本(ben)試劑(ji)盒(he)是壹款(kuan)快速(su)可靠的(de) sgRNA 專(zhuan)用(yong)的(de)純(chun)化(hua)試劑(ji)盒(he)，可體(ti)外轉(zhuan)錄(lu)（IVT）酶(mei)促反(fan)應(ying)中純(chun)化(hua)多(duo)達 200 μg 濃(nong)縮的(de)高(gao)質量 RNA。獨te設計的(de)微量 sgRNA 純(chun)化(hua)柱(zhu)，可(ke)確保零(ling)緩(huan)沖(chong)液(ye)殘留(liu)，無交叉(cha)汙(wu)染，洗脫體(ti)積低(di)至 6μl。
高(gao)效sgRNA純(chun)化(hua)試劑(ji)盒(he) T7體(ti)外轉(zhuan)錄(lu)

 諾博萊(lai)德 高(gao)效sgRNA純(chun)化(hua)試劑(ji)盒(he) T7體(ti)外轉(zhuan)錄(lu)

FlashPure sgRNA Purification Kit高(gao)效 sgRNA 純(chun)化(hua)試劑(ji)盒(he)

目錄(lu)號(hao):91614

產(chan)品(pin)內(nei)容

自(zi)備(bei)試劑(ji)

無水乙醇

保存(cun)條(tiao)件

室溫（15 ~ 25℃）

具(ju)體(ti)產(chan)品(pin)的(de)參(can)數以(yi)收(shou)到(dao)產(chan)品(pin)說明(ming)書的(de)參(can)數為準

產(chan)品(pin)簡(jian)介

本(ben)試劑(ji)盒(he)是壹款(kuan)快速(su)可靠的(de) sgRNA 專(zhuan)用(yong)的(de)純(chun)化(hua)試劑(ji)盒(he)，可體(ti)外轉(zhuan)錄(lu)（IVT）酶(mei)促反(fan)應(ying)中純(chun)化(hua)多(duo)達 200 μg 濃(nong)縮的(de)高(gao)質量 RNA。獨te設計的(de)微量 sgRNA 純(chun)化(hua)柱(zhu)，可(ke)確保零(ling)緩(huan)沖(chong)液(ye)殘留(liu)，無交叉(cha)汙(wu)染，洗脫體(ti)積低(di)至 6μl。

在高(gao)鹽條(tiao)件下，RNA 與矽膠吸(xi)附(fu)膜高(gao)效、專(zhuan)壹(yi)地結(jie)合(he)，經(jing)過漂洗步(bu)驟(zhou)，最後 RNA 被 RNase-Free H2O洗脫下來(lai)，最大(da)限度地去除了不(bu)需要(yao)的(de) NTP、蛋白質(zhi)、無機(ji)鹽離(li)子(zi)和許(xu)多(duo)有機(ji)雜質(zhi)等，確保在 IVT/RNA 合成(cheng)反(fan)應(ying)後獲得高(gao)純(chun)度(du)的(de) RNA 轉(zhuan)錄(lu)本(ben)。洗脫後的(de) RNA 可(ke)用(yong)於(yu)多(duo)種下遊(you)應(ying)用(yong)，包(bao)括 RT-PCR、NGS、RNA 文(wen)庫制備(bei)、Northern blot、Formation of ribonucleoprotein (RNP) complexes for genome editing、顯微註(zhu)射、RNA標(biao)記、 RNA 幹(gan)擾、轉(zhuan)染等下遊(you)實驗(yan)。

本(ben)試劑(ji)盒(he)不但(dan)可以(yi)純(chun)化(hua) miRNA 等各種小的(de) RNA，也(ye)可以(yi)純(chun)化(hua)大(da)片(pian)段的(de) mRNA 等 RNA。還適用(yong)於(yu)從酶反(fan)應(ying)液(ye)（如(ru) DNase 處(chu)理(li)、體(ti)外轉(zhuan)錄(lu)、RNA 加(jia)帽、蛋白酶(mei)處(chu)理(li)、RNA 標(biao)記等）中純(chun)化(hua)回(hui)收(shou) RNA，也(ye)可用(yong)於(yu)

從(cong)其(qi)它(ta)方式提(ti)取(qu)獲得的(de) RNA 的(de)純(chun)化(hua)。

適(shi)用(yong)範(fan)圍(wei)

適(shi)用(yong)於(yu)回(hui)收(shou)≥15nt 的(de)單(dan)鏈 RNA 或者雙鏈(lian) RNA。

產(chan)品(pin)特(te)點(dian)

1. 快(kuai)速(su)：步(bu)驟(zhou)少(shao)，操(cao)作簡(jian)便(bian)，整(zheng)個(ge)操(cao)作僅需 15 分鐘(zhong)。

2. 高(gao)效：獨(du)te配(pei)方(fang)使本(ben)產(chan)品(pin)比壹般試劑(ji)盒(he)回(hui)收(shou)效率(lv)大(da)大(da)提高(gao)，並(bing)且(qie)不會抑(yi)制下遊(you)反(fan)應(ying)。

