適用(yong)於(yu)快(kuai)速(su)提取(qu)各種(zhong)動物(wu)組織(zhi)、細胞(bao)、昆(kun)蟲(chong)的(de)總RNA，RNA可(ke)直接(jie)用(yong)於(yu)RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通轉錄組測序、RACE等(deng)。
動(dong)物(wu)組織(zhi)/細胞(bao)/昆(kun)蟲(chong)總(zong)RNA快(kuai)速(su)提取(qu)試(shi)劑(ji)盒

動物(wu)組織(zhi)/細胞(bao)/昆(kun)蟲(chong)總(zong)RNA快(kuai)速(su)提取(qu)試(shi)劑(ji)盒 

FlashPure Tissue/Cell/Insect Total RNA Mini Kit動物(wu)組織(zhi)/細胞(bao)/昆(kun)蟲(chong)總(zong) RNA 提取(qu)試(shi)劑(ji)盒 

目(mu)錄號(hao)：91017

產品內容

自備試劑(ji)

無水乙(yi)醇

保存條件

室溫(wen)（15 ~ 25℃）下，存放(fang) 12 個(ge)月(yue)，不影響(xiang)使(shi)用(yong)效果。

具體產品的參數以收到(dao)產(chan)品說明(ming)書的參數(shu)為(wei)準(zhun)

產品簡介

適用(yong)於(yu)快(kuai)速(su)提取(qu)各種(zhong)動物(wu)組織(zhi)、細胞(bao)、昆(kun)蟲(chong)的(de)總RNA，RNA可(ke)直接(jie)用(yong)於(yu)RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通轉錄組測序、RACE等(deng)。

產品特(te)點

1. 無毒(du)：免氯仿、免β-巰基乙(yi)醇！

2. 高(gao)質：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！

3. 高(gao)效：提取(qu)全過(guo)程(cheng)僅需(xu) 20min！

操作(zuo)步驟

提示(shi)：

第壹(yi)次使(shi)用(yong)前，請(qing)先在漂(piao)洗液(ye) RW 和(he) 70%乙(yi)醇中加入(ru)指ding量(liang)無水乙(yi)醇。

所有(you)離(li)心步驟均(jun)需(xu)要(yao)在室(shi)溫(wen)（15 ~37℃）下進行。

1. 動物(wu)組織(zhi)、昆(kun)蟲(chong)

a. 電動(dong)勻漿(jiang)：取新(xin)鮮(xian)組織 10~20 mg 加入(ru) 350 μl 的(de)裂解(jie)液 ARL，電(dian)動勻漿，直(zhi)到(dao)無(wu)明(ming)顯組(zu)織塊(kuai)即可。

b. 液氮研(yan)磨：轉移(yi) 350 μl 裂解(jie)液 ARL 至(zhi) 1.5 ml 離(li)心管中。液(ye)氮研(yan)磨組(zu)織成細粉，取 10~20 mg 組(zu)織細粉轉入(ru)裝有(you)裂(lie)解(jie)液的(de) 1.5ml 離(li)心管中，劇烈(lie)渦旋振蕩，充(chong)分(fen)裂(lie)解(jie)。

( 註意(yi)：裂解(jie) 20-30 mg 動物(wu)組織(zhi)，需(xu)要(yao)加入(ru) 600μl 裂(lie)解(jie)液 ARL )

c. 將勻(yun)漿後裂解(jie)物(wu) 13,000 rpm 離(li)心 3 min，轉移(yi)上(shang)清(qing)至(zhi)新的(de)離(li)心管中。

d. 下接(jie)步驟 3。

2. 細胞(bao)

a. 懸浮(fu)細胞(bao)：離(li)心收集(ji)細胞(bao)，加350μl裂(lie)解(jie)液ARL（<5x106 細胞(bao)）或600μl裂解(jie)液ARL（5x106-1x107 細胞(bao)），吹(chui)打混勻(yun)，劇烈(lie)渦旋振蕩，充(chong)分(fen)混(hun)勻，裂(lie)解(jie)細胞(bao)。

b. 貼(tie)壁細胞(bao)：不需(xu)要(yao)消化，徹(che)di吸(xi)幹培(pei)養(yang)液(ye)後，直接(jie)加裂(lie)解(jie)液 ARL，反復(fu)吹(chui)打細胞(bao)，幫助(zhu)裂解(jie)；細胞(bao)培(pei)養(yang)瓶要先用胰蛋bai酶(mei)消化後離(li)心收集(ji)細胞(bao)，然後加入(ru)裂(lie)解(jie)液 ARL，吹(chui)打混勻(yun)，劇烈(lie)渦旋振蕩 20 sec，充(chong)分(fen)裂(lie)解(jie)。

（< 5x106細胞(bao)加 350 μl裂(lie)解(jie)液 ARL ；5x106-1x107細胞(bao)加 600 μl 裂(lie)解(jie)液 ARL）

