FlashPure Plant miRNA Mini Kit 是專(zhuan)用(yong)於(yu)提取(qu)各種植(zhi)物(wu)組織(zhi)的(de)miRNA（包含 miRNA 的總 RNA），是通(tong)用(yong)型(xing) microRNA 快速(su)提取(qu)試劑(ji)盒（Cat#91015）的(de)升(sheng)級(ji)版(ban)，提取(qu)過(guo)程(cheng)不再(zai)需要使(shi)用(yong)氯仿(fang)，並(bing)采(cai)用(yong)獨(du)you的(de)gDNA過(guo)濾器(qi)
植(zhi)物(wu)microRNA快速(su)提取(qu)試劑(ji)盒

諾博(bo)萊(lai)德 植(zhi)物(wu)microRNA快速(su)提取(qu)試劑(ji)盒

FlashPure Plant miRNA Mini Kit植(zhi)物(wu) microRNA 快速(su)提取(qu)試劑(ji)盒(免(mian)氯仿(fang))

目錄(lu)號(hao)：91410

產(chan)品(pin)內(nei)容

自備(bei)試劑(ji)

無水(shui)乙醇(chun)

保存(cun)條(tiao)件(jian)

室溫(wen)（15 ~ 25℃）

具體(ti)產(chan)品(pin)的(de)參數(shu)以收(shou)到產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)的(de)參數(shu)為(wei)準(zhun)

產(chan)品(pin)簡(jian)介

市場上常見的離(li)心(xin)柱(zhu)型(xing)的 RNA Kit/總(zong) RNA Kit，不能(neng)有(you)效(xiao)吸附回收(shou)miRNA；Trizol 沈(chen)澱抽提法(fa)也不能(neng)有(you)效(xiao)沈澱回收(shou)全(quan)部(bu) miRNA（生(sheng)物(wu)通上(shang)有(you)專題(ti)文(wen)章(zhang)闡述）。

FlashPure Plant miRNA Mini Kit 是專(zhuan)用(yong)於(yu)提取(qu)各種植(zhi)物(wu)組織(zhi)的(de)miRNA（包含 miRNA 的總 RNA），是通(tong)用(yong)型(xing) microRNA 快速(su)提取(qu)試劑(ji)盒（Cat#91015）的(de)升(sheng)級(ji)版(ban)，提取(qu)過(guo)程(cheng)不再(zai)需要使(shi)用(yong)氯仿(fang)，並(bing)采(cai)用(yong)獨(du)you的(de)gDNA過(guo)濾器(qi)，高(gao)效(xiao)濾除(chu)基(ji)因(yin)組，得到包含 miRNA 的總 RNA，可(ke)直接(jie)用(yong)於(yu)miRNA 和 mRNA 的(de) RT、RT-PCR、RT-qPCR、RACE、芯(xin)片(pian)、測序(xu)等。

不但(dan)適用(yong)於(yu)普(pu)通(tong)植(zhi)物(wu)，也適用(yong)於(yu)多(duo)糖多(duo)酚(fen)植(zhi)物(wu)的根(gen)莖(jing)葉(ye)花(hua)，但(dan)是遇(yu)到糖(tang)酚(fen)含量(liang)巨豐(feng)富、次(ci)級(ji)代謝(xie)產(chan)物(wu)巨多(duo)的果實(shi)、種子、中草藥等樣(yang)本(ben)，應(ying)選(xuan)用(yong)果實(shi)種子 microRNA 提取(qu)試劑(ji)盒（Cat#91400），效(xiao)果更(geng)佳。

註意事(shi)項(xiang)

1. 樣(yang)品(pin)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融，否則(ze)會影(ying)響(xiang) RNA 的提取(qu)得率(lv)和質(zhi)量(liang)。

2. 樣(yang)品(pin)加(jia)入裂(lie)解(jie)液(ye) MPA Plus 勻漿後，樣(yang)品(pin)可(ke)在–80℃保存(cun)壹(yi)個(ge)月(yue)以上。

3. 取(qu)RNA樣(yang)本(ben)時，把(ba)新鮮組織(zhi)樣(yang)本(ben)浸入 RNAsafe (RNA 樣(yang)品(pin)保(bao)存液，91115-

100)中，可(ke)在(zai) 37℃保(bao)存壹天，在 25℃保存(cun)壹周，在 4℃保存壹(yi)個(ge)月(yue)，在(zai)-20℃或(huo)者–80℃長(chang)期保(bao)存(cun)。

操作步驟（可得到包含 miRNA 的總 RNA）

提示(shi)：

① 第壹(yi)次(ci)使(shi)用(yong)前(qian), 先(xian)在(zai) Wash Solution 1、Wash Solution 2/3 中加入

