土壤(rang)蛋白(bai)酶參(can)與(yu)土壤(rang)中存(cun)在的(de)氨基(ji)酸(suan)、蛋白(bai)質(zhi)以(yi)及(ji)其(qi)他(ta)含蛋白(bai)質(zhi)氮的(de)有機化合物的(de)轉化，其(qi)水(shui)解(jie)產(chan)物(wu)是高等植物(wu)的(de)氮源(yuan)之(zhi)壹(yi)。S-ACPT 在酸(suan)性環境(jing)下催化蛋白(bai)質(zhi)水(shui)解(jie)，與土壤(rang)有機質(zhi)含量、氮素(su)及(ji)其(qi)他(ta)土壤(rang)性質(zhi)有關(guan)。
土壤(rang)酸(suan)性蛋白(bai)酶試劑(ji)盒(he)

土壤(rang)酸(suan)性蛋白(bai)酶（Solid -Acid Protease，S-ACPT）試劑(ji)盒(he)說(shuo)明書(shu)

分光(guang)光(guang)度法(fa) 50 管(guan)/24 樣(yang)

土壤(rang)酸(suan)性蛋白(bai)酶試劑(ji)盒(he)

正式(shi)測(ce)定(ding)前務必取 2-3 個預(yu)期差(cha)異(yi)較大(da)的(de)樣本做(zuo)預(yu)測(ce)定(ding)測(ce)定(ding)意(yi)義：

土壤(rang)蛋白(bai)酶參(can)與(yu)土壤(rang)中存(cun)在的(de)氨基(ji)酸(suan)、蛋白(bai)質(zhi)以(yi)及(ji)其(qi)他(ta)含蛋白(bai)質(zhi)氮的(de)有機化合物的(de)轉化，其(qi)水(shui)解(jie)產(chan)物(wu)是高等植物(wu)的(de)氮源(yuan)之(zhi)壹(yi)。S-ACPT 在酸(suan)性環境(