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| 品(pin)牌(pai) | NobleRyder/諾(nuo)博萊德 | 貨(huo)號 | 40200 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格 | 50次/100次/200次(ci) | 供(gong)貨(huo)周(zhou)期 | 現(xian)貨(huo) |
| 主要用(yong)途 | 用(yong)於從多種(zhong)植(zhi)物的(de)不同部位的(de)組(zu)織中快速提(ti)取高(gao)質(zhi)量(liang)的基(ji)因組(zu)DNA | 應(ying)用(yong)領域(yu) | 環(huan)保,化工(gong),生(sheng)物產業,農林(lin)牧漁,制(zhi)藥(yao)/生(sheng)物制(zhi)藥(yao) |
諾(nuo)博萊德 高效(xiao)植(zhi)物基(ji)因(yin)組DNA提(ti)qu試(shi)劑(ji)盒 核酸提(ti)取
FlashPure Plant Genomic DNA Kit高效(xiao)植(zhi)物基(ji)因(yin)組DNA提(ti)qu試(shi)劑(ji)盒(離心(xin)柱型)
目(mu)錄號:40200
產品(pin)成份 | 40200-50(50 次) | 40200-200(200 次) |
Buffer LP1 | 20 ml | 80 ml |
Buffer LP2 | 7 ml | 26 ml |
Buffer LP3 | 15 ml | 50 ml |
Buffer WB2 | 13 ml | 50 ml |
Buffer EB | 10 ml | 20 ml |
RNase A (10mg/ml) | 250 ul | 1000 ul |
DNA 吸(xi)附(fu)柱和(he)收(shou)集管 | 50 套 | 200 套 |
自(zi)備試(shi)劑(ji):
無(wu)水(shui)乙醇
具體產品(pin)的參數以收(shou)到產品(pin)說明(ming)書的參(can)數為準(zhun)
適用(yong)於從多種(zhong)植(zhi)物的(de)不同部位的(de)組(zu)織中快速提(ti)取高(gao)質(zhi)量(liang)的基(ji)因組(zu)DNA,du特配(pei)方(fang)的(de)緩(huan)沖液(ye)體系能(neng)有(you)效去除植(zhi)物組(zu)織(zhi)中的多(duo)糖(tang)、多酚(fen)復合物和(he)酶(mei)抑制(zhi)劑(ji),基(ji)因(yin)組DNA選擇(ze)性(xing)吸(xi)附(fu)於矽(gui)基(ji)質(zhi)膜(mo)上(shang),再通過快(kuai)速的漂洗、離(li)心(xin)等(deng)步(bu)驟,去除其(qi)他(ta)雜(za)質(zhi)。提(ti)取過程(cheng)不需要氯(lv)仿等(deng)有機試劑(ji)抽(chou)提(ti),安(an)全(quan)快捷(jie)。使(shi)用(yong)本(ben)Kit提(ti)取的(de)植(zhi)物基(ji)因(yin)組DNA,可直(zhi)接(jie)進(jin)行(xing)PCR、酶(mei)切和(he)雜(za)交(jiao)等(deng)分(fen)子(zi)生(sheng)物學(xue)實驗(yan)。
1.簡(jian)便快(kuai)速:30min內可獲(huo)得(de)高純(chun)度(du)的(de)基因(yin)組(zu)DNA。
2. 純(chun)度(du)高(gao):OD260/280=1.7~1.9,可直(zhi)接(jie)進(jin)行(xing)PCR、酶(mei)切和(he)雜(za)交(jiao)等(deng)實驗(yan)。
3. 安全(quan)無(wu)毒(du):安(an)全(quan)、無(wu)毒(du),無(wu)需ben酚(fen)/氯(lv)仿抽(chou)提(ti)。
1. 若(ruo)BufferLP1或(huo)BufferLP3有沈(chen)澱(dian)析(xi)出(chu),可(ke)在37℃水(shui)浴(yu)溶(rong)解,搖勻後使(shi)用(yong)。
2. 所有(you)離(li)心步(bu)驟均(jun)需要使用(yong)臺(tai)式離心機,室(shi)溫(wen)下(xia)離(li)心(xin)。