指(zhi)ding量(liang)無(wu)水乙醇(chun)，詳(xiang)見瓶上(shang)的(de)標(biao)簽(qian)。

② 對於(yu) RNA 酶或(huo)者多(duo)酚(fen)特(te)別(bie)豐(feng)富植(zhi)物(wu)組織(zhi)：操作前(qian)在裂(lie)解(jie)液(ye) MPA Plus 中加入 β-巰(qiu)基(ji)乙醇(chun)至(zhi)終濃度(du) 1%，例(li)如(ru) 1 ml MPA Plus 中(zhong)加(jia)入 10μl β-巰(qiu)基(ji)乙醇(chun)，此裂(lie)解(jie)液(ye)最(zui)好現(xian)用(yong)現(xian)配(pei)，配(pei)好 MPA Plus 4℃可(ke)放(fang)置(zhi)壹(yi)個(ge)月(yue)。

③ 所(suo)有(you)離(li)心(xin)步驟均(jun)需要在室溫（15~37℃）下(xia)進行，提取(qu)效(xiao)果更(geng)佳！

1. 在液(ye)氮中(zhong)研磨(mo)植(zhi)物(wu)組織(zhi)成細粉，取(qu)≤60 mg細粉(fen)加(jia)入600 μl 裂(lie)解(jie)液(ye)MPA Plus，立(li)即劇烈(lie)渦旋震(zhen)蕩(dang) 30 sec，充分混勻。

2. 將(jiang)裂(lie)解(jie)物(wu) 13,000 rpm 離(li)心(xin) 5 ~10 min，沈澱不能(neng)裂(lie)解(jie)的(de)碎片。

3. 小(xiao)心(xin)吸(xi)取(qu)上清(qing)（壹般(ban) 500 μl），轉(zhuan)入壹(yi)個(ge) gDNA 過(guo)濾器(qi)中（過(guo)濾器(qi)放入收(shou)集(ji)管中），13,000 rpm 離(li)心(xin) 1 min，保留濾(lv)液(ye)（RNA 在濾液(ye)中(zhong)）。

4. 向濾(lv)液(ye)中(zhong)加入 1.25 倍(bei)體(ti)積(ji)(壹(yi)般(ban) 625μl )的無水(shui)乙醇(chun)，用(yong)移(yi)液(ye)器(qi)吹打混勻。

5. 每次(ci)轉(zhuan)移(yi)≤750 μl濾液(ye)混合物(wu)至RNA吸(xi)附(fu)柱(zhu)中，13,000 rpm離(li)心(xin)1min，此時，RNA 被(bei)吸附(fu)在膜(mo)上，棄(qi)濾液。重復(fu)此過(guo)程(cheng)，直到溶液全(quan)部(bu)上(shang)柱(zhu)。

6. 加入 700 μl Wash Solution 1（檢(jian)查是否已(yi)加(jia)入乙醇(chun)），室(shi)溫放置 1 min, 13,000 rpm 離(li)心(xin) 30 sec，棄濾液(ye)。

7. 加入 500 μl Wash Solution 2/3（檢(jian)查是否已(yi)加(jia)入乙醇(chun)），13,000 rpm 離(li)心(xin) 30 sec，棄濾液(ye)。

8. 重復(fu)步驟 7。

9. 將(jiang) RNA 吸附(fu)柱(zhu)放回(hui)空(kong)收(shou)集(ji)管中，13,000 rpm 離(li)心(xin) 2 min，除(chu)去(qu)膜(mo)上殘(can)留的留(liu)乙醇(chun)。

10. 取(qu)出 RNA 吸附(fu)柱(zhu)，放入壹(yi)個(ge)新(xin)的(de) RNase-free 1.5 ml 離(li)心(xin)管中，向(xiang) RNA吸(xi)附膜(mo)的中(zhong)央(yang)懸(xuan)空(kong)滴加(jia) 30-50 μl RNase-free H2O，室溫放(fang)置 1 min，13,000 rpm 離(li)心(xin) 1 min，管底即包含 miRNA 的總 RNA。

11. 得到 RNA/miRNA，可(ke)直(zhi)接用(yong)於(yu)下(xia)遊實驗，或(huo)於(yu)-70℃保(bao)存(cun)，以免(mian)降(jiang)解(jie)。

相關(guan)產(chan)品(pin)：

71418-25 Script III miRNA 1st Stand Synthesis Kit（加尾(wei)法(fa)）

71419-500 Script III miRNA Real-Time PCR Assay kit（for qPCR，加尾(wei)法(fa)）

71613-500 Script III miRNA RT-qPCR Detection kit（71418-25 + 71419-500）

植(zhi)物(wu)microRNA快速(su)提取(qu)試劑(ji)盒