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聯(lian)系(xi)電(dian)話:10-62817090
| 品牌(pai) | NobleRyder/諾博(bo)萊(lai)德 | 貨號(hao) | BD6019 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格(ge) | 50T/24S | 供(gong)貨周期(qi) | 現(xian)貨 |
| 主要用途 | 在(zai)決(jue)定植物(wu)的花(hua)色(se)、葉色、果(guo)色和其他(ta)經(jing)濟器(qi)官(guan)的色(se)澤及其營養(yang)品(pin)質(zhi)方面(mian)起著(zhe)重要作(zuo)用 | 應用(yong)領域(yu) | 環(huan)保(bao),化(hua)工(gong),生(sheng)物(wu)產(chan)業,農林(lin)牧漁,制(zhi)藥/生(sheng)物(wu)制(zhi)藥 |
二(er)氫黃(huang)酮(tong)醇(chun)還(hai)原(yuan)酶(Dihydro flavonol reductase,DFR)試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)書(shu)
分光(guang)光(guang)度(du)法 50 管(guan)/24 樣
二(er)氫黃(huang)酮(tong)醇(chun)還(hai)原(yuan)酶試劑盒 抗(kang)氧
正(zheng)式(shi)測(ce)定前務必(bi)取 2-3 個預(yu)期(qi)差異(yi)較(jiao)大(da)的樣本做預(yu)測(ce)定測(ce)定意(yi)義:
二(er)氫黃(huang)酮(tong)醇(chun)還(hai)原(yuan)酶是(shi)類黃(huang)酮(tong)合(he)成(cheng)途徑中的壹(yi)個關(guan)鍵(jian)酶(mei),在(zai)決(jue)定植物(wu)的花(hua)色(se)、葉色、果(guo)色和其他(ta)經(jing)濟器(qi)官(guan)的色(se)澤及其營養(yang)品(pin)質(zhi)方面(mian)起著(zhe)重要作(zuo)用。
測(ce)定原(yuan)理:
二(er)氫黃(huang)酮(tong)醇(chun)還(hai)原(yuan)酶作(zuo)用於(yu)二(er)氫槲皮(pi)素(su)產(chan)生(sheng)兒(er)茶(cha)素,可與香(xiang)cao醛縮合(he)形(xing)成(cheng)紅(hong)色化(hua)合(he)物(wu),在(zai) 500nm 處(chu)有(you)特(te)征吸收峰(feng)。
組(zu)成(cheng):
產(chan)品(pin)名稱(cheng) | BD6019-50T/24S | Storage |
提(ti)取液:液(ye)體 | 50ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)壹(yi):液體 | 30ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)二(er):液(ye)體 | 3ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)三:粉(fen)劑(ji) | 1 瓶(ping) | 4℃ |
試(shi)劑(ji)四(si):液(ye)體 | 40ml×2 | 4℃避光(guang) |
說(shuo)明(ming)書(shu) | 壹(yi)份 | |
試(shi)劑(ji)三:粉(fen)劑(ji)×1 瓶(ping),4℃保(bao)存(cun)。臨用(yong)前(qian)加 5ml 蒸(zheng)餾水溶(rong)解;用不完的試(shi)劑(ji)分裝後(hou)-20℃保(bao)存(cun),禁(jin)止(zhi)反復(fu)凍(dong)融(rong)。
自(zi)備儀器(qi)和(he)用(yong)品(pin):
研(yan)缽(bo)、低(di)溫(wen)離心機、震(zhen)蕩(dang)儀、氮(dan)吹(chui)儀、可見(jian)分光(guang)光(guang)度(du)計、1ml 玻(bo)璃(li)比色(se)皿、水(shui)浴(yu)鍋(guo)、無(wu)水乙(yi)醇(chun)、乙(yi)酸(suan)乙(yi)
。
酶(mei)液(ye)提(ti)取:
