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| 品(pin)牌 | NobleRyder/諾(nuo)博(bo)萊德(de) | 貨號(hao) | 43011 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格(ge) | 50次(ci)/100次(ci)/200次(ci) | 供(gong)貨周期 | 現貨 |
| 主(zhu)要用途 | 適用於(yu)從TAE或TBE瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠(jiao)中回(hui)收DNA片段(duan) | 應用領(ling)域(yu) | 環保,化工(gong),生物(wu)產(chan)業,農(nong)林(lin)牧(mu)漁(yu),制(zhi)藥/生(sheng)物制(zhi)藥 |
諾(nuo)博(bo)萊德(de) 瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠(jiao)DNA回(hui)收試劑(ji)盒(he) 核酸(suan)提(ti)取(qu)
Gel DNA Purification Kit瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠(jiao)純(chun)化回(hui)收試劑(ji)盒(he)
目(mu)錄號(hao):43011
產(chan)品(pin)內容(rong):
產(chan)品(pin)組(zu)成 | 43011-50 | 43011-100 | 43011-200 |
Buffer BL | 5 ml | 10 ml | 20 ml |
Buffer DB | 40 ml | 75 ml | 150 ml |
Buffer WB | 13 ml | 25 ml | 50 ml |
Buffer EB | 10 ml | 15 ml | 20 ml |
Spin Column With Collection Tubes | 50 套(tao) | 100 套(tao) | 200 套(tao) |
自(zi)備試劑(ji):
無(wu)水乙(yi)醇(chun)
保(bao)存條(tiao)件:
室溫(15 ~ 25℃)
具體(ti)產(chan)品(pin)的參(can)數(shu)以(yi)收(shou)到(dao)產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)的參(can)數(shu)為(wei)準(zhun)
產(chan)品(pin)簡(jian)介:
本試(shi)劑(ji)盒(he)適用於(yu)從TAE或TBE瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠(jiao)中回(hui)收DNA片段(duan),使用本產(chan)品(pin)可回(hui)收 100bp-10kb大小(xiao)的DNA片段,回(hui)收率可達(da)85%-95%。該試(shi)劑(ji)盒(he)操(cao)作(zuo)簡(jian)便(bian),得(de)到的 DNA 片段可用於(yu)酶切(qie)、連接、測(ce)序(xu)等實驗(yan)。
產(chan)品(pin)特(te)點:
1. 快(kuai)速:步(bu)驟少(shao),操(cao)作(zuo)簡(jian)便(bian),整(zheng)個(ge)操(cao)作(zuo)僅(jin)需(xu) 15 分(fen)鐘(zhong)。
2. 高(gao)效:每個(ge)離(li)心(xin)吸(xi)附柱可吸附 10 ug 以(yi)上的 DNA 片(pian)段,回(hui)收效率(lv)在 85%以(yi)上。
註意事項(xiang):
1. Buffer BL 的加入能(neng)夠(gou)改(gai)善吸(xi)附柱的吸附能(neng)力並(bing)提(ti)高(gao)吸(xi)附柱的均(jun)壹性(xing)和穩(wen)定性,消(xiao)除高(gao)溫潮濕(shi)或其(qi)他不(bu)良(liang)環境(jing)因素對(dui)吸(xi)附柱造(zao)成的影響(xiang)。收(shou)到(dao)貨後(hou) 2 個(ge)月(yue)內,不(bu)用做(zuo)柱平(ping)衡。
2. 使用前請(qing)先(xian)檢查(zha)Buffer BL、Buffer DB 是否(fou)出現(xian)渾濁,如有混(hun)濁現象(xiang),可在 37℃水浴中加熱幾(ji)分(fen)鐘(zhong),即可恢復澄(cheng)清(qing)。
3. 切(qie)膠(jiao)時(shi),紫外(wai)照(zhao)射(she)時(shi)間應(ying)盡量(liang)短(duan),以免(mian)對(dui) DNA 造(zao)成損(sun)傷(shang)。
