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| 品(pin)牌(pai) | NobleRyder/諾博(bo)萊德 | 貨號(hao) | BD6011 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格 | 50T/24S | 供貨周期(qi) | 現(xian)貨 |
| 主要(yao)用途(tu) | 通(tong)過測(ce)定總(zong)巰(qiu)基(ji)含(han)量(liang)和(he)GSH 含(han)量(liang),能夠(gou)間(jian)接測(ce)定蛋(dan)白質(zhi)巰(qiu)基(ji)含(han)量(liang) | 應(ying)用(yong)領域(yu) | 環(huan)保(bao),化工,生物(wu)產(chan)業,農林(lin)牧(mu)漁(yu),制藥(yao)/生物(wu)制(zhi)藥(yao) |
總(zong)巰(qiu)基(ji)測(ce)定試劑(ji)盒說明(ming)書
分(fen)光(guang)光度(du)法(fa) 50 管(guan)/24 樣(yang)
總(zong)巰(qiu)基(ji)測(ce)定試劑(ji)盒 抗(kang)氧
正(zheng)式測(ce)定前務(wu)必取(qu) 2-3 個(ge)預期差(cha)異較(jiao)大的樣本(ben)做(zuo)預測(ce)定測(ce)定意義:
生物(wu)體(ti)內巰(qiu)基(ji)主要(yao)包(bao)括谷(gu)胱(guang)gan肽巰(qiu)基(ji)和(he)蛋白(bai)質巰(qiu)基(ji)。前者(zhe)不(bu)僅(jin)能夠(gou)修復氧化損(sun)傷的蛋白(bai)質,而(er)且(qie)參與(yu)活性氧清除,後(hou)者對於維(wei)持蛋(dan)白質構(gou)象具有重(zhong)要(yao)作(zuo)用。通(tong)過測(ce)定總(zong)巰(qiu)基(ji)含(han)量(liang)和(he)GSH 含(han)量(liang),能夠(gou)間(jian)接測(ce)定蛋(dan)白質(zhi)巰(qiu)基(ji)含(han)量(liang)。
測(ce)定原(yuan)理:
巰(qiu)基(ji)基(ji)團(tuan)與(yu) 5,5’- 二(er)硫代(dai)-雙-硝(xiao)基(ji)苯(ben)甲酸(DTNB)反(fan)應(ying),生成(cheng)黃(huang)色(se)化(hua)合物(wu),在(zai) 412nm 處(chu)有最(zui)大吸(xi)收峰(feng)。
組(zu)成(cheng):
產(chan)品(pin)名稱(cheng) | BD6011-50T/24S | Storage |
試劑(ji)壹:液體(ti) | 40ml | 4℃ |
試劑(ji)二(er):液(ye)體(ti) | 2ml | 4℃避(bi)光 |
說(shuo)明(ming)書 | 壹(yi)份(fen) | |
自(zi)備(bei)儀器和(he)用品(pin):
天平、研(yan)缽、可見(jian)分(fen)光(guang)光度(du)計、恒溫水浴(yu)鍋(guo)、1ml 玻璃比(bi)色皿(min)、乙(yi)醇和(he)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)。
樣(yang)品(pin)的制備(bei):
按照組織質(zhi)量(liang)(g):水(shui)體(ti)積(ji)(ml)為 1:5~10 的比(bi)例(li)(建議(yi)稱(cheng)取約(yue) 0.1g 組(zu)織,加入 1ml 提(ti)取液(ye))進(jin)行(xing)冰浴(yu)勻(yun)漿(jiang),然(ran)後(hou) 8000g,4℃離(li)心(xin) 10min,取(qu)上清,置冰上待測(ce)。
血清,培(pei)養(yang)液(ye):稀釋(shi) 5 倍後測(ce)定,可(ke)取 0.1ml 樣(yang)本(ben),加入 0.4ml 蒸(zheng)餾(liu)水(shui),混勻,置冰上待測(ce)。
測(ce)定操作(zuo)表:
1、分(fen)光(guang)光度(du)計預熱(re) 30min,調節(jie)波長至 412nm,雙蒸(zheng)水調零(ling)。
2、操作(zuo)表
在(zai) 1ml 玻璃比(bi)色皿(min)中(zhong)加入如(ru)下試劑(ji)
對照管 | 測(ce)定管(guan) | |
樣(yang)品(pin)(μl) | 200 | 200 |
試劑(ji)壹(μl) | 750 | 750 |
試劑(ji)二(er)(μl) | 50 |
乙(yi)醇(μl) | 50 | ||
混勻,25℃靜(jing)置(zhi) 10min, 測(ce)定 412nm 吸(xi)光值,ΔA=A 測(ce)定-A 對照。每個測(ce)定管(guan)設壹個(ge)對照管。 | |||
計(ji)算(suan)公式:
總(zong)巰(qiu)基(ji)標(biao)準曲(qu)線(xian):y =3.6222 x- 0.0037,R2 = 1,x 為標(biao)品(pin)濃(nong)度(du),單(dan)位(wei)μmol/ml, y 為吸(xi)光度(du)ΔA。
組(zu)織:
按樣本(ben)重(zhong)量(liang)計(ji)算(suan)
總(zong)巰(qiu)基(ji)含(han)量(liang)(μmol/g 鮮重)=(ΔA+0.0037)÷3.6222 ×V 樣(yang)總(zong)÷W
=0.276×(ΔA+0.0037)÷W
按樣本(ben)蛋(dan)白濃(nong)度(du)計算(suan)
總(zong)巰(qiu)基(ji)含(han)量(liang)(μmol/mg prot)=(ΔA+0.0037)÷3.6222×V 樣(yang)總(zong)÷Cpr
=0.276×(ΔA+0.0037)÷Cpr
血清、培(pei)養(yang)液(ye):
總(zong)巰(qiu)基(ji)含(han)量(liang)(μmol/L)=(ΔA+0.0037)÷3.6222 ×5×103
=1380×(ΔA+0.0037)
V 樣(yang)總(zong):加入提(ti)取液(ye)體(ti)積,1ml;W:樣品質量(liang),g ;Cpr:樣(yang)本(ben)蛋(dan)白濃(nong)度(du),mg/ml;5:血清,培(pei)養(yang)液(ye)等(deng)液體(ti)樣(yang)本(ben)稀釋(shi)倍數;103 :1mmol/L=103μmol/ L
註(zhu)意事項(xiang):
最(zui)di檢出(chu)限(xian)為(wei) 10μmol/L。
總(zong)巰(qiu)基(ji)測(ce)定試劑(ji)盒 抗(kang)氧