Taq DNA Polymerase的2倍，達到100-138bp/秒，可(ke)以在短時間(jian)內(nei)獲(huo)得高產(chan)量的擴(kuo)增(zeng)產(chan)物，特別(bie)適(shi)合(he)於高(gao)保(bao)真地(di)擴(kuo)增(zeng)6kb以內(nei)的PCR 產(chan)物，擴(kuo)增(zeng)所(suo)得(de)的DNA為平末端(duan)，可(ke)直接用(yong)於Blunt (平末(mo)端)載(zai)體克隆（Cat#V116、V117），也(ye)可(ke)用(yong)於基(ji)因克隆、表(biao)達及突變分(fen)析(xi)等(deng)分(fen)子(zi)生物(wu)學(xue)實驗。
KOD DNA Polymerase（含超純dNTP )PCR相(xiang)關

諾(nuo)博萊德 KOD DNA Polymerase（含(han)超(chao)純(chun)dNTP )PCR相(xiang)關

KOD DNA Polymerase (含超(chao)純(chun) dNTP)

目(mu)錄(lu)號(hao):71516

產(chan)品(pin)內(nei)容(rong)

保存(cun)條(tiao)件

-20℃保存(cun)，有效(xiao)期(qi) 2 年(nian)。

具(ju)體產(chan)品(pin)的參數(shu)以收(shou)到(dao)產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)的參數(shu)為準(zhun)

產(chan)品(pin)簡(jian)介

KOD DNA Polymerase 是(shi)從(cong)克隆有Thermococcus Kodakaraensis DNA聚合(he)酶基(ji)因的質粒(li)在大腸桿菌中經誘導表(biao)達分離純(chun)化(hua)而來(lai)。該酶所具有(you)的超qiang3’→ 5’外(wai)切(qie)酶(mei)活(huo)性(xing)使得(de)其(qi)保(bao)真性(xing)比Pfu DNA Polymerase 更高(gao)，保真性(xing)是Taq DNA Polymerase的80倍，同時具(ju)有(you)合(he)成速度(du)快的特點(dian)，聚(ju)合(he)速度(du)約(yue)為普(pu)通(tong)Pfu DNA Polymerase的5倍，Taq DNA Polymerase的2倍，達到100-138bp/秒，可(ke)以在短時間(jian)內(nei)獲(huo)得高產(chan)量的擴(kuo)增(zeng)產(chan)物，特別(bie)適(shi)合(he)於高(gao)保(bao)真地(di)擴(kuo)增(zeng)6kb以內(nei)的PCR 產(chan)物，擴(kuo)增(zeng)所(suo)得(de)的DNA為平末端(duan)，可(ke)直接用(yong)於Blunt (平末(mo)端)載(zai)體克隆（Cat#V116、V117），也(ye)可(ke)用(yong)於基(ji)因克隆、表(biao)達及突變分(fen)析(xi)等(deng)分(fen)子(zi)生物(wu)學(xue)實驗。

活性(xing)單位:

KOD DNA Polymerase 活性(xing)定義為在 75°C 活(huo)性(xing)測定條件下(xia)，在 30 min內(nei)攝(she)入 10nmoles 的 dNTPs 使成為酸(suan)性(xing)不溶物時(shi)所需(xu)要(yao)酶(mei)的活性(xing)定義為1U。

質量(liang)控制(zhi):

SDS-PAGE 檢測(ce)純(chun)度大(da)於(yu) 99%，經檢測(ce)無(wu)外(wai)源核(he)酸(suan)酶(mei)活性(xing)；PCR 方(fang)法(fa)檢測無(wu)宿主(zhu)殘余 DNA，能有效(xiao)地(di)擴(kuo)增(zeng)人基(ji)因組(zu)中(zhong)的單拷貝基(ji)因；室(shi)溫(wen)存放壹周，無(wu)明顯(xian)活性(xing)改變。

適用(yong)範圍：

用(yong)於DNA的高保真擴(kuo)增(zeng)，如(ru)基(ji)因表(biao)達克隆、基(ji)因定點突變、細(xi)胞內(nei)基(ji)因點(dian)突變分(fen)析(xi)（SNP）和(he)平末端補(bu)平等(deng)。

註(zhu)意(yi)事(shi)項：

高(gao)保真KOD對(dui)於(yu)dNTP純度要(yao)求很高，因此(ci)建議(yi)用(yong)本酶配(pei)套的超純dNTP mix。

KOD DNA Polymerase的使用(yong)說明：

壹、配制 PCR 反應(ying)體(ti)系(xi)：(於冰(bing)上配制)

