諾博萊(lai)德 寡(gua)核(he)苷(gan)酸純化試劑(ji)盒(he) 核(he)酸提取(qu)

Oligo Purification Kit寡(gua)核(he)苷(gan)酸純化回收試劑(ji)盒

目(mu)錄號:43014

產(chan)品內容(rong)：

自備試劑：

無(wu)水乙醇(chun)

保(bao)存(cun)條(tiao)件(jian)：

室(shi)溫(wen)（15 ~ 25℃）

具(ju)體(ti)產(chan)品的參(can)數(shu)以(yi)收到產(chan)品說明書的參(can)數(shu)為準(zhun)

產(chan)品簡介(jie)：

本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)使(shi)用(yong)特(te)殊(shu)的(de)結合(he)緩沖液能夠(gou)高(gao)效(xiao)純(chun)化>15nt 的單(dan)鏈(lian)或者雙鏈(lian) DNA 和 RNA。特別適用(yong)於從標記反應（地(di)gao辛標記，同(tong)位素(su)標記，生wu素標記等）混(hun)合(he)物(wu)中回收小片(pian)段標記探針，去除(chu)未反(fan)應的核苷(gan)酸、短 oligos、染(ran)料(liao)、酶、鹽離(li)子(zi)等。典型的回收率高(gao)達(da) 80-90%，每(mei)個離(li)心(xin)吸(xi)附(fu)柱(zhu)每(mei)次可吸(xi)附(fu)的(de) DNA  量(liang)為 10µg  。使用(yong)本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)回(hui)收的 RNA 或(huo)者 DNA 可適用(yong)於 in Situ Hybridization、Northern blot、RNAi、Gel shift assay、 Ligation、Sequencing、Microarray analysis 等實驗。

產(chan)品特點：

1.        快速：步驟少，操(cao)作(zuo)簡便(bian)，整(zheng)個操(cao)作(zuo)僅需(xu) 15 分(fen)鐘。

2.        高(gao)效(xiao)：獨te配(pei)方(fang)使本(ben)產(chan)品比壹般試劑(ji)盒(he)回(hui)收效(xiao)率(lv)大大提(ti)高(gao)，並(bing)且不(bu)會(hui)抑(yi)制下遊反(fan)應。

3.        適用(yong)範(fan)圍廣：適用(yong)於回收單鏈(lian)或者雙鏈(lian) DNA 和 RNA。雖(sui)然(ran)本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)推薦(jian)用(yong)於回收小片(pian)段或者寡(gua)聚核(he)苷(gan)酸(>15nt)，但(dan)是(shi)也(ye)可(ke)以(yi)高(gao)效(xiao)回(hui)收<10kb 的較(jiao)大片(pian)段(duan) DNA 或(huo)者 RNA。

註(zhu)意(yi)事(shi)項：

1.   Buffer BL 的(de)加入(ru)能夠(gou)改善(shan)吸(xi)附(fu)柱(zhu)的吸(xi)附(fu)能力(li)並(bing)提高(gao)吸(xi)附(fu)柱(zhu)的均(jun)壹性和穩定(ding)性，消除(chu)高(gao)溫(wen)潮(chao)濕(shi)或(huo)其(qi)他不良(liang)環境(jing)因(yin)素對(dui)吸(xi)附(fu)柱(zhu)造(zao)成(cheng)的影響。收到貨後 2 個月內(nei)，不用(yong)做(zuo)柱平(ping)衡。

2.   使(shi)用(yong)前(qian)請(qing)先檢查(zha)Buffer BL、Buffer OB 是(shi)否(fou)出(chu)現(xian)渾濁，如(ru)有(you)混(hun)濁現(xian)象，可在 37℃水浴(yu)中加熱(re)幾分(fen)鐘，即(ji)可(ke)恢(hui)復(fu)澄清。

操(cao)作(zuo)步驟

第(di)壹(yi)次使用(yong)前(qian)，請(qing)先在 Buffer RW 瓶(ping)中加入(ru)無水乙醇(chun)，並(bing)打對(dui)勾標記，加入(ru)體(ti)積(ji)請(qing)參(can)照(zhao)瓶(ping)上(shang)的標簽。第(di)壹(yi)次使用(yong)前(qian)，請(qing)先在 Buffer OB 瓶(ping)中加入(ru)異丙醇(chun)! 加(jia)入(ru)體(ti)積(ji)請(qing)參(can)照(zhao)瓶(ping)上(shang)的標簽。

1.  柱平(ping)衡：向吸(xi)附(fu)柱(zhu)中（吸(xi)附(fu)柱(zhu)放(fang)入(ru)收集(ji)管(guan)中）加入(ru) 100 ul 平(ping)衡液(ye) Buffer BL，12,000 rpm 離(li)心(xin) 1 min，棄(qi)濾液(ye)，將吸(xi)附(fu)柱(zhu)重新放(fang)回收集(ji)管(guan)中。（請(qing)使用(yong)當(dang)天處(chu)理(li)過(guo)的柱(zhu)子）

2.   加結合(he)液(ye)：估計樣(yang)品體(ti)積(ji)，向其(qi)中加入(ru) 10 倍(bei)體(ti)積(ji)結合(he)液(ye)Buffer OB，溫(wen)和地(di)充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)。

（註(zhu)意(yi)：如(ru)果回(hui)收的片(pian)段>100bp，只需(xu)要加(jia) 5 倍(bei)體(ti)積(ji) Buffer OB。）

（註(zhu)意(yi)：如(ru)果樣(yang)本(ben)體(ti)積(ji)小於 50ul,用(yong) RNase-Free H2O 補(bu)齊(qi) 50ul,以提(ti)高(gao)回(hui)收效(xiao)率(lv)。）

3.   吸(xi)附(fu)：將(jiang)上壹步(bu)所得(de)溶(rong)液加入(ru)壹套(tao)吸(xi)附(fu)柱(zhu)中，室(shi)溫(wen)放(fang)置 1 min，12,000 rpm 離心 1 min，棄(qi)濾液(ye)。

（ 註(zhu)意(yi)：吸(xi)附(fu)柱(zhu)容(rong)積(ji)為 750ul，若樣(yang)品體(ti)積(ji)大於 750ul 可分(fen)批(pi)加入(ru)）

4.   漂洗(xi)：加入(ru) 500ul Buffer RW，12,000 rpm 離心 1 min，棄(qi)濾液(ye)。

5.  二次漂洗(xi)：重復操(cao)作(zuo)步驟 4。

6.  幹(gan)燥(zao)：將離心(xin)吸(xi)附(fu)柱(zhu)於 12,000 rpm 離心 2 min，甩幹(gan)殘(can)留(liu)漂洗(xi)液。

7.   洗(xi)脫：將(jiang)離(li)心吸(xi)附(fu)柱(zhu)置於壹個新的 1.5 ml 離心管(guan)中，在吸(xi)附(fu)柱(zhu)中央(yang)加入(ru) 30 ~ 50 ul RNase-Free H2O，室(shi)溫(wen)放(fang)置 2 min，12,000 rpm 離心 1 min，收集(ji) DNA 片(pian)段(duan)。

（註(zhu)意(yi)：為增加(jia)回收效(xiao)率(lv)，可將洗(xi)脫液(ye)在(zai) 60℃預(yu)熱，也(ye)可(ke)將(jiang)得(de)到的溶(rong)液(ye)重新加入(ru)到離心(xin)管(guan)中，室(shi)溫(wen)放(fang)置 2 min，再次離心(xin)收集(ji)。）

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