3. 按要求在BufferLP3和(he)BufferWB2中加入無(wu)水(shui)乙醇。
第壹次使(shi)用(yong)前,請先在BufferLP3和(he)BufferWB2中加入指(zhi)ding量(liang)無(wu)水(shui)乙醇,加(jia)入體積詳(xiang)見(jian)瓶(ping)身的(de)標簽(qian)。
1.取植(zhi)物新鮮組(zu)織(zhi)100mg或(huo)幹(gan)重組(zu)織(zhi)20mg,加(jia)入液(ye)氮充(chong)分(fen)碾(nian)磨(mo),倒(dao)入1.5ml離心(xin)管(guan)中。
2. 加入400μlBufferLP1和(he)4μlRNaseA(10mg/ml),旋渦振蕩(dang)1min,室(shi)溫(wen)放(fang)置10min。
3. 加入130μlBufferLP2,充(chong)分(fen)混勻,旋渦振蕩(dang)1min。
4.12,000rpm離心(xin)5min,將上(shang)清移至(zhi)新的離(li)心(xin)管中。
(註意(yi):只(zhi)取上(shang)清液(ye),不要吸(xi)取沈(chen)澱(dian)組(zu)織(zhi),大(da)約400μl左右(you))
5. 加入1.5倍(bei)體積的(de)BufferLP3(例(li):400μl上(shang)清加600μlBufferLP3),立即(ji)充(chong)分(fen)振蕩(dang)混勻15sec,此時可能會(hui)出(chu)現(xian)絮(xu)狀沈澱(dian)。
6.將上(shang)壹步(bu)所得(de)溶(rong)液(ye)和(he)絮(xu)狀沈澱(dian)(每(mei)次(ci)≤700μl)轉入到吸(xi)附(fu)柱中,12,000rpm離心(xin)30sec,棄(qi)收(shou)集管中濾液(ye),此時DNA被吸(xi)附(fu)在膜(mo)上(shang)。重復(fu)此過程(cheng),直(zhi)到所有溶(rong)液(ye)全(quan)部上(shang)柱。
7. 向吸(xi)附(fu)柱內加入500μl的BufferWB2,室(shi)溫(wen)12,000rpm離(li)心30sec,棄(qi)收(shou)集管中廢液(ye)。
(註意(yi):如(ru)果(guo)吸(xi)附(fu)柱膜(mo)呈現(xian)綠(lv)色(se),可向(xiang)吸(xi)附(fu)柱中加入500μl無(wu)水(shui)乙醇,12,000rpm離心(xin)30sec,倒掉(diao)廢液(ye),將吸(xi)附(fu)柱放(fang)入收(shou)集管中)
8. 重復(fu)步(bu)驟7壹次。
9.室(shi)溫(wen)12,000rpm離心(xin)2min,甩幹(gan)吸(xi)附(fu)膜(mo)上(shang)的殘(can)留液(ye)體。
(註意(yi):此步(bu)不能省(sheng)略,否(fou)則殘(can)留乙醇會(hui)影響基(ji)因(yin)組(zu)DNA的後續使(shi)用(yong))
10. 取出(chu)吸(xi)附(fu)柱,放(fang)入壹個新的 1.5ml 離(li)心(xin)管(自(zi)備)中,在吸(xi)附(fu)膜(mo)的中央(yang)加入50~100μl BufferEB,室(shi)溫(wen)放(fang)置2min,12,000rpm離(li)心(xin)1min,管(guan)底溶(rong)液(ye)即基(ji)因(yin)組(zu) DNA。
(註意(yi):為增(zeng)加(jia)洗(xi)脫(tuo)效(xiao)率,可將洗(xi)脫液(ye) BufferEB在60℃預熱。如(ru)果(guo)需要使用(yong)去離子(zi)水(shui)洗脫,可用(yong)NaOH調整(zheng)其(qi)pH值在7.0~8.5之間,為了(le)增(zeng)加(jia)DNA回(hui)收(shou)率,可(ke)將得(de)到的溶(rong)液(ye)重新加入到吸(xi)附(fu)柱中,室(shi)溫(wen)放(fang)置2min,再次離(li)心收(shou)集)
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