（壹般(ban)情(qing)況下(xia)，24 孔(kong)板、6 孔(kong)板、直(zhi)徑 3.5cm 的培(pei)養(yang)皿，每(mei)孔(kong)加 350 μl

裂解(jie)液 ARL，直(zhi)徑 6cm 以上的(de)培(pei)養(yang)容器(qi)加(jia) 600 μl 裂(lie)解(jie)液 ARL）

c. 下接(jie)步驟 3。

3. 向(xiang)上清(qing)或者裂(lie)解(jie)物(wu)中加(jia)入(ru)等(deng)體積(ji)（通(tong)常(chang)為 350 μl / 600 μl）的 70%乙(yi)醇，

吹(chui)打混勻(yun)。

4. 每(mei)次(ci)轉移(yi)≤700 μl 混(hun)合物(wu)至(zhi)壹個(ge) RNA 吸(xi)附(fu)柱中(zhong)（吸(xi)附(fu)柱放(fang)入(ru)收集(ji)管中），

13,000 rpm 離(li)心 30 sec，倒棄濾(lv)液，此時 RNA 被(bei)吸(xi)附(fu)在膜(mo)上。重復此

過程(cheng)，直到(dao)溶(rong)液全部上(shang)柱。

5. 加入(ru)700μl 去(qu)蛋白(bai)液(ye) RW1，室(shi)溫(wen)放置 1 min，13,000 rpm 離(li)心 30 sec，

倒棄濾(lv)液。

6.加入(ru)500μl漂(piao)洗液(ye) RW，13,000 rpm 離(li)心30sec，倒棄濾(lv)液。

7. 重復步驟 6。

8. 將 RNA 吸(xi)附(fu)柱放(fang)回(hui)收集(ji)管中，13,000 rpm 離(li)心 2 min，除(chu)去(qu)膜(mo)上(shang)乙(yi)醇。

9. 取出(chu)RNA吸(xi)附(fu)柱，放(fang)入(ru)壹(yi)個(ge)新(xin)的(de) 1.5 ml RNase - free 離(li)心管中，向(xiang)吸(xi)附(fu)膜的(de)中央(yang)部位(wei)懸空(kong)滴(di)加(jia)30~50 μl RNase free H2O（事(shi)先在70-90℃水浴中(zhong)加熱可提高(gao)產量(liang)），室溫(wen)放置 1 min，13,000 rpm 離(li)心 1 min。

10.提取(qu)的(de)RNA可(ke)直(zhi)接(jie)用於下(xia)遊實驗，或於-70℃保(bao)存，避(bi)免 RNA 降解(jie)。

相(xiang)關(guan)產品： 

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用(yong)於(yu)所有(you)qPCR儀(yi))

附(fu)錄：

壹、免液氮直接研(yan)磨（自(zi)動研(yan)磨儀(yi)）——適用(yong)於(yu)新鮮(xian)樣本(ben)

a. 在2.0 ml液(ye)氮研(yan)磨管中加(jia)入(ru)4 mm兩粒，加600μl裂解(jie)液ARL，放(fang)進20mg 左(zuo)右(you)的(de)樣本(ben)，設(she)置65個(ge)頻(pin)率，震(zhen)蕩2min。

b. 將裂(lie)解(jie)物(wu) 13,000 rpm 離(li)心 3 min，沈澱不能裂(lie)解(jie)的碎(sui)片(pian)。

二、液(ye)氮研(yan)磨（自(zi)動研(yan)磨儀(yi)）:

a. 把(ba)研(yan)磨模(mo)塊(kuai)丟(diu)到(dao)液(ye)氮中預冷(leng)，直到(dao)沒(mei)有(you)氣泡冒出(chu)視(shi)為(wei)預冷(leng)完畢。

b. 在 2.0 ml 液(ye)氮研(yan)磨管中放(fang)入(ru) 3mm 鋼(gang)珠 3 粒，放(fang)進(jin) 20-30mg 樣本(ben)，

投入(ru)液(ye)氮中預冷(leng)。

c. 把(ba)預冷(leng)好的(de)離(li)心管插入(ru)研(yan)磨模(mo)塊(kuai)中，放(fang)進研(yan)磨儀(yi)，設(she)置 55 個(ge)頻(pin)率，

震(zhen)蕩 30~60 sec。（以(yi)北(bei)京赫得(de)研(yan)磨儀(yi)——京 N9548 為例(li)）

d. 研(yan)磨完成(cheng)後，馬(ma)上(shang)加(jia) 600 μl 裂(lie)解(jie)液 ARL，劇烈(lie)渦旋振蕩,充(chong)分(fen)混(hun)勻。

e. 將裂(lie)解(jie)物(wu) 13,000 rpm 離(li)心 3 min，沈澱不能裂(lie)解(jie)的碎(sui)片(pian)。

動物(wu)組織(zhi)/細胞(bao)/昆(kun)蟲(chong)總(zong)RNA快(kuai)速(su)提取(qu)試(shi)劑(ji)盒