本試劑(ji)盒是同類產(chan)品(pin)中適應性(xing)最guang泛，不但(dan)可以(yi)提(ti)取(qu)小(xiao)麥、玉(yu)米、水稻(dao)、大(da)豆(dou)、番(fan)茄、煙草、擬(ni)南芥(jie)等簡單植(zhi)物(wu)，也(ye)可以(yi)提(ti)取(qu)茶(cha)樹(shu)葉片(pian)、棉花(hua)葉片(pian)、葡萄(tao)葉片(pian)、楊樹(shu)葉片(pian)、番(fan)薯葉片(pian)、花(hua)生葉片(pian)、香蕉葉片(pian)、荔(li)枝(zhi)葉片(pian)、白松(song)葉片(pian)等多糖(tang)多酚含(han)量壹(yi)般(ban)的植(zhi)物(wu)。
高(gao)效植(zhi)物(wu)總(zong)RNA提(ti)取(qu)試劑(ji)盒（帶gDNA清除柱）

諾博(bo)萊德(de) 高(gao)效植(zhi)物(wu)總(zong)RNA提(ti)取(qu)試劑(ji)盒（帶gDNA清除柱）

高(gao)效植(zhi)物(wu)總(zong) RNA 提(ti)取(qu)試劑(ji)盒FlashPure Plus Plant Total RNA Mini Kit

目錄號：91452

產(chan)品(pin)內(nei)容(rong)

自備(bei)試劑(ji)

無(wu)水(shui)乙(yi)醇

保(bao)存(cun)條件

室(shi)溫（15 ~ 25℃）

具體產(chan)品(pin)的(de)參(can)數以(yi)收到(dao)產(chan)品(pin)說明書的(de)參(can)數為(wei)準(zhun)

產(chan)品(pin)簡介(jie)

適(shi)用(yong)於(yu)快(kuai)速(su)提(ti)取(qu)各種植物(wu)根(gen)、莖(jing)、葉、花(hua)的總(zong)RNA，gDNA過(guo)濾(lv)器能高(gao)效濾(lv)除gDNA，RNA可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)於(yu)RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通轉(zhuan)錄組測(ce)序(xu)、RACE、芯片(pian)等。

本試劑(ji)盒是同類產(chan)品(pin)中適應性(xing)最guang泛，不但(dan)可以(yi)提(ti)取(qu)小(xiao)麥、玉(yu)米、水稻(dao)、大(da)豆(dou)、番(fan)茄、煙草、擬(ni)南芥(jie)等簡單植(zhi)物(wu)，也(ye)可以(yi)提(ti)取(qu)茶(cha)樹(shu)葉片(pian)、棉花(hua)葉片(pian)、葡萄(tao)葉片(pian)、楊樹(shu)葉片(pian)、番(fan)薯葉片(pian)、花(hua)生葉片(pian)、香蕉葉片(pian)、荔(li)枝(zhi)葉片(pian)、白松(song)葉片(pian)等多糖(tang)多酚含(han)量壹(yi)般(ban)的植(zhi)物(wu)。

如(ru)果遇(yu)到(dao)果實(shi)、種子、中草藥，例(li)如(ru)：多糖(tang)多酚巨高(gao)的作(zuo)物(wu)種子（小(xiao)麥/玉(yu)米/大(da)豆(dou)/水稻）、葡萄(tao)果(guo)實(shi)、藍(lan)莓果(guo)實(shi)、百(bai)合(he)鱗(lin)莖(jing)、土(tu)豆(dou)塊莖(jing)；或者(zhe)次(ci)級(ji)代(dai)謝(xie)產(chan)物(wu)巨(ju)豐(feng)富(fu)的葛(ge)根(gen)、虎杖(zhang)、雪(xue)蓮等藥用(yong)植(zhi)物(wu)，請(qing)選(xuan)擇(ze)91513-果(guo)實(shi)種子總(zong)RNA提(ti)取(qu)試劑(ji)盒。

產(chan)品(pin)特(te)點

1. 無(wu)毒(du)：免(mian)氯(lv)仿(fang)、免(mian)β-巰基乙(yi)醇！

2. 高(gao)質：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！

3. 高(gao)效：提(ti)取(qu)全過(guo)程僅(jin)需 20min！

重(zhong)要提(ti)示：

a. 第(di)壹(yi)次(ci)使(shi)用(yong)前(qian)請先在漂洗(xi)液(ye)RW中加入指(zhi)ding量無(wu)水(shui)乙(yi)醇，詳見(jian)瓶身(shen)的(de)標(biao)簽。

b. 所(suo)有(you)離(li)心步驟均(jun)需要在室(shi)溫（15 ~25℃）下(xia)進行(xing)。

操(cao)作(zuo)步驟：

1. 材(cai)料處(chu)理：

a．在液(ye)氮中研(yan)磨植(zhi)物(wu)組織成細粉(fen)，取(qu) 50 ~ 100 mg 細粉(fen)加(jia)入 600 μl裂解液(ye) PAL Plus，立(li)即(ji)劇烈渦(wo)旋震(zhen)蕩 30 sec，充(chong)分(fen)混勻(yun)。

b．將(jiang)裂解物(wu) 13,000 rpm 離(li)心 5 ~ 10 min，沈(chen)澱(dian)不能(neng)裂解的(de)碎(sui)片(pian)。

