duan)數據(ju)采集時(shi)間(jian)自行(xing)調整(zheng)。

4） 融(rong)解曲(qu)線(xian)分析(xi)請(qing)以(yi)所(suo)使(shi)用的(de)熒光(guang)定量PCR儀推薦的(de)程(cheng)序(xu)進(jin)行(xing)設(she)定。

相(xiang)關(guan)產(chan)品(pin)：

91011 RNAzol Reagent（Trizol）

91013 通(tong)用型總(zong)RNA快(kuai)速提(ti)取試劑(ji)盒(he)（TRIzol+吸(xi)附(fu)柱(zhu)） 免氯仿，升(sheng)級(ji)版(ban)

91017 動物(wu)組織/細(xi)胞(bao)/昆(kun)蟲(chong)總(zong)RNA快(kuai)速提(ti)取試劑(ji)盒(he)() 免氯仿，同(tong)RNeasy Mini Kit

91218 動物(wu)組織/細(xi)胞(bao)/昆(kun)蟲(chong)總(zong)RNA快(kuai)速提(ti)取試劑(ji)盒(he)(帶(dai)gDNA過(guo)濾器) 免氯仿，同(tong)RNeasy Plus Mini Kit

91019 植物(wu)總(zong)RNA提取試劑(ji)盒(he) 免氯仿，同(tong)RNeasy Plant Mini Kit

91318 多(duo)糖多酚(fen)植物(wu)總(zong)RNA快(kuai)速提(ti)取試劑(ji)盒(he)(帶(dai)gDNA過(guo)濾器) 免氯仿

91513 果(guo)實(shi)/種(zhong)子(zi)總(zong)RNA快(kuai)速提(ti)取試劑(ji)盒(he)(帶(dai)gDNA過(guo)濾器) 難題樣本：果實、種(zhong)子(zi)、中(zhong)草藥(yao)等

71118 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（With dsDNase） 同(tong)RT reagent Kit

71514 Script III RT Kit With gDNA Eraser 同(tong)RT reagent Kit with gDNA Eraser

71519 2x SYBR Green qPCR Mix (With 100x ROX) 同(tong)TB Green Premix Ex Taq

71710 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase 同(tong)T公司的(de)AE341，V公司的(de)R333

71600 2x Universal SYBR Green qPCR Mix 同(tong)V公司的(de)Q711

2 x SYBR Green qPCR Mix  熒(ying)光(guang)定量