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聯(lian)系(xi)電話:10-62817090
| 品牌(pai) | NobleRyder/諾博(bo)萊(lai)德 | 貨號 | 91517 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 50次 | 供貨(huo)周期 | 現(xian)貨 |
| 主(zhu)要(yao)用(yong)途 | 用於(yu) PCR、RT-qPCR分析。 | 應(ying)用(yong)領(ling)域 | 環(huan)保,化(hua)工,生(sheng)物產(chan)業(ye),農林(lin)牧漁,制藥/生物制藥 |
諾博(bo)萊(lai)德 檢測用(yong)病(bing)毒(du)核(he)酸DNA/RNA快速提(ti)取試劑盒(he)
DNA/RNA Kit for Virus Detection檢測用(yong)病(bing)毒(du)he酸(DNA/RNA)提(ti)取試劑盒(he)
目錄(lu)號:91517
產(chan)品(pin)內容(rong)
產(chan)品(pin)成份 | 91517-50(50 次(ci)) |
裂(lie)解液 VLB | 20 ml |
Poly Carrier | 200 μl |
去(qu)蛋(dan)白液 RE | 25 ml |
漂(piao)洗液 RW | 10 ml(需(xu)加(jia)入指(zhi)ding量無(wu)水乙(yi)醇) |
蛋(dan)白酶(mei) K 溶(rong)液 | 1 ml |
RNase-Free ddH2O | 10 ml |
RNA 吸(xi)附(fu)柱(zhu)和收集(ji)管 | 50 套(tao) |
RNase-Free 1.5ml 離(li)心(xin)管 | 50 支(zhi) |
自備(bei)試(shi)劑
無(wu)水(shui)乙醇
保(bao)存(cun)條件(jian)
Poly Carrier 置(zhi)於(yu)-20℃保存(cun),其他(ta)組分置(zhi)於(yu)室(shi)溫(wen)(15 ~ 25℃)保(bao)存。
具(ju)體產(chan)品(pin)的參(can)數以(yi)收到產品(pin)說(shuo)明(ming)書的參(can)數為準
產(chan)品(pin)簡介(jie)
本(ben)試(shi)劑盒(he)適(shi)用於(yu)動物組(zu)織(zhi)、血漿、血清、淋(lin)巴液、培(pei)養上(shang)清、分泌物、拭子(zi)、糞(fen)便、牛(niu)奶、尿液等樣品中(zhong)病(bing)毒(du)核(he)酸的提(ti)取,可同(tong)時(shi)提(ti)取樣本中(zhong)的DNA 和 RNA。離(li)心(xin)吸附柱(zhu)中采用(yong)的矽基(ji)質材料(liao)為本公司特you新型材料,配(pei)合(he)本公司(si)獨(du)te的裂(lie)解液配(pei)方(fang)可以(yi)可最大限度的回收高(gao)純度病毒(du)核(he)酸。提(ti)取的病毒(du) RNA/DNA 純度高,質量穩(wen)定可(ke)靠(kao),可(ke)直接適(shi)用於(yu) PCR、RT-qPCR分析。
產(chan)品(pin)特點
1. 節(jie)省時(shi)間(jian),簡(jian)捷(jie),單個樣品操(cao)作(zuo)壹般(ban)可(ke)在(zai) 20 min 內完成;
2. 應(ying)用(yong)廣(guang)泛(fan):可(ke)提(ti)取多(duo)種不(bu)同(tong)的液體樣本。
註意(yi)事(shi)項
1. Poly Carrier:
如(ru)果(guo)起始處理(li)量很少,我們(men)推(tui)薦使用 Poly Carrier,如果(guo)預(yu)期有(you)較(jiao)大量
核(he)酸產量,用(yong)戶可(ke)以(yi)根據需要選(xuan)擇(ze)是(shi)否加入(ru) Poly Carrier。
