由(you)Pfu、HiFi、Vent或(huo)KOD等有(you)3’→5’外切(qie)酶(mei)活(huo)性的(de)高保真DNA聚合酶(mei)擴(kuo)增(zeng)的(de)PCR產物為不(bu)帶A尾的(de)平末(mo)端(duan)DNA片段(duan)，如(ru)該(gai)平末(mo)端(duan)DNA片段(duan)需要(yao)和T載體相連接，需要先利用Taq DNA polymerase在(zai)平末(mo)端(duan)片段(duan)後加上A尾後才能與T載體的(de)T頭互(hu)補連接。本試劑(ji)盒(he)提供了加A尾需要(yao)的(de)所(suo)有(you)成(cheng)分(fen)，可以(yi)在20分(fen)鐘(zhong)左右(you)完(wan)成(cheng)整個(ge)過(guo)程。
平末(mo)端(duan)DNA加A試劑(ji)盒(he) T4原理載體及其(qi)他

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產品(pin)詳(xiang)情(qing)

品(pin)牌(pai)	NobleRyder/諾(nuo)博(bo)萊(lai)德(de)	貨(huo)號(hao)	42016
規(gui)格	25次	供貨周期	現(xian)貨(huo)
主要用(yong)途	平末(mo)端(duan)DNA加A試劑(ji)盒(he) T4原理載體及其(qi)他	應(ying)用(yong)領域(yu)	環(huan)保,化工,生(sheng)物產業,農林牧(mu)漁,制藥/生(sheng)物制藥

諾(nuo)博(bo)萊(lai)德(de) 平末(mo)端(duan)DNA加A試劑(ji)盒(he) T4原理載體及其(qi)他

平末(mo)端(duan)DNA加A試劑(ji)盒(he)

目錄(lu)號：42016

試劑盒(he)組成(cheng)、儲存、穩(wen)定(ding)性：

組成(cheng)	25次(42016-25)	50次（42016-50）
Taq DNA polymerase	25ml	50ml
10 x A-tailing buffer	25ml	50ml
dATP Mix	25ml	50ml

儲存：-20 ℃ 保存。

產品(pin)介紹(shao)：

由Pfu、HiFi、Vent或KOD等(deng)有3’→5’外切(qie)酶(mei)活(huo)性的(de)高保真DNA聚合酶(mei)擴(kuo)增(zeng)的(de)PCR產物為不(bu)帶A尾的(de)平末(mo)端(duan)DNA片段(duan)，如(ru)該(gai)平末(mo)端(duan)DNA片段(duan)需要(yao)和T載體相連接，需要先利用Taq DNA polymerase在(zai)平末(mo)端(duan)片段(duan)後加上A尾後才能與T載體的(de)T頭互(hu)補連接。本試劑(ji)盒(he)提供了加A尾需要(yao)的(de)所(suo)有(you)成(cheng)分(fen)，可以(yi)在20分(fen)鐘(zhong)左右(you)完(wan)成(cheng)整個(ge)過(guo)程。

操作步驟：

1. 平末(mo)端(duan)PCR產物用PCR清(qing)潔（無(wu)非特(te)異擴增）或(huo)者(zhe)膠回(hui)收純(chun)化（有(you)非(fei)特(te)異(yi)擴增）。

2. 純化好(hao)的(de)平末(mo)端(duan)DNA片段(duan)按以下(xia)反應(ying)體系(xi)加A尾:

平末(mo)端(duan)DNA片段(duan)	1-7ml（不(bu)超過1mg）
dATP Mix	1ml
10 x A-tailing buffer	1ml
Taq DNA polymerase	1ml

3. 輕輕混(hun)勻(yun)後72℃保溫(wen)20-30 分(fen)鐘(zhong)。

4. 加A尾的(de)產物可以(yi)不(bu)需要再次清(qing)潔或(huo)者膠(jiao)回收純(chun)化，取(qu)1-2ml直(zhi)接用於(yu)連接反應(ying)。

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