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| 品(pin)牌(pai) | NobleRyder/諾博(bo)萊(lai)德 | 貨號 | 43016 |
|---|---|---|---|
| 規格(ge) | 100次(ci) | 供(gong)貨(huo)周(zhou)期 | 現貨(huo) |
| 主(zhu)要(yao)用途 | 用於微量DNA的瓊脂糖凝膠 DNA 回收、PCR反(fan)應產(chan)物純(chun)化(hua)回收等(deng) | 應用領域 | 環保(bao),化工,生(sheng)物產(chan)業(ye),農(nong)林牧漁(yu),制(zhi)藥/生(sheng)物制(zhi)藥 |
諾(nuo)博(bo)萊(lai)德 微量DNA濃(nong)縮(suo)回收試(shi)劑盒 核酸提(ti)取
DNA Purification micro Kit微量 DNA 濃(nong)縮(suo)回收試(shi)劑盒
目(mu)錄號:43016
產(chan)品(pin)內(nei)容(rong):
產(chan)品(pin)組成(cheng) | 43016-100 |
Buffer BL | 5 ml |
Buffer DB | 40 ml |
Buffer WB | 13 ml |
Buffer EB | 10 ml |
microSpin Column With Collection Tubes | 100 套 |
自備(bei)試(shi)劑:
無(wu)水(shui)乙(yi)醇
保(bao)存條(tiao)件:
室(shi)溫(wen)(15 ~ 25℃)
產(chan)品(pin)簡介:
本試(shi)劑盒為(wei)超微量DNA濃(nong)縮(suo)回收的(de)專用試(shi)劑盒。適用於微量DNA的(de)瓊(qiong)脂糖凝膠 DNA 回收、PCR反(fan)應(ying)產(chan)物(wu)純(chun)化(hua)回收、酶切(qie)產(chan)物(wu)DNA片斷純(chun)化(hua)回收、探針標記(ji)後(hou)純(chun)化(hua)回收、DNA樣品(pin)濃(nong)縮(suo)等。使(shi)用本產品(pin)可回收100bp-5kb大(da)小的(de)DNA片段,回收率可達 85%-95%。該(gai)試(shi)劑盒操(cao)作簡便(bian),得到的(de)DNA 片段可用於酶切(qie)、連(lian)接、測(ce)序等實(shi)驗。
具(ju)體(ti)產(chan)品(pin)的參數以收到產(chan)品(pin)說明書(shu)的參數為(wei)準
產(chan)品(pin)特點(dian):
1. 特殊(shu)微量5μg離心(xin)柱(zhu)設計(ji)可以(yi)最(zui)di5μl洗(xi)脫,保(bao)證了(le)回收 DNA 的(de)高(gao)濃(nong)度。
2. 特殊(shu)無(wu)墊(dian)圈離心(xin)柱(zhu)的設(she)計(ji),最大(da)限度減少(shao)了無液(ye)體(ti)殘(can)留(liu)和(he)汙(wu)染,保(bao)證了(le)回收 DNA 的(de)高(gao)純(chun)度。
3. 快速:步(bu)驟(zhou)少(shao),操(cao)作簡便(bian),整個(ge)操(cao)作僅需(xu) 15 分(fen)鐘。
註(zhu)意(yi)事(shi)項:
1. Buffer BL 的(de)加(jia)入能(neng)夠(gou)改(gai)善(shan)吸附柱(zhu)的吸附能(neng)力並提(ti)高吸附柱(zhu)的均(jun)壹性(xing)和穩定性(xing),消除(chu)高(gao)溫(wen)潮(chao)濕(shi)或(huo)其他不良環境(jing)因(yin)素(su)對(dui)吸附柱(zhu)造(zao)成(cheng)的(de)影(ying)響。收(shou)到貨(huo)後(hou) 2 個月(yue)內(nei),不(bu)用做柱(zhu)平(ping)衡(heng)。
2. 使(shi)用前請(qing)先(xian)檢(jian)查Buffer BL、Buffer DB 是否(fou)出(chu)現(xian)渾(hun)濁(zhuo),如(ru)有混(hun)濁(zhuo)現(xian)象(xiang),可在 37℃水浴中(zhong)加熱(re)幾分(fen)鐘,即可恢(hui)復(fu)澄清。
3. 切(qie)膠時,紫(zi)外照射(she)時(shi)間應盡量短,以免(mian)對 DNA 造(zao)成(cheng)損(sun)傷(shang)。