2. 小(xiao)心吸(xi)取(qu) 500 μl 上(shang)清轉(zhuan)入壹個 DNA 清(qing)除(chu)和(he) RNA 吸(xi)附通(tong)用(yong)柱（以(yi)下簡稱(cheng)通(tong)用(yong)柱），13,000 rpm 離(li)心 1 min，DNA 被(bei)吸(xi)附在膜上(shang)，丟(diu)棄帶吸(xi)附膜(mo)的(de)內(nei)柱，保留濾(lv)液(ye)（RNA 在濾(lv)液(ye)中）。

3. 向濾(lv)液(ye)中加入 0.5 倍(bei)體積(ji) (壹般(ban) 250 μl ) 的無(wu)水乙(yi)醇，吹打(da)混勻(yun)。

4. 轉(zhuan)移(yi)濾(lv)液(ye)混合物(wu)至壹個新(xin)的(de)通用(yong)柱中（通用(yong)柱已(yi)放(fang)入收集管中），13,000 rpm 離(li)心 1 min，倒(dao)棄濾(lv)液(ye)。此(ci)時(shi)，RNA 被吸(xi)附在膜上(shang)。

5. 加(jia)入700μl去蛋白液(ye)RW1，室(shi)溫放(fang)置 1min，13,000 rpm 離(li)心 30 sec，倒(dao)棄濾(lv)液(ye)。  

6. 加(jia)入 500 μl 漂洗(xi)液(ye) RW，13,000 rpm 離(li)心 30 sec，倒(dao)棄濾(lv)液(ye)。

7. 重(zhong)復(fu)步驟 6。

8. 將(jiang)通(tong)用(yong)柱放回空(kong)收集管中，13,000 rpm 離(li)心 2 min，除(chu)去膜(mo)上(shang)殘留的乙(yi)醇。

9. 取(qu)出通(tong)用(yong)柱的內(nei)柱，放入 1.5ml RNase-free 離(li)心管中，向吸(xi)附膜(mo)的(de)中央懸(xuan)空(kong)滴加(jia) 30-50μl RNase-free H2O，室(shi)溫放(fang)置 1 min，13,000 rpm 離(li)心 1 min。

10. 提(ti)取(qu)的總(zong) RNA，可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)於(yu)下遊實(shi)驗，或於(yu)-70℃保存(cun)，以(yi)免(mian)降(jiang)解。

相(xiang)關(guan)產(chan)品(pin)：

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適(shi)用(yong)於(yu)所有 qPCR 儀(yi))

附(fu)錄：

壹(yi)、免(mian)液(ye)氮直(zhi)接(jie)研(yan)磨（自動研(yan)磨儀(yi)）—— 適(shi)用(yong)於(yu)新(xin)鮮(xian)樣本

a. 在 2.0 ml 液(ye)氮研(yan)磨管中放入2粒4 mm 的鋼(gang)珠，加(jia)入600 μl 裂解液(ye) PAL Plus，放(fang)入≤60 mg 樣本，設(she)置65個頻(pin)率，震(zhen)蕩 2 min。

b. 將(jiang)裂解物(wu) 13,000 rpm 離(li)心 5 – 10 min，沈(chen)澱(dian)不能(neng)裂解的(de)碎(sui)片(pian)。

二(er)、液(ye)氮研(yan)磨（自動研(yan)磨儀(yi)）—— 適(shi)用(yong)於(yu)各種樣本，尤其(qi)是富(fu)含(han)糖酚含(han)或

易(yi)降(jiang)解的(de)樣(yang)本

a. 在2.0 ml液(ye)氮研(yan)磨管中放入3 mm鋼(gang)珠3粒(li)，放進≤50 mg 樣(yang)本，投入液(ye)氮中預冷(leng)。把(ba)研(yan)磨模(mo)塊(kuai)也(ye)丟(diu)到(dao)液(ye)氮中預冷(leng)，直(zhi)到(dao)沒(mei)有氣(qi)泡冒(mao)出(chu)視(shi)為預冷(leng)完畢。

b. 把(ba)預冷(leng)好的離(li)心管插(cha)入研(yan)磨模(mo)塊(kuai)中，放進研(yan)磨儀(yi)，設(she)置55個頻(pin)率，震(zhen)蕩 30 - 60 sec。（以(yi)北京(jing)赫得(de)京(jing) N9548 為例(li)）

c. 研(yan)磨完成(cheng)後(hou)，馬(ma)上(shang)加 500μl 裂解液(ye) PRL 和(he) 50μl 糖(tang)分去(qu)除(chu)劑(ji) PAD，劇(ju)烈渦旋 30 sec。

d. 將(jiang)裂解物(wu) 13,000 rpm 離(li)心 5 - 10 min，沈(chen)澱(dian)不能(neng)裂解的(de)碎(sui)片(pian)。

 高(gao)效植(zhi)物(wu)總(zong)RNA提(ti)取(qu)試劑(ji)盒（帶gDNA清除柱）