註(zhu)意事項(xiang)

1. 使用(yong)前請檢查 Buffer MRC 是否(fou)出(chu)現渾濁，如有混(hun)濁現象(xiang)，可(ke)在 37℃水浴中(zhong)加熱(re)幾(ji)分(fen)鐘(zhong)，即可恢(hui)復澄清(qing)。

2. 所(suo)有(you)步(bu)驟(zhou)均可以(yi)在室溫進(jin)行(xing)，但是應(ying)該迅(xun)速(su)操(cao)作，減(jian)少 RNA 降解(jie)機(ji)會。

3. Wash Solution 1 和(he) Wash Solution 2/3 加(jia)入無水乙醇後，可以(yi)在常(chang)溫(wen)保存(cun)。

4. Wash Solution 2/3 可(ke)能(neng)加(jia)入乙醇使用(yong)幾(ji)天(tian)後出(chu)現沈澱晶(jing)體(ti)，並(bing)不(bu)影響使用(yong)，不(bu)吸(xi)晶(jing)體(ti)，直(zhi)接(jie)吸(xi)上(shang)清使用(yong)就(jiu)可以(yi)。

操(cao)作步(bu)驟(zhou)

提(ti)示(shi)：

第(di)壹次(ci)使用(yong)前請先(xian)在 Wash Solution 1 瓶和(he) Wash Solution 2/3 瓶中加入無水乙醇，加(jia)入體(ti)積請(qing)參照瓶(ping)上(shang)的(de)標(biao)簽(qian)，並(bing)打對勾(gou)標(biao)記。

1. 於(yu)冰上(shang)，用(yong) RNase-Free H2O 將 RNA 樣品(pin)補(bu)足(zu)至 100 μl，加入 200 μl Buffer MRC，輕柔混(hun)勻。

2. 加(jia)入 375 μl （1.25 倍(bei)體(ti)積）無水乙醇，混(hun)勻(yun)，無需離(li)心。

註(zhu)意：如果希望回(hui)收(shou)大(da)於 25nt 的(de) RNA，加(jia) 1.25 倍(bei)體(ti)積無水乙醇就(jiu)可(ke)以(yi)；

如(ru)果(guo)希望回(hui)收(shou)大(da)於 15nt 的(de) RNA，可(ke)以(yi)加 2 倍(bei)體(ti)積無水乙醇。

3. 將上(shang)壹步(bu)所(suo)得(de)溶液(ye)加(jia)入壹(yi)套(tao)吸(xi)附(fu)柱(zhu)中(zhong)（吸(xi)附(fu)柱(zhu)套(tao)在收(shou)集(ji)管(guan)內(nei)），13,000 rpm 離(li)心 30 sec，棄濾液(ye)，將吸(xi)附(fu)柱(zhu)重(zhong)新套回(hui)收(shou)集(ji)管(guan)。（吸(xi)附(fu)柱(zhu)的(de)最大(da)容量是 700 ul，溶液(ye)較(jiao)多(duo)時，可(ke)分(fen)兩(liang)次進(jin)行(xing)）

4. 加(jia)入 700 μl Wash Solution 1（請(qing)先(xian)檢查是否(fou)已(yi)加入無水乙醇!），13,000 rpm 離(li)心 30 sec，棄濾液(ye)。

5. 漂洗：加入 500ul Wash Solution 2/3，13,000 rpm 離(li)心 30 sec，棄濾液(ye)。

6. 二(er)次(ci)漂洗：重復步(bu)驟(zhou) 5 壹(yi)次。

7. 幹(gan)燥：將離(li)心吸(xi)附(fu)柱(zhu)於(yu) 13,000 rpm 離(li)心 2 min，甩(shuai)幹(gan)殘留(liu)漂洗液(ye)。

8. 洗脫：將吸(xi)附(fu)柱(zhu)置(zhi)於壹(yi)個(ge)新的(de) 1.5 ml 離(li)心管中，在吸(xi)附(fu)膜的(de)中(zhong)央(yang)懸空滴(di)加(jia) 10 ~ 20 μl RNase-Free H2O，室溫放(fang)置(zhi) 2 min，13,000 rpm 離(li)心 1 min，收(shou)集(ji) RNA 片(pian)段。

註(zhu)意：為增(zeng)加回(hui)收(shou)效率(lv)，可(ke)將 RNase-Free H₂O 在 80℃預熱(re)，也可(ke)將得到的(de)溶(rong)液(ye)重(zhong)新加入到(dao)離(li)心管中，室溫放(fang)置(zhi) 2 min，再(zai)次(ci)離(li)心收(shou)集(ji)。

減(jian)少洗脫液(ye)（RNase-Free H₂O）的(de)體(ti)積可(ke)以(yi)提高(gao) RNA 濃(nong)度，但(dan)是最di洗脫液(ye)體(ti)積不(bu)應(ying)少於(yu) 6μl。

高(gao)效sgRNA純(chun)化(hua)試劑(ji)盒(he) T7體(ti)外轉(zhuan)錄(lu)