花青素(su)還原(yuan)酶(mei)是(shi)黃(huang)酮合(he)成途徑中(zhong)的(de)關(guan)鍵酶，在植(zhi)物體(ti)內(nei)起非(fei)常(chang)重要的(de)調控作(zuo)用(yong)，對(dui)花青素(su)還原(yuan)酶(mei)的(de)調控機制(zhi)研究(jiu)有(you)利於(yu)從(cong)基因水(shui)平(ping)改變植(zhi)物的(de)品質。
花(hua)青素(su)還原(yuan)酶(mei)試(shi)劑盒 抗(kang)氧

花(hua)青素(su)還原(yuan)酶(mei)（anthocyanidin reductase，ANR）試(shi)劑盒說(shuo)明書

分(fen)光(guang)光(guang)度法(fa) 50 管/48 樣(yang)

花(hua)青素(su)還原(yuan)酶(mei)試(shi)劑盒 抗(kang)氧

正式(shi)測定前(qian)務(wu)必取(qu) 2-3 個(ge)預期差(cha)異較大(da)的(de)樣本做(zuo)預測定測定意(yi)義(yi)：

花(hua)青素(su)還原(yuan)酶(mei)是(shi)黃(huang)酮合(he)成途徑中(zhong)的(de)關(guan)鍵酶，在植(zhi)物體(ti)內(nei)起非(fei)常(chang)重要的(de)調控作(zuo)用(yong)，對(dui)花青素(su)還原(yuan)酶(mei)的(de)調控機制(zhi)研究(jiu)有(you)利於(yu)從(cong)基因水(shui)平(ping)改變植(zhi)物的(de)品質。

測定原(yuan)理：

花(hua)青素(su)還原(yuan)酶(mei)在 NADPH 存(cun)在的(de)條件下作(zuo)用(yong)於(yu)飛燕草色(se)素(su)轉變(bian)為(wei)表(biao)沒(mei)食(shi)子(zi)兒(er)茶素(su)和(he)NADP，使(shi)反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)在 340nm 處的(de)吸光(guang)值(zhi)下(xia)降(jiang)，吸(xi)光值(zhi)下(xia)降(jiang)速(su)率反(fan)應(ying)了花青素(su)還原(yuan)酶(mei)的(de)活性(xing)。

組(zu)成：

試(shi)劑二：粉劑×1 瓶(ping)，4℃避光(guang)保(bao)存(cun)。臨用(yong)前加 3ml 蒸(zheng)餾水溶(rong)解；用(yong)不完(wan)的(de)試(shi)劑分(fen)裝(zhuang)後(hou)-20℃保(bao)存(cun)，禁止反(fan)復(fu)凍融。

試(shi)劑三(san)：粉(fen)劑×1 瓶(ping)，4℃避光(guang)保(bao)存(cun)。臨用(yong)前加 3ml 蒸(zheng)餾水溶(rong)解；用(yong)不完(wan)的(de)試(shi)劑分(fen)裝(zhuang)後(hou)-20℃保(bao)存(cun)，禁止反(fan)復(fu)凍融。

試(shi)劑四：粉劑×1 瓶(ping)，4℃避光(guang)保(bao)存(cun)。臨用(yong)前加 3ml 蒸(zheng)餾水溶(rong)解；用(yong)不完(wan)的(de)試(shi)劑分(fen)裝(zhuang)後(hou)-20℃保(bao)存(cun)，禁止反(fan)復(fu)凍融。

自(zi)備(bei)儀(yi)器和(he)用(yong)品：

天(tian)平(ping)、研缽、低溫離心(xin)機、紫外分(fen)光(guang)光(guang)度計、1ml 石英(ying)比(bi)色(se)皿、蒸(zheng)餾水。

酶(mei)液提取(qu)：

組(zu)織：按(an)照(zhao)組(zu)織質(zhi)量（g）：提取(qu)液體(ti)積(ji)(ml)為 1：5~10 的(de)比例(li)（建議(yi)稱(cheng)取(qu)約 0.1g 組(zu)織，加(jia)入(ru) 1ml 提取(qu)液），進行冰浴(yu)勻(yun)漿(jiang)。10000g ，4℃離心(xin) 10min，取(qu)上清(qing)，置冰上待(dai)測。

培養液等(deng)液體(ti)：直(zhi)接(jie)檢測。

測定操(cao)作(zuo)表(biao)

充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun)，於(yu) 1ml 石英(ying)比(bi)色(se)皿測定 340 處吸光(guang)值(zhi)A1，然(ran)後(hou)在 40℃溫育 20min 後(hou)，再測定 340nm 處吸光(guang)值(zhi)

A2，△A=A1-A2

酶(mei)活(huo)性(xing)計算公(gong)式(shi):

按(an)照(zhao)蛋白濃(nong)度計算

酶(mei)活(huo)性(xing)定義(yi)：在 40℃，pH6.5 條件下，每(mei)毫克蛋白每(mei)分(fen)鐘(zhong)催(cui)化(hua) 1nmolNADPH 定義(yi)為壹(yi)個(ge)酶(mei)活(huo)力單(dan)位。

ANR 活(huo)性(xing)（nmol/min/mg prot）= ΔA÷（ε×d）×V 反(fan)總÷(V 樣×Cpr) ÷T

= 80.39×ΔA÷Cpr

按(an)照(zhao)樣本質量計算

酶(mei)活(huo)性(xing)定義(yi)：在 40℃，pH6.5 條件下，每(mei)克組(zu)織每(mei)分(fen)鐘(zhong)催(cui)化(hua) 1nmolNADPH 定義(yi)為壹(yi)個(ge)酶(mei)活(huo)力單(dan)位。

ANR 活(huo)性(xing)（nmol/min/g  鮮重(zhong)）= ΔA÷（ε×d）×V 反(fan)總÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T

= 80.39×ΔA÷W

按(an)液體(ti)體(ti)積(ji)計算

酶(mei)活(huo)性(xing)定義(yi)：在 40℃，pH6.5 條件下，每(mei)毫升液體(ti)每(mei)分(fen)鐘(zhong)催(cui)化(hua) 1nmolNADPH 定義(yi)為壹(yi)個(ge)酶(mei)活(huo)力單(dan)位。

ANR 活(huo)性(xing)（nmol/min/ml）= ΔA÷（ε×d）×V 反(fan)總÷V 樣÷T

= 80.39×ΔA

V 反(fan)總：反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)總體(ti)積(ji)，1ml；ε：NADH 摩爾(er)消光(guang)系(xi)數(shu)，6.22×103 L / mol /cm；d：比(bi)色(se)皿光(guang)徑，1cm； V 樣：加(jia)入(ru)樣(yang)本體(ti)積(ji)，0.1ml；V 樣總：加入(ru)提取(qu)液體(ti)積(ji)，1ml；T：反(fan)應(ying)時間，20min；Cpr：樣本蛋白質(zhi)濃(nong)度，mg/ml；W：樣(yang)本質量，g

花(hua)青素(su)還原(yuan)酶(mei)試(shi)劑盒 抗(kang)氧