參(can)考(kao)模板(ban)用(yong)量（50 μl 反應(ying)體系(xi)）：

質粒(li)：5-20 ng；細(xi)菌基(ji)因組(zu)：10-100 ng；人類基(ji)因組(zu)：50-100 ng；cDNA：1-2 μl 。

註(zhu)意(yi)：用(yong) ddH2O 補(bu)足反(fan)應體(ti)系(xi)（體(ti)積(ji)）至(zhi) 50 μl。實際操作(zuo)中(zhong)，首先要(yao)計(ji)算(suan)好(hao)需要(yao)補(bu)加(jia)ddH2O 的量以後，建議(yi)先加(jia)水，然後(hou)按(an)上述順序添(tian)加(jia)其它成分，最(zui)後添(tian)加(jia) KOD DNA Polymerase。充(chong)分混勻(yun)後(hou)，離心(xin)數(shu)秒使反(fan)應(ying)混合(he)物沈(chen)到(dao)管底(di)，然(ran)後(hou)將(jiang)反應管置於(yu) PCR 儀中進行擴(kuo)增(zeng)。

二、設(she)置 PCR 循(xun)環(huan)條(tiao)件：（請根據(ju)實際情(qing)況(kuang)適當(dang)調整(zheng)）

註(zhu)意(yi)：壹般情(qing)況(kuang)下(xia)，Annealing Temperature = Tm - 5°C

如果擴(kuo)增(zeng)片(pian)段小(xiao)於 4 kb，建議(yi) KOD 酶(mei)的延(yan)伸速(su)度(du)為(wei) 1kb / 15 sec；

如(ru)果(guo)擴(kuo)增(zeng)片(pian)段大(da)於 4 kb，建議(yi)延(yan)伸速(su)度(du)為(wei) 1kb / 20-30 sec。

三、結(jie)果(guo)檢測：反應(ying)結(jie)束(shu)後(hou)取 5 µl 反(fan)應產(chan)物，瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝膠電泳檢(jian)測(ce)。

KOD DNA Polymerase（含超(chao)純(chun)dNTP )PCR相(xiang)關

北(bei)京(jing)諾(nuo)博萊德科(ke)技(ji)有(you)限公(gong)司始(shi)創(chuang)於(yu)2012年(nian)，總部(bu)位於北(bei)京(jing)海(hai)澱(dian)區，專註(zhu)於科(ke)研生物(wu)領(ling)域(yu)，是(shi)壹家(jia)研發、銷售(shou)和(he)服(fu)務(wu)於(yu)壹體的企(qi)業。公(gong)司秉承“誠(cheng)信(xin)為(wei)本(ben)，博(bo)采(cai)眾長(chang)"的發展理(li)念(nian)，致(zhi)力於(yu)為科(ke)研工作者(zhe)提供(gong)高(gao)質量(liang)的生物(wu)產(chan)品(pin)和(he)服(fu)務(wu)。

諾(nuo)博萊德的產(chan)品(pin)覆(fu)蓋面廣(guang)泛(fan)，包括以下(xia)

生化(hua)試劑(ji)：抗生素(su)、蛋(dan)白質、染色劑、細(xi)胞培養基(ji)、緩(huan)沖試劑(ji)、對(dui)照品(pin)、標準(zhun)品(pin)、磁(ci)珠、維(wei)生素(su)、酶(mei)和(he)輔(fu)酶、分離試劑(ji)、表(biao)面活(huo)性(xing)試劑(ji)、碳(tan)水化合(he)物；

即(ji)用(yong)型(xing)試劑(ji)：常規(gui)試劑(ji)溶(rong)液、即(ji)用(yong)型(xing)染色液、免(mian)疫(yi)學試劑(ji)、細(xi)胞生物(wu)學(xue)、分子(zi)生物(wu)學(xue)、檢測(ce)試劑(ji)盒、細(xi)胞分離液人或其他動(dong)物(wu)細(xi)胞、熒(ying)光(guang)定量、蛋白酶(mei)系(xi)列(lie)；

通用(yong)耗(hao)材：超(chao)濾(lv)離心(xin)管、吸(xi)頭(tou)/盒、離心(xin)管/盒、封(feng)板(ban)膜、PCR耗(hao)材、濾(lv)紙(zhi)、口(kou)罩手套、冷(leng)凍(dong)存(cun)管(guan)/盒、培養板(ban)/皿(min)/瓶(ping)、酶標條(tiao)/板(ban)、巴(ba)氏(shi)吸(xi)管(guan)、載(zai)玻(bo)片(pian)、蓋玻(bo)片(pian)、包埋(mai)/盒/模(mo)具(ju)、封片(pian)劑、刀片(pian)、石蠟(la)、印(yin)跡(ji)膜、藍(lan)蓋瓶(ping)、研磨器材(cai)、透析(xi)袋/夾(jia)子(zi)、血凝板(ban)、記(ji)號(hao)筆(bi)、註(zhu)射器、加(jia)樣槽(cao)、取樣(yang)杯、細(xi)胞篩網、細(xi)胞刮(gua)刀/鏟(chan)、單(dan)道多道(dao)手動(dong)自動(dong)移(yi)液器/支架、防(fang)卷板(ban)等(deng)產(chan)品(pin)被(bei)國(guo)內(nei)科(ke)研工作者(zhe)廣(guang)泛(fan)應(ying)用(yong)。