與 mRNA 相(xiang)比(bi)，lncRNA 具有豐(feng)度低、GC含量(liang)差(cha)異大(da)、二(er)級結構(gou)更(geng)復(fu)雜等(deng)特性，傳(chuan)統定(ding)量試(shi)劑(ji)對(dui) lncRNA 難以達(da)到(dao)理(li)想(xiang)的(de)效(xiao)果。本試(shi)劑(ji)盒(he)中的(de) 2× Universal lncRNA SYBR qPCR Mix是專門為(wei) lncRNA 定(ding)量檢測(ce)而研(yan)發的(de)新壹(yi)代(dai)預(yu)混(hun)形式的(de)熒(ying)光定(ding)量 PCR 檢測(ce)試(shi)劑(ji)，
lncRNA熒(ying)光定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)

諾(nuo)博(bo)萊(lai)德(de)lncRNA熒(ying)光定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he) 

lncRNAqPCR Kit (SYBR Green)lncRNA 熒(ying)光定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he) (SYBR Green) 

目(mu)錄(lu)號:71503

產(chan)品(pin)內(nei)容

保存(cun)條(tiao)件(jian)

-20℃保存(cun)，有效(xiao)期(qi) 24 個月(yue)。使用前(qian)，充分融(rong)解，輕輕顛倒混(hun)勻(yun)，短(duan)期(qi)使(shi)用可(ke)放在 4 ℃，避(bi)免反復(fu)凍融(rong)。

具(ju)體產(chan)品(pin)的(de)參數(shu)以(yi)收到(dao)產(chan)品說明(ming)書(shu)的(de)參數(shu)為(wei)準

產(chan)品(pin)簡介(jie)

與 mRNA 相(xiang)比(bi)，lncRNA 具有豐(feng)度低、GC含量(liang)差(cha)異大(da)、二(er)級結構(gou)更(geng)復(fu)雜等(deng)特性，傳(chuan)統定(ding)量試(shi)劑(ji)對(dui) lncRNA 難以達(da)到(dao)理(li)想(xiang)的(de)效(xiao)果。本試(shi)劑(ji)盒(he)中的(de) 2× Universal lncRNA SYBR qPCR Mix是專門為(wei) lncRNA 定(ding)量檢測(ce)而研(yan)發的(de)新壹(yi)代(dai)預(yu)混(hun)形式的(de)熒(ying)光定(ding)量 PCR 檢測(ce)試(shi)劑(ji)，其(qi)中(zhong)的(de)DNA Polymerase 采用的(de)是抗體修飾的(de)熱啟(qi)動(dong)形式，確(que)保本產品(pin)在保證(zheng)較(jiao)高的(de)反應(ying)特(te)異性(xing)的(de)情況下(xia)具(ju)有更(geng)高的(de)檢測(ce)靈(ling)敏(min)度(du)。此外(wai)，Buffer 中添(tian)加了的(de) H-competitor 因子(zi)和(he) EP 組(zu)分(fen)，使得本產品(pin)具(ju)有廣(guang)泛(fan)的(de)樣(yang)本普適性，對(dui)不同(tong)GC含量(liang)的(de)模(mo)板、具(ju)有復(fu)雜高級(ji)結(jie)構(gou)的(de)模(mo)板、PCR 抑(yi)制劑(ji)殘(can)留(liu)較多(duo)的(de)模(mo)板以(yi)及長片(pian)段模(mo)板等(deng)具有非(fei)常(chang)好的(de)擴增適用性(xing)，特別適合高級(ji)結(jie)構(gou)相(xiang)對復(fu)雜，整(zheng)體豐(feng)度(du)相(xiang)對較(jiao)低(di)的(de) lncRNA 的(de)定(ding)量檢測(ce)。

預(yu)混(hun)液中(zhong)含有通(tong)用型(xing)ROX，適用於所有qPCR儀，使用qPCR Mix時(shi)不需(xu)要額外(wai)添(tian)加ROX來校(xiao)正(zheng)儀器。

操(cao)作(zuo)步(bu)驟：

1. 將DNA模(mo)板、引(yin)物、2 x Universal lncRNA SYBR qPCR Mix、RNase-Free H2O溶解並(bing)置於冰上備(bei)用。