組(zu)織:按(an)照(zhao)組織質(zhi)量(liang)(g):提(ti)取液體積(ji)(ml)為 1:5~10 的比(bi)例(建議稱(cheng)取約 0.1g 組(zu)織,加入(ru) 1ml 提(ti)取液),進(jin)行(xing)冰浴(yu)勻(yun)漿(jiang)。10000g ,4℃離心 10min,取上清(qing),置冰上(shang)待測(ce)。
液(ye)體:直(zhi)接(jie)檢(jian)測(ce)。
測(ce)定操作(zuo)表(biao)
對照(zhao)管(guan) | 測(ce)定管(guan) | |
酶(mei)液(ye)(μl) | 200 | 200 |
試(shi)劑(ji)壹(yi)(μl) | 700 | 600 | ||
試(shi)劑(ji)二(er)(μl) | 100 | |||
試(shi)劑(ji)三(μl) | 100 | 100 | ||
混(hun)勻(yun),30℃反(fan)應 30min | ||||
乙(yi)酸(suan)乙(yi) | 1000 | 1000 | ||
37℃震(zhen)蕩(dang) 10min,取上層(ceng)溶(rong)液(ye),N2 吹(chui)幹 | ||||
無(wu)水乙(yi)醇(chun)(μl) | 500 | 500 | ||
充(chong)分震蕩(dang) | ||||
試(shi)劑(ji)四(si)(μl) | 1500 | 1500 | ||
混(hun)勻(yun),25℃靜(jing)置 10min,於(yu) 1ml 玻(bo)璃(li)比色(se)皿測(ce)定 500nm 處(chu)吸(xi)光(guang)值A。 分別記(ji)為A 對照(zhao)管(guan)和A 測(ce)定管(guan),△A=A 測(ce)定管(guan)-A 對照(zhao)管(guan) | ||||
酶(mei)活(huo)性(xing)計(ji)算(suan)公(gong)式(shi):
標準曲(qu)線(xian):y=0.0184x+0.0002,R2=0.999
按(an)照(zhao)蛋白(bai)濃度(du)計算(suan)
酶(mei)活(huo)性(xing)定義:在(zai) 30℃,pH7.5 條(tiao)件下(xia),每(mei)毫克(ke)蛋白(bai)每分鐘(zhong)分解二(er)氫槲皮(pi)素(su)產(chan)生(sheng) 1mmol 兒(er)茶(cha)素所(suo)需的酶(mei)量(liang)為壹(yi)個酶(mei)活(huo)力單位(wei)。
DFR 活(huo)性(xing)(mmol/min/mg prot)=(△A-0.0002)÷0.0184×V 反(fan)總(zong)÷(V 樣×Cpr)÷T÷2
= 9.06×(△A-0.0002)÷Cpr
按(an)照(zhao)樣本質量(liang)計(ji)算
酶(mei)活(huo)性(xing)定義:在(zai) 30℃,pH7.5 條(tiao)件下(xia),每(mei)克(ke)組織每(mei)分鐘(zhong)分解二(er)氫槲皮(pi)素(su)產(chan)生(sheng) 1mmol 兒(er)茶(cha)素所(suo)需的酶(mei)量(liang)為壹(yi)個酶(mei)活(huo)力單位(wei)。
DFR 活(huo)性(xing)(mmol/min/g 鮮(xian)重(zhong))= (△A-0.0002)÷0.0184×V 反(fan)總(zong)÷(V 樣×W÷V 樣總(zong))÷T÷2
= 9.06×(△A-0.0002)÷W
按(an)液(ye)體體積(ji)計算(suan)
酶(mei)活(huo)性(xing)定義:在(zai) 30℃,pH7.5 條(tiao)件下(xia),每(mei)毫升液(ye)體每(mei)分鐘(zhong)分解二(er)氫槲皮(pi)素(su)產(chan)生(sheng) 1mmol 兒(er)茶(cha)素所(suo)需的酶(mei)量(liang)為壹(yi)個酶(mei)活(huo)力單位(wei)。
DFR 活(huo)性(xing)(mmol/min/ml)=(△A-0.0002)÷0.0184×V 反(fan)總(zong)÷V 樣÷T÷2
= 9.06×(△A-0.0002)
V 反(fan)總(zong):反(fan)應總(zong)體積(ji),1ml;V 樣:反應體系(xi)中樣本體積(ji),0.1ml;V 樣總(zong):加入(ru)提(ti)取液體積(ji),1ml;Cpr:樣本蛋白(bai)濃度(du),mg/ml;W,樣本質量(liang),g;T:反(fan)應時(shi)間(jian),30min
二(er)氫黃(huang)酮(tong)醇(chun)還(hai)原(yuan)酶試劑盒 抗(kang)氧