2. Poly Carrier 的使用(yong)方法(fa):在(zai)每個樣品提(ti)取所需(xu)裂(lie)解液 VLB 中加入(ru) 4 μl Poly Carrier,將裂(lie)解液 VLB 與 Poly Carrier 溶(rong)液充(chong)分顛(dian)倒(dao)混勻即(ji)可(裂(lie)解液 VLB 容(rong)易(yi)起泡(pao)沫(mo),請勿(wu)使(shi)用(yong)渦(wo)旋振(zhen)蕩混勻)。也可根(gen)據樣品數量,在(zai)總(zong)共(gong)需(xu)要(yao)的裂(lie)解液 VLB 中加入(ru)總(zong)共(gong)需(xu)要(yao)的 Poly Carrier 混勻備(bei)用(yong)。混(hun)合(he)液在(zai)室(shi)溫(wen) 24 小時(shi)內穩定。
操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)
提(ti)示:
第(di)壹次(ci)使(shi)用(yong)前(qian),請先(xian)在(zai)漂(piao)洗液 RW 瓶中加(jia)入(ru)無(wu)水(shui)乙醇,請參(can)照瓶上(shang)的標簽(qian)。
操(cao)作(zuo)前(qian),請將樣品平衡至室(shi)溫(wen)。
所(suo)有(you)離(li)心(xin)步(bu)驟(zhou)均(jun)需要在(zai)室(shi)溫(wen)下(xia)進行(xing)。
1. 無(wu)細胞體液(例如:血漿/血清/淋(lin)巴液/無細胞體液/細胞培(pei)養上(shang)清液/
尿液):
a. 200μl 血清等(deng)體液(需回復到室(shi)溫(wen),不(bu)足可(ke)用 0.9% NaCl 或者 PBS補足)轉入 1.5ml 離(li)心(xin)管,加入 400μl 裂(lie)解液 VLB, 立刻渦(wo)旋振(zhen)蕩 15 sec 充(chong)分混勻。
b. 室(shi)溫(wen)(15-25℃)放置(zhi) 10 min。
c. 加(jia)入(ru) 450μl 無水(shui)乙醇,立刻渦(wo)旋振(zhen)蕩 15 sec 充(chong)分混勻。
註意(yi):如果(guo)周圍(wei)環境(jing)高(gao) 30℃,乙(yi)醇需要(yao)再(zai)在(zai)冰(bing)上(shang)預(yu)冷後(hou)再(zai)加(jia)入(ru)。
d. 立(li)刻接操作步(bu)驟(zhou)的步(bu)驟(zhou) 5。
2. 糞(fen)便樣品:
a. 取 500μl 0.5-1 ml 糞便樣本懸(xuan)浮(fu)於(yu) 5 ml 生理(li)鹽(yan)水(shui)中(zhong),徹di渦(wo)旋振(zhen)蕩混勻後(hou),4,000×g (6,000 rpm)離(li)心(xin)20min後(hou)取上(shang)清200μl 轉入 1.5ml離(li)心(xin)管,加入400μl 裂(lie)解液VLB, 立刻渦(wo)旋振(zhen)蕩15sec 充(chong)分混勻。
b. 室(shi)溫(wen)(15-25℃)放置(zhi) 10 min。
c. 加(jia)入(ru) 450μl 無水(shui)乙醇,立刻渦(wo)旋振(zhen)蕩 15 sec 充(chong)分混勻。
d. 立(li)刻接操作步(bu)驟(zhou)的步(bu)驟(zhou) 5。
3. bi拭子(zi)/yan拭子(zi):
a. 理(li)鹽(yan)水(shui)或(huo)病毒(du)運(yun)輸液徹di顛(dian)倒(dao)或渦(wo)旋振(zhen)蕩混勻後(hou)取 200 μl 轉入1.5 ml 離(li)心(xin)管,加入 400 μl 裂(lie)解液 VLB, 立刻渦(wo)旋振(zhen)蕩 15 sec充(chong)分混勻。
b. 室(shi)溫(wen) (15-25℃) 放置(zhi) 10 min。
c. 加(jia)入(ru) 450 μl 無水(shui)乙醇,立刻渦(wo)旋振(zhen)蕩 15 sec 充(chong)分混勻。
d. 立(li)刻接操作步(bu)驟(zhou)的步(bu)驟(zhou) 5。
4. 組(zu)織(zhi)樣本(氣管、肺(fei)、喉(hou)頭(tou)、脾臟(zang)、扁桃體、法(fa)氏囊(nang)、腎(shen)臟(zang)和(he)淋(lin)巴結
等(deng)):
a. 變明(ming)顯(xian)的組織(zhi)塊剪(jian)取樣品約(yue) 20 mg(備(bei)註:A.可(ke)選(xuan)擇多(duo)部(bu)位剪碎混勻後(hou)再(zai)取。B.壹粒(li)大米重約 20 mg。C.請勿(wu)使(shi)用(yong)過(guo)量組(zu)織,影響提(ti)取效(xiao)果),依(yi)次(ci)加(jia)入 150 μl 裂(lie)解液 VLB、450 μl 實驗室(shi)純水(shui)或(huo)者(zhe)去離(li)子(zi)水(shui)(不(bu)用(yong)滅菌)和(he) 20μl 蛋(dan)白酶(mei) K,用眼科(ke)剪(jian)反復多(duo)次剪(jian)
