采(cai)用 Trizol 試(shi)劑(ji)與離(li)心(xin)吸附柱(zhu)結合提取總RNA的(de)方(fang)法(fa)，簡化(hua)了(le)RNA提取的(de)流(liu)程(cheng)，與經典(dian)的(de)異(yi)丙(bing)醇(chun)沈(chen)澱法(fa)相比，柱(zhu)式純(chun)化(hua)方法(fa)簡便(bian)，去除(chu)雜(za)質(zhi)能(neng)力(li)更強(qiang)，大大提高了(le) RNA 的(de)純(chun)度(du)。該試劑(ji)盒可(ke)從各種細(xi)胞或(huo)組(zu)織（動(dong)物(wu)、植(zhi)物(wu)、血(xue)液）中快(kuai)速提取總 RNA，每個吸附柱(zhu)每次(ci)可(ke)處理(li) 50-100 mg 組(zu)織或(huo) 5×106 細(xi)胞，可(ke)同時處理(li)大量(liang)不同(tong)樣品(pin)。

諾(nuo)博(bo)萊德(de)通(tong)用(yong)型(xing)總RNA快(kuai)速提取試劑(ji)盒 升(sheng)級版

諾(nuo)博(bo)萊德(de) 通(tong)用(yong)型(xing)總RNA快(kuai)速提取試劑(ji)盒 升(sheng)級版 

Universal Total RNA Kit通(tong)用(yong)型(xing)總 RNA 提取試劑(ji)盒 

目錄號：91013

產品(pin)內(nei)容(rong)

自備(bei)試劑(ji)

無水(shui)乙(yi)醇

保存(cun)條件

室(shi)溫(wen)（15 ~ 25℃）

具體(ti)產品(pin)的(de)參(can)數(shu)以收(shou)到(dao)產品(pin)說明(ming)書(shu)的(de)參(can)數(shu)為(wei)準(zhun)

產品(pin)簡介(jie)

采(cai)用 Trizol 試劑(ji)與離(li)心(xin)吸附柱(zhu)結合提取總RNA的(de)方(fang)法(fa)，簡化(hua)了(le)RNA提取的(de)流(liu)程(cheng)，與經典(dian)的(de)異(yi)丙(bing)醇(chun)沈(chen)澱法(fa)相比，柱(zhu)式純(chun)化(hua)方法(fa)簡便(bian)，去除(chu)雜(za)質(zhi)能(neng)力(li)更強(qiang)，大大提高了(le) RNA 的(de)純(chun)度(du)。該試劑(ji)盒可(ke)從各種細(xi)胞或(huo)組(zu)織（動(dong)物(wu)、植(zhi)物(wu)、血(xue)液）中快(kuai)速提取總 RNA，每個吸附柱(zhu)每次(ci)可(ke)處理(li) 50-100 mg 組(zu)織或(huo) 5×10⁶ 細(xi)胞，可(ke)同時處理(li)大量(liang)不同(tong)樣品(pin)。壹(yi)個小(xiao)時內即可(ke)完(wan)成反應，提取的(de)總RNA沒有 DNA 和蛋白(bai)的(de)汙染(ran)，可用(yong)於(yu) Northern Blot、Dot Blot、PolyA 篩選、體(ti)外(wai)翻(fan)譯(yi)、RNase 保護分析和分子(zi)克(ke)隆(long)。

產品(pin)特(te)點(dian)

1. RNA 純度(du)更高(gao)；

2. 應用(yong)廣泛：可提取多種不同(tong)的(de)樣本材料(liao)。

3. 本公(gong)司生(sheng)產(chan)的(de) Universal Total RNA Kit 質(zhi)量(liang)優異(yi)，可(ke)以完(wan)mei替代 Thermo的(de) TRIzol Plus RNA Purfication Kit。

4. 可在常(chang)溫(wen)下(xia)提取 RNA，不需(xu)要(yao) 4℃離(li)心(xin)機(ji)；亦可以兼(jian)容 4℃離(li)心(xin)機(ji)。

註意(yi)事項(xiang)

1. RNA 在裂解(jie)液 RL 中時不會(hui)被 RNase 降解(jie)，但(dan)後(hou)續(xu)處理(li)過程中應(ying)使(shi)用不含(han)RNase的(de)吸頭(tou)和玻璃(li)器皿，璃(li)器皿可在150℃烘烤(kao)4 h，塑料(liao)器皿可在 0.5 M NaOH 中浸泡 10 min，然(ran)後(hou)用(yong)水(shui)徹(che)di洗凈，再(zai)高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)。

2. 樣品(pin)應(ying)避(bi)免(mian)反復凍融(rong)，否則(ze)會影(ying)響 RNA 的(de)提取得率(lv)和質量(liang)。

3. 樣品(pin)加(jia)入(ru)裂解(jie)液 RL（RNAzol）勻(yun)漿後(hou)，加(jia)氯(lv)仿前(qian)，樣品(pin)可(ke)在–80℃保存(cun)壹個月以上(shang)。

4. 取 RNA 樣本時，把(ba)新(xin)鮮(xian)組(zu)織樣本浸入 RNAsafe (RNA 樣品(pin)保存(cun)液，91115-100)中，可(ke)在 37℃保存(cun)壹天，在 25℃保存(cun)壹周(zhou)，在 4℃保存(cun)壹個月，在-20℃或(huo)者(zhe)–80℃長(chang)期(qi)保存(cun)。

