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| 品(pin)牌(pai) | NobleRyder/諾(nuo)博萊德 | 貨(huo)號 | M0209 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格 | 1ml | 供貨周(zhou)期 | 現貨(huo) |
| 主要用途 | 采用蛋白(bai)偶聯(lian)技術(shu)將SA共價連接(jie)於(yu)固相載(zai)體表(biao)面(mian),可(ke)高效(xiao)結合生w素化(hua)抗體、核(he)酸(suan)、蛋白(bai) | 應用領域 | 環(huan)保(bao),化(hua)工(gong),生物產(chan)業,農(nong)林牧漁,制藥(yao)/生物制藥(yao) |
NobleRyder M0209 鏈黴(mei)親和(he)素磁珠粒徑1μm Streptomycin magnetic beads
鏈黴(mei)親和(he)素磁珠粒徑1μm-常(chang)備(bei)現貨(huo)
產品(pin)貨(huo)號:M0209
產品(pin)名(ming)稱(cheng):鏈黴(mei)親和(he)素磁珠 粒徑1μmStreptomycin magnetic beads
英文名(ming)稱(cheng):Streptomycin magnetic beads
產品(pin)規(gui)格:1ml
產品(pin)簡(jian)介:
具(ju)體產(chan)品(pin)的(de)參(can)數以收(shou)到(dao)產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)的(de)參(can)數為準
NobleRyder M0209 鏈黴(mei)親和(he)素磁珠 粒徑1μmStreptomycin magnetic beads具(ju)有ji高的(de)結合親和力(Kd=10^-15),在(zai)生物領域具(ju)有廣(guang)泛(fan)的(de)應用。Streptavidin采用蛋白(bai)偶聯(lian)技術(shu)將SA共價連接(jie)於(yu)固相載(zai)體表(biao)面(mian),可(ke)高效(xiao)結合生wu素化(hua)抗體、核(he)酸(suan)、蛋白(bai)等配(pei)體分(fen)子。本產品(pin)采用超順磁性(xing)微(wei)球,粒(li)徑均壹、形(xing)貌規(gui)整,有(you)利於(yu)方(fang)便(bian)、快捷地捕獲(huo)目(mu)標(biao)分(fen)子以及實(shi)現磁性(xing)分離(li)。本產品(pin)可(ke)配(pei)套自(zi)動(dong)化(hua)設(she)備(bei)進行高通量(liang)操作。
產品(pin)應用範圍(僅(jin)供參考(kao)):
(1)免疫(yi)檢(jian)測(ce)、分(fen)離(li)蛋白(bai)、細胞(bao)分選(xuan)等(deng)。Streptavidin可(ke)特異(yi)性(xing)地(di)結合生wu素化(hua)抗體或抗原,作為(wei)免(mian)疫檢(jian)測(ce)、ELISA等(deng)固相反(fan)應載(zai)體,或用於(yu)分(fen)選(xuan)細胞等(deng)。
(2)分離(li)核酸(suan)、制備(bei)核(he)酸(suan)探針等。Streptavidin可(ke)特異(yi)性(xing)地(di)結合生wu素化(hua)的(de)核(he)酸(suan)探針,廣泛(fan)應用於(yu)DNA、RNA的(de)雜(za)交實驗。
(3)DNA-蛋白(bai)質相(xiang)互(hu)作用研究(jiu)。Streptavidin可(ke)特異(yi)性(xing)地(di)結合生wu素化(hua)的(de)靶(ba)點(dian)DNA或RNA片段(duan),可(ke)用於(yu)蛋白(bai)質與(yu)核酸(suan)相(xiang)互(hu)作用研究(jiu)。
結合生wu素化(hua)分(fen)子操(cao)作流(liu)程(cheng)(僅(jin)供參考(kao)):
1.使用前準備(bei)