碎混勻或(huo)用電(dian)動勻漿器(qi)勻漿,置(zhi) 56℃水浴中消(xiao)化(hua) 15-30 min(視消化(hua)情況(kuang))後(hou)瞬(shun)時(shi)離(li)心(xin)取上(shang)清。
b. 將上(shang)述(shu)處理(li)後(hou)樣本離(li)心(xin)取上(shang)清 100 μl 轉入 1.5 ml 離(li)心(xin)管,加入300 μl 裂(lie)解液 VLB,立刻渦(wo)旋振(zhen)蕩充(chong)分混勻。
c. 加(jia)入(ru) 250 μl 無水(shui)乙醇,立刻渦(wo)旋振(zhen)蕩 15 sec 充(chong)分混勻。
d. 立(li)刻接操作步(bu)驟(zhou)的步(bu)驟(zhou) 5。
5. 每次(ci)轉移≤750 μl 上(shang)清混(hun)合(he)液(包(bao)括(kuo)沈(chen)澱)至(zhi) RNA 吸附柱(zhu)中,12,000 rpm 離(li)心(xin) 1 min,倒(dao)棄濾(lv)液。吸重復此(ci)過(guo)程(cheng),直到溶(rong)液全部(bu)上(shang)柱(zhu)。
6. 向(xiang)吸附(fu)柱(zhu)內加入 500 μl 去蛋(dan)白液 RE,12,000 rpm 離(li)心(xin) 30 sec,棄濾液。
7. 向(xiang)吸附(fu)柱(zhu)內加入 500 μl 漂(piao)洗液 RW,12,000 rpm 離(li)心(xin) 30 sec,棄濾液。
(註意(yi):漂(piao)洗液 RW 中按(an)要(yao)求(qiu)加(jia)入無水乙醇,用後(hou)立(li)即蓋(gai)緊(jin)瓶蓋(gai),以(yi)防乙(yi)醇揮發(fa))
8. 可(ke)選(xuan)步(bu)驟(zhou):重復步(bu)驟(zhou) 6 壹次(ci)。
9. 將 RNA 吸(xi)附(fu)柱(zhu)放回空(kong)收(shou)集管中,12,000 rpm 離(li)心(xin) 2min,甩幹(gan)膜(mo)上(shang)殘(can)留(liu)
的乙醇。
10. 將離(li)心(xin)吸附柱(zhu)置(zhi)於(yu)壹個新的 1.5 ml 塑料(liao)離(li)心(xin)管中,加入 30 ~ 50 ul 的RNase-Free ddH2O 洗脫(tuo),室(shi)溫(wen)放置(zhi) 1 min。12,000 rpm 離(li)心(xin) 1 min,管底(di)即(ji) RNA 溶(rong)液。
(註意(yi):如要(yao)提(ti)高 RNA 濃度,可將得(de)到的溶(rong)液重新加(jia)到吸附(fu)柱(zhu)中,室(shi)溫(wen)放置(zhi) 1 min,
再(zai)次(ci)離(li)心(xin)收集)
11. 病(bing)毒(du) DNA 可(ke)以(yi)存放在(zai) 2-8℃,如(ru)果(guo)要(yao)長時(shi)間(jian)存(cun)放,可(ke)以(yi)放置(zhi)在(zai)-20℃。病(bing)毒(du) RNA 建(jian)議(yi)最好立(li)刻使用,否則(ze)立刻短期放置(zhi)在(zai)-70℃備(bei)用(yong)。
相(xiang)關(guan)產(chan)品(pin):
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(for PCR or qPCR)
71514-100 Script III RT Kit With gDNA Eraser(for qPCR)
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase(for qPCR)
71519-500 2x SYBR Green qPCR Mix (With 100x ROX)
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適(shi)用於(yu)所有(you) qPCR 儀)
檢測用(yong)病(bing)毒(du)核(he)酸DNA/RNA快速提(ti)取試劑盒(he)