操(cao)作(zuo)步驟

第壹次(ci)使(shi)用前(qian)，請先(xian)在漂(piao)洗(xi)液(ye) RW 中加(jia)入(ru)指(zhi)ding量(liang)無水(shui)乙(yi)醇，詳見(jian)瓶(ping)上(shang)的(de)標(biao)簽(qian)。

提示：所有離(li)心(xin)步驟均(jun)可在室(shi)溫(wen)（15~37℃）下(xia)進(jin)行，提取效果(guo)更佳！

1. 材料(liao)處理(li)：

a．組(zu)織（動(dong)物(wu)、植(zhi)物(wu)、真菌）：將(jiang)組(zu)織在液(ye)氮中磨(mo)成細(xi)粉。每 30~50 mg 動(dong)物(wu)組(zu)織加(jia) 1ml 裂解(jie)液RL，每50~100 mg植(zhi)物(wu)/真菌組(zu)織加(jia) 1ml 裂解(jie)液RL，渦(wo)旋(xuan) 15sec。樣品(pin)體(ti)積不應(ying)超(chao)過裂解(jie)液RL體(ti)積的(de)10%。

b．單(dan)層貼壁(bi)培養(yang)細(xi)胞：吸去(qu)培養(yang)液(ye)，加(jia)入(ru)適量(liang)裂解(jie)液RL，每 10cm2 加(jia)1ml裂解(jie)液RL，用(yong)移液(ye)器抽(chou)打幾(ji)次(ci)。

c． 細(xi)胞懸(xuan)液(ye)：離(li)心(xin)收(shou)集(ji)細(xi)胞，棄(qi)上(shang)清，每 5×10⁶ 個細(xi)胞加(jia)1ml裂解(jie)液RL。加(jia)裂解(jie)液 RL 前(qian)不要(yao)洗滌細(xi)胞，以免(mian)降解(jie)mRNA。

d．血(xue)液：取新(xin)鮮(xian)血(xue)液，加入(ru)5倍(bei)體(ti)積裂解(jie)液RL，（推(tui)薦(jian)0.2ml血(xue)液+1 ml 裂解(jie)液 RL ），充(chong)分振(zhen)蕩混勻(yun)。

2. 將勻(yun)漿樣品(pin)在室(shi)溫(wen)下(xia)放置(zhi) 5 min，使(shi)得核(he)酸蛋白(bai)復合(he)物(wu)完(wan)quan分離(li)。

3. 可選步驟：12,000 rpm 離(li)心(xin) 5 min，轉移上(shang)清至壹(yi)新(xin)的(de)離(li)心(xin)管(guan)中。

（註意(yi)：如果(guo)樣品(pin)中含(han)有較(jiao)多蛋白(bai)、脂肪(fang)、多糖(tang)或(huo)肌(ji)肉(rou)、植(zhi)物(wu)結節部位(wei)等(deng)可加此(ci)步驟離(li)心(xin)去除(chu)，離(li)心(xin)得到(dao)的(de)沈(chen)澱中含(han)有細(xi)胞外(wai)膜(mo)、多糖(tang)、高(gao)分子(zi) DNA 等(deng)，RNA 存(cun)在於(yu)上(shang)清液中）

4. 向上(shang)清（或(huo)裂解(jie)液混合液(ye)）中加(jia)入(ru)等體(ti)積的(de)無水(shui)乙(yi)醇，混勻(yun)，此(ci)時可能會出現(xian)沈(chen)澱，每次(ci)將(jiang)≤750 ul 溶液和沈(chen)澱壹(yi)起轉入(ru)RNA吸附柱(zhu)中，12,000rpm離(li)心(xin)1 min，倒棄濾液，若壹(yi)次(ci)不能(neng)轉移完(wan)quan，可(ke)分次(ci)轉移。

5. 向吸附柱(zhu)內加(jia)入500 ul 去(qu)蛋白(bai)液 RE，12,000 rpm 離(li)心(xin) 1 min，倒棄

濾液。

6. 向吸附柱(zhu)內加(jia)入500ul漂(piao)洗(xi)液(ye)RW，12,000rpm離(li)心(xin)1 min，棄濾液。

（註意(yi)：請檢(jian)查(zha)漂(piao)洗(xi)液(ye) RW 中是(shi)否(fou)已按(an)要求加(jia)入無水(shui)乙(yi)醇！）

7. 重復(fu)步驟 6 壹次(ci)。

8. 將RNA吸附柱(zhu)放回(hui)空(kong)收(shou)集(ji)管(guan)中，12,000 rpm 離(li)心(xin) 2min，甩(shuai)幹膜(mo)上(shang)殘

留的(de)乙(yi)醇。

9. 取出RNA吸附柱(zhu)，放入(ru)壹(yi)個新(xin)的(de)RNase-Free 1.5 ml 離(li)心(xin)管(guan)中，向(xiang)吸附膜的(de)中央(yang)部位(wei)懸(xuan)空(kong)滴(di)加50~100ul RNase-Free ddH₂O，室(shi)溫(wen)放置(zhi)2min，12,000 rpm離(li)心(xin)1 min，管(guan)底即RNA 溶(rong)液(ye)。

10. 提取的(de)RNA可(ke)直接用(yong)於下(xia)遊(you)實驗，或(huo)於(yu)-70℃保存(cun)，以防(fang)降解(jie)。

相關(guan)產品(pin)： 

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71711-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用(yong)於所有 qPCR 儀(yi))

諾(nuo)博(bo)萊德(de) 通(tong)用(yong)型(xing)總RNA快(kuai)速提取試劑(ji)盒 升(sheng)級版