1.1 緩(huan)沖液:以下為(wei)常(chang)用的(de)緩(huan)沖液成分,用戶可(ke)根(gen)據需(xu)要(yao)調(tiao)整(zheng)緩(huan)沖液的(de)鹽(yan)濃(nong)度(du)及(ji)pH
1.2 Buffer I(適(shi)用於(yu)結合生wu素化(hua)核(he)酸(suan)):10mMTris-HCl(pH7.5),1mMEDTA,1MNaCl,0.01%~0.1%Tween-20
1.3 Buffer II(適(shi)用於(yu)結合生wu素化(hua)抗體/蛋白(bai)):PBS,pH7.4,含0.05%Tween-20,可(ke)根(gen)據需(xu)要(yao)添加(jia)0.01%~0.1%BSA
1.4 化(hua)學(xue)發光(guang)Washingbuffer:用戶根(gen)據需(xu)求配(pei)制洗(xi)液,使用時平(ping)衡至(zhi)室(shi)溫
1.5 磁性(xing)分離(li)器(qi)
1.6 漩(xuan)渦(wo)振蕩器(qi)
1.7 旋(xuan)轉混合(he)儀(yi)
1.8 移(yi)液器(qi)及吸(xi)頭(tou)
1.9 合適(shi)的(de)離(li)心(xin)管
2. 結合生wu素化(hua)核(he)酸(suan)
2.1. 將磁珠瓶(ping)置於(yu)漩(xuan)渦(wo)振蕩器(qi)上20s,振蕩重懸(xuan)磁珠。用移(yi)液器(qi)移(yi)取(qu)100μL磁珠到(dao)新的(de)離(li)心(xin)管中(zhong)。將離心(xin)管置於(yu)磁性(xing)分離(li)器(qi)上,靜置1min(此操(cao)作後續簡(jian)稱(cheng)為磁性(xing)分離(li)),用移(yi)液器(qi)吸去(qu)上清液,從(cong)磁性(xing)分離(li)器(qi)上取(qu)下(xia)離心(xin)管。
備(bei)註(zhu):用戶可(ke)根(gen)據生wu素化(hua)分(fen)子的(de)多少(shao),參(can)考(kao)產品(pin)信息(xi)表(biao)中(zhong)磁珠的(de)載(zai)量(liang),計算(suan)需(xu)要(yao)取(qu)用的(de)磁珠量(liang)。建議生wu素化(hua)分(fen)子的(de)加(jia)入量(liang)為磁珠載(zai)量(liang)的(de)1~2倍(bei),使磁珠飽(bao)和。
2.2. 加(jia)入 1mLBuffer I 到(dao)離(li)心(xin)管中(zhong),蓋上離心(xin)管蓋,充(chong)分(fen)振蕩重(zhong)懸(xuan)磁珠。磁性(xing)分離(li),移(yi)去(qu)上清液。
備(bei)註(zhu):當步驟2.1取(qu)用磁珠體積大(da)於(yu)1mL時(shi),加(jia)入與磁珠體積相(xiang)同的(de)BufferI。
2.3. 重復“步(bu)驟2.2"壹次(ci)。
2.4. 加(jia)入500μL 的(de)用Buffer I稀(xi)釋(shi)的(de)生wu素化(hua)核(he)酸(suan)(使(shi)磁珠濃(nong)度(du)為(wei)2mg/mL),充(chong)分(fen)振蕩(dang)重懸(xuan)磁珠。將離心(xin)管置於(yu)旋(xuan)轉混合(he)儀(yi)上,室(shi)溫旋(xuan)轉混合(he)30min。
2.5. 磁性(xing)分離(li),將上清液轉移(yi)至(zhi)新的(de)離(li)心(xin)管。
2.6. 按“步(bu)驟 2.2"的(de)方(fang)法(fa)洗(xi)滌磁珠三次。
2.7. 根(gen)據後續實(shi)驗的(de)要(yao)求,加(jia)入合適(shi)的(de)低(di)鹽緩(huan)沖液,重懸(xuan)磁珠。至(zhi)此結合生wu素化(hua)核(he)酸(suan)步(bu)驟完成。磁珠可(ke)用於(yu)後續操(cao)作。
2.8. 用戶可(ke)以通過測定反(fan)應前後核(he)酸(suan)的(de)濃(nong)度(du),計(ji)算(suan)結合到(dao)磁珠上的(de)核(he)酸(suan)量(liang)((反(fan)應前濃(nong)度(du)反(fan)應後濃(nong)度(du))×反(fan)應溶液體積(ji))。
3. 結合生wu素化(hua)抗體/蛋白(bai)操作流(liu)程(cheng)
3.1. 將磁珠瓶(ping)置於(yu)漩(xuan)渦(wo)振蕩器(qi)上20s,振蕩重懸(xuan)磁珠。用移(yi)液器(qi)移(yi)取(qu)100μL磁珠到(dao)新的(de)離(li)心(xin)管中(zhong)。磁性(xing)分離(li),用移(yi)液器(qi)吸去(qu)上清液,從(cong)磁性(xing)分離(li)器(qi)上取(qu)下(xia)離心(xin)管。
備(bei)註(zhu):用戶可(ke)根(gen)據生wu素化(hua)分(fen)子的(de)多少(shao),參(can)考(kao)產品(pin)信息(xi)表(biao)中(zhong)磁珠的(de)載(zai)量(liang),計算(suan)需(xu)要(yao)取(qu)用的(de)磁珠量(liang)。建議生wu素化(hua)分(fen)子的(de)加(jia)入量(liang)為磁珠載(zai)量(liang)的(de)1~2倍(bei),使磁珠飽(bao)和。
3.2. 加(jia)入1mLBuffer II 到(dao)離(li)心(xin)管中(zhong),蓋上離心(xin)管蓋,充(chong)分(fen)振蕩重(zhong)懸(xuan)磁珠。磁性(xing)分離(li),移(yi)去(qu)上清液。
備(bei)註(zhu):當步驟3.1取(qu)用磁珠體積大(da)於(yu)1mL時(shi),加(jia)入與磁珠體積相(xiang)同的(de)BufferII。
3.3. 重復“步(bu)驟3.2"兩(liang)次,共洗(xi)滌三次。
3.4. 加(jia)入1mL用Buffer II 稀(xi)釋(shi)的(de)生wu素化(hua)抗體/蛋白(bai)(使磁珠濃(nong)度(du)為(wei)1mg/mL),充(chong)分(fen)振蕩(dang)重懸(xuan)磁珠。將離心(xin)管置於(yu)旋(xuan)轉混合(he)儀(yi)上,室(shi)溫旋(xuan)轉混合(he)60min。
3.5. 磁性(xing)分離(li),將上清液轉移(yi)至(zhi)新的(de)離(li)心(xin)管。
3.6. 按“步(bu)驟3.2"的(de)方(fang)法(fa)洗(xi)滌磁珠五(wu)次(ci)。
3.7. 根(gen)據後續實(shi)驗的(de)要(yao)求,加(jia)入BufferII或其(qi)他(ta)合適(shi)的(de)緩(huan)沖液,重懸(xuan)磁珠。至(zhi)此結合生wu素化(hua)抗體/蛋白(bai)步驟完成。磁珠可(ke)用於(yu)後續操(cao)作。
4 磁微(wei)粒化(hua)學(xue)發光(guang)免疫(yi)診斷操(cao)作流(liu)程(cheng)
4.1. 調整(zheng)磁珠至(zhi)合適(shi)濃(nong)度(du)(建議0.2-0.8mg/mL),將磁珠置於(yu)漩(xuan)渦(wo)振蕩器(qi)上20s,振蕩重懸(xuan)磁珠。用移(yi)液器(qi)移(yi)取(qu)50μL 磁珠至(zhi)96孔板(ban)中(zhong),磁性(xing)分離(li),用移(yi)液器(qi)吸去(qu)上清液,從(cong)磁性(xing)分離(li)器(qi)上取(qu)下(xia)96孔板。
4.2. 每孔(kong)加(jia)入100μL生wu素化(hua)捕(bu)獲抗體,充(chong)分(fen)震蕩重(zhong)懸(xuan)磁珠,37℃恒溫箱中(zhong)孵育(yu)15min後,
磁性(xing)分離(li),用移(yi)液器(qi)吸去(qu)上清液,從(cong)磁性(xing)分離(li)器(qi)上取(qu)下(xia)96孔板。
4.3. 每孔(kong)加(jia)入200μL的(de)Washingbuffer,充(chong)分震蕩重(zhong)懸(xuan)磁珠,磁性(xing)分離(li),用移(yi)液器(qi)吸去(qu)上清液,從(cong)磁性(xing)分離(li)器(qi)上取(qu)下(xia)96孔板,該步驟再(zai)重復2次(ci),共洗(xi)滌3次。
4.4. 每孔(kong)加(jia)入50μL 待測(ce)物標(biao)準(zhun)品(pin)或待測樣(yang)本,充分(fen)震(zhen)蕩重(zhong)懸(xuan)磁珠,37℃恒溫箱中(zhong)孵育(yu)15min後,磁性(xing)分離(li),用移(yi)液器(qi)吸去(qu)上清液,從(cong)磁性(xing)分離(li)器(qi)上取(qu)下(xia)96孔板。
4.5. 每孔(kong)加(jia)入200μL 的(de)Washingbuffer,充(chong)分震蕩重(zhong)懸(xuan)磁珠,磁性(xing)分離(li),用移(yi)液器(qi)吸去(qu)上清液,從(cong)磁性(xing)分離(li)器(qi)上取(qu)下(xia)96孔板,該步驟再(zai)重復2次(ci),共洗(xi)滌3次。
4.6. 每孔(kong)加(jia)入100μL 酶標(biao)記(ji)抗體,充(chong)分(fen)震蕩重(zhong)懸(xuan)磁珠,37℃恒溫箱中(zhong)孵育(yu)15min 後,磁性(xing)分離(li),用移(yi)液器(qi)吸去(qu)上清液,從(cong)磁性(xing)分離(li)器(qi)上取(qu)下(xia)96孔板。
4.7. 每孔(kong)加(jia)入200μL 的(de)Washingbuffer,充(chong)分震蕩重(zhong)懸(xuan)磁珠,磁性(xing)分離(li),用移(yi)液器(qi)吸去(qu)上清液,從(cong)磁性(xing)分離(li)器(qi)上取(qu)下(xia)96孔板,該步驟再(zai)重復2次(ci),共洗(xi)滌3次。
4.8. 每孔(kong)加(jia)入150μL的(de)底(di)物液,充分(fen)震蕩(dang)重(zhong)懸(xuan)磁珠,避光(guang)孵育(yu)5min。
4.9. 將 96 孔(kong)板放(fang)入(ru)化(hua)學(xue)發光(guang)儀(yi)讀數(shu),並進行相應數據(ju)處(chu)理(li)。
註意(yi)事項(xiang):
1. 應避免(mian)對(dui)磁珠進行冷(leng)凍等(deng)操作。
2. 為減(jian)少(shao)磁珠損(sun)失,每(mei)次(ci)磁性(xing)分離(li)的(de)時(shi)間應不少(shao)於(yu)1min。
3. 從(cong)磁珠保(bao)存(cun)管中(zhong)移(yi)取(qu)磁珠前應充分(fen)震(zhen)蕩重懸(xuan)均勻。操作過(guo)程(cheng)中(zhong)應避免(mian)產(chan)生氣泡(pao)。
4. 建議使用質量(liang)好的(de)移(yi)液器(qi)吸頭(tou)和(he)反(fan)應管,避免(mian)因(yin)粘附(fu)磁珠及溶液而造(zao)成損(sun)失。
5. 生wu素化(hua)分(fen)子的(de)大(da)小會(hui)影響(xiang)磁珠的(de)載(zai)量(liang)。用戶需(xu)要(yao)根(gen)據實驗確定(ding)磁珠對特定(ding)生wu素化(hua)分(fen)子的(de)載(zai)量(liang)。
6. 生wu素化(hua)分(fen)子的(de)加(jia)入量(liang)應為磁珠載(zai)量(liang)的(de)1~2倍(bei),以使磁珠飽(bao)和。
7. 如需(xu)生wu素與(yu)SA磁珠分離,可(ke)采用:方法(fa)壹:0.1%SDS,煮(zhu)沸(fei)5min;方(fang)法(fa)二:pH=8.2,含(han)95%甲酰(xian)胺的(de)10mMEDTA中(zhong),65℃5min或90℃2min。脫落(luo)率(lv)95%。
8. 本產品(pin)僅(jin)供科研(yan)使用。請(qing)勿(wu)用於(yu)醫藥(yao)、臨(lin)床(chuang)診斷或治療,食(shi)品(pin)及(ji)化(hua)妝(zhuang)品(pin)等(deng)用途。請(qing)勿(wu)存(cun)放於(yu)普通住宅(zhai)區(qu)。
9. 為了(le)您的(de)安(an)全和健康,請(qing)穿(chuan)好實驗(yan)服(fu)並佩戴(dai)壹次(ci)性(xing)手套(tao)和口罩操作。
鏈黴(mei)親和(he)素磁珠粒徑1μm-常(chang)備(bei)現貨(huo)
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M0209 鏈黴(mei)親和(he)素磁珠 粒徑1μmStreptomycin magnetic beads 1ml