4. 回(hui)收率與(yu)初始 DNA 量(liang)和洗脫體(ti)積有關,初始量越少(shao)、洗脫體(ti)積越小(xiao),回(hui)收率越低(di)。
操(cao)作(zuo)步(bu)驟
第壹(yi)次(ci)使用前,請(qing)先(xian)在 Buffer WB 中加入無(wu)水乙(yi)醇(chun),並(bing)打(da)對勾(gou)標(biao)記,加入體(ti)積請(qing)參(can)照(zhao)瓶(ping)上的標(biao)簽。
從瓊脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠(jiao)中回(hui)收 DNA 片(pian)段
1. 柱(zhu)平衡:向(xiang)吸附柱中(吸附柱放入收(shou)集管(guan)中)加(jia)入 100 ul Buffer BL,12,000 rpm 離(li)心 1 min,棄(qi)濾(lv)液(ye),將(jiang)吸(xi)附柱重新(xin)放回(hui)收集管(guan)中。(請(qing)使用當(dang)天處(chu)理(li)過(guo)的柱子)
2. 切(qie)膠(jiao):在長波紫外(wai)燈下,用幹凈刀片將(jiang)目(mu)的 DNA 條(tiao)帶切(qie)下,盡量(liang)切(qie)除不(bu)含(han) DNA 的凝(ning)膠(jiao)。
3. 稱(cheng)重:將(jiang)切(qie)下的含有目的 DNA 條(tiao)帶的凝(ning)膠(jiao),放入 1.5 ml 離(li)心管中,稱(cheng)取凝(ning)膠(jiao)重量(liang)(去(qu)除空(kong)管(guan)重量(liang))。如果凝(ning)膠(jiao)重量(liang)為(wei) 100mg,其(qi)體(ti)積可視為(wei) 100ul。
4. 溶膠(jiao):加(jia)入 3 倍(bei)體(ti)積 Buffer DB,56℃水浴,直(zhi)到(dao)凝(ning)膠(jiao)完(wan)quan溶解,期(qi)間(jian)顛(dian)倒混(hun)勻(yun) 2 次(ci)加(jia)速(su)溶膠(jiao)。
(如果凝(ning)膠(jiao)濃(nong)度(du)大於(yu) 2%,應(ying)加入 6 倍(bei)體(ti)積 Buffer DB。對(dui)於(yu)回(hui)收<100 bp 的小(xiao)片段(duan),可在凝(ning)膠(jiao)完(wan)quan溶解後(hou),再(zai)加(jia)入 1.5 倍(bei)膠(jiao)塊(kuai)體(ti)積的異丙(bing)醇(chun)以提(ti)高(gao)回(hui)收率。)
5. 吸(xi)附:待溶液(ye)冷(leng)卻(que)至(zhi)室溫後(hou)加(jia)入吸(xi)附柱中,室溫靜(jing)置 1 min,然(ran)後(hou) 12,000 rpm 離(li)心 1 min,棄(qi)濾(lv)液(ye)。
(如果總體(ti)積超(chao)過(guo) 750 ul,可分(fen) 2 次(ci)將(jiang)溶液(ye)加(jia)入同(tong)壹離(li)心吸(xi)附柱中)
6. 漂(piao)洗:加入 600 ul 漂(piao)洗液(ye)Buffer WB,12,000 rpm 離(li)心 1 min,棄(qi)濾(lv)液(ye)。
7. 二次(ci)漂(piao)洗(xi):重復(fu)操(cao)作(zuo)步(bu)驟 6。
8. 幹燥:將(jiang)吸(xi)附柱放回(hui)收集管(guan)中, 12,000 rpm 離(li)心 2 min,甩(shuai)幹膜(mo)上(shang)殘留(liu)的乙醇,防止其(qi)抑制(zhi)下遊反應(ying)。
9. 回(hui)收:將(jiang)離(li)心吸附柱置(zhi)於(yu)壹個(ge)新(xin)的 1.5 ml 離(li)心管中,在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗(xi)脫液(ye) Buffer EB,室溫放置(zhi) 2 min,12,000 rpm 離(li)心 1 min 收(shou)集 DNA 片(pian)段。
(註意:為(wei)增(zeng)加回(hui)收效率(lv),可將(jiang)洗(xi)脫液(ye)在65℃預(yu)熱,也可將(jiang)得(de)到的溶液(ye)重新(xin)加(jia)入到(dao)離心(xin)管中,室溫放置(zhi) 2 min,再(zai)次(ci)離(li)心(xin)收(shou)集。)
瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠(jiao)DNA回(hui)收試劑(ji)盒(he) 核酸(suan)提(ti)取(qu)