4. 回收率與初(chu)始 DNA 量(liang)和(he)洗(xi)脫體(ti)積(ji)有關,初(chu)始量(liang)越(yue)少(shao)、洗(xi)脫體(ti)積(ji)越(yue)小,回收率越(yue)低。
操(cao)作步(bu)驟(zhou):
第壹次(ci)使(shi)用前,請(qing)先(xian)在 Buffer WB 中(zhong)加入無(wu)水乙(yi)醇,並打對(dui)勾標記,加入體(ti)積(ji)請(qing)參照瓶(ping)上(shang)的(de)標(biao)簽。
壹、從瓊脂糖凝膠中(zhong)回收DNA 片段
1. 柱(zhu)平(ping)衡(heng):向(xiang)吸附柱(zhu)中(zhong)(吸附柱(zhu)放(fang)入收(shou)集管(guan)中(zhong))加(jia)入 50 ul Buffer BL,12,000 rpm 離心(xin) 1 min,棄(qi)濾(lv)液,將(jiang)吸附柱(zhu)重新放(fang)回收集管(guan)中(zhong)。(請(qing)使(shi)用當天(tian)處理(li)過(guo)的柱(zhu)子)
2. 切(qie)膠:在長波紫(zi)外燈(deng)下(xia),用幹(gan)凈(jing)刀片將(jiang)目(mu)的(de) DNA 條(tiao)帶(dai)切(qie)下(xia),盡量切(qie)除(chu)不(bu)含(han) DNA 的(de)凝膠。
3. 稱(cheng)重:將(jiang)切下(xia)的(de)含(han)有目(mu)的(de) DNA 條(tiao)帶(dai)的(de)凝膠,放(fang)入 1.5 ml 離心(xin)管(guan)中(zhong),稱(cheng)取凝膠重量(去除(chu)空(kong)管(guan)重量)。如(ru)果(guo)凝膠重量為(wei) 100mg,其體(ti)積(ji)可(ke)視(shi)為(wei) 100ul。
4. 溶(rong)膠:加入 3 倍(bei)體(ti)積(ji) Buffer DB,56℃水(shui)浴,直(zhi)到凝膠完quan溶解(jie),期間顛倒混(hun)勻 2 次(ci)加速(su)溶(rong)膠。
(如(ru)果(guo)凝膠濃(nong)度大(da)於 2%,應(ying)加(jia)入 6 倍(bei)體(ti)積(ji) Buffer DB。對(dui)於(yu)回收<100 bp 的(de)小片段,可在凝膠完quan溶(rong)解(jie)後(hou),再加(jia)入 1.5 倍(bei)膠塊體(ti)積(ji)的(de)異丙醇(chun)以(yi)提(ti)高回收率。)
5. 吸附:待(dai)溶液(ye)冷卻(que)至(zhi)室溫(wen)後(hou)加(jia)入吸附柱(zhu)中(zhong),室溫(wen)靜置 1 min,然後(hou) 12,000 rpm 離心(xin) 30 sec,棄(qi)濾(lv)液。
(如(ru)果(guo)總(zong)體(ti)積(ji)超過(guo) 750 ul,可(ke)分(fen) 2 次(ci)將(jiang)溶液(ye)加(jia)入同(tong)壹離心(xin)吸附柱(zhu)中(zhong))
6. 漂(piao)洗(xi):加入 300 ul 漂(piao)洗(xi)液Buffer WB,12,000 rpm 離心(xin) 30 sec,棄(qi)濾(lv)液。
7. 二次(ci)漂(piao)洗(xi):重復(fu)操(cao)作步(bu)驟(zhou) 6。
8. 幹(gan)燥(zao):將(jiang)吸附柱(zhu)放(fang)回收集管(guan)中(zhong), 12,000 rpm 離心(xin) 2 min,甩(shuai)幹(gan)膜(mo)上(shang)殘(can)留(liu)的乙(yi)醇,防止其抑制(zhi)下(xia)遊反應。
9. 回收:將(jiang)離心(xin)吸附柱(zhu)置於壹個(ge)新的(de) 1.5 ml 離心(xin)管(guan)中(zhong),在微量吸附柱(zhu)的膜(mo)中(zhong)央加入 10 ul (5 ~ 25 ul)洗(xi)脫液(ye)Buffer EB,室(shi)溫(wen)放(fang)置 1 min,12,000 rpm 離心(xin) 1 min。
(註(zhu)意(yi):為(wei)增加回收效(xiao)率,可將(jiang)洗(xi)脫液(ye)在 65℃預(yu)熱(re),也可(ke)將(jiang)得到的(de)溶(rong)液重新加入到離心(xin)管(guan)中(zhong),室(shi)溫(wen)放(fang)置 1 min,再次(ci)離心(xin)收集。)
微量DNA濃(nong)縮(suo)回收試(shi)劑盒 核酸提(ti)取