2. 冰(bing)上(shang)配制qPCR反(fan)應(ying)體系(xi)：（以(yi)20μl反(fan)應體系(xi)為(wei)例）

註(zhu)意(yi)：

1） 推薦(jian)模(mo)板加樣(yang)量(liang)為(wei)1-2μl / 20μl反應(ying)體系(xi)，cDNA原(yuan)液≤總(zong)反(fan)應體系(xi)的(de)10%。因不同(tong)種(zhong)類(lei)的(de)DNA模(mo)板中(zhong)含有的(de)靶(ba)基(ji)因拷貝數不同(tong)，可(ke)對(dui)模(mo)板進(jin)行(xing)梯(ti)度(du)稀釋，以確(que)定(ding)優(you)良的(de)模(mo)板使(shi)用量(liang)。

2） 通(tong)常(chang)推薦(jian)引(yin)物濃(nong)度為(wei)0.2 μM，就(jiu)可(ke)以(yi)得(de)到(dao)較(jiao)好的(de)結果(guo)，反(fan)應(ying)效(xiao)果不佳(jia)時(shi)可(ke)在0.1 - 1.0 μM範(fan)圍內(nei)進(jin)行(xing)調(tiao)整(zheng)。

擴(kuo)增效(xiao)率(lv)不高的(de)情況下(xia)，可(ke)提(ti)高引(yin)物濃(nong)度；發(fa)生非(fei)特(te)異性(xing)反應(ying)時，可(ke)降低(di)引(yin)物濃(nong)度，由(you)此優(you)化(hua)反應體系(xi)。

3. qPCR反(fan)應(ying)程序(xu)

註(zhu)意(yi)：

1） 本產品(pin)兼(jian)容性強(qiang)，絕大(da)多(duo)數情況下(xia)使(shi)用二(er)步(bu)法(fa)和三(san)步(bu)法(fa)均可(ke)獲得(de)良好效(xiao)果。壹(yi)般(ban)來說，二(er)步(bu)法(fa)擴增特異性(xing)高，三(san)步(bu)法(fa)擴增效(xiao)率(lv)高。如(ru)果(guo)融(rong)鏈曲線(xian)較差(cha)，可(ke)以(yi)嘗試(shi)兩(liang)步(bu)法(fa)擴增或(huo)提(ti)高退火(huo)溫(wen)度；如(ru)果因使用Tm 值較低(di)的(de)引(yin)物等(deng)原因(yin)，得不到(dao)良好的(de)實驗結果(guo)時，可(ke)嘗(chang)試(shi)加長延伸時間(jian)或(huo)者進(jin)行(xing)三(san)步(bu)法(fa)PCR擴增。

2） 根據(ju)引(yin)物的(de)Tm值進(jin)行(xing)退火(huo)&延伸（退火(huo)）溫(wen)度的(de)設定(ding)；

3） 延伸（退火(huo)&延伸）時間(jian)的(de)設置(zhi)還(hai)需要根據(ju)您所(suo)使用的(de)qPCR儀所需(xu)要的(de)最(zui)短(duan)數(shu)據(ju)采集(ji)時間(jian)自行(xing)調(tiao)整(zheng)。

4） 融(rong)解曲線(xian)分析(xi)請(qing)以(yi)所(suo)使(shi)用的(de)熒(ying)光定(ding)量PCR儀推薦(jian)的(de)程序(xu)進(jin)行(xing)設(she)定(ding)。

相(xiang)關產品(pin)：

71500-100 Script III lncRNA cDNA Synthesis Kit（with dsDNase）

91011-100 RNAzol Reagent（Trizol）

91013-50 通(tong)用型(xing)總RNA快速(su)提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he)（TRIzol+吸(xi)附(fu)柱(zhu)） 免氯仿，升(sheng)級(ji)版(ban)

91017-50 動(dong)物(wu)組(zu)織(zhi)/細胞(bao)/昆(kun)蟲(chong)總(zong)RNA快(kuai)速(su)提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he) 免氯仿，同(tong)RNeasy Mini Kit

91218-50 動(dong)物(wu)組(zu)織(zhi)/細胞(bao)/昆(kun)蟲(chong)總(zong)RNA快(kuai)速(su)提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he)(帶gDNA過(guo)濾(lv)器) 免氯仿，同(tong)RNeasy Plus Mini Kit

91019-50 植(zhi)物(wu)總(zong)RNA提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he) 免氯仿，同(tong)RNeasy Plant Mini Kit

91318-50 多(duo)糖(tang)多(duo)酚(fen)植(zhi)物(wu)總(zong)RNA快(kuai)速(su)提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he)(帶gDNA過(guo)濾(lv)器) 免氯仿

91513-50 果(guo)實/種(zhong)子總(zong)RNA快速(su)提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he)(帶gDNA過(guo)濾(lv)器) 難題樣(yang)本：果實、種(zhong)子、中(zhong)草藥(yao)等(deng)

lncRNA熒(ying)光定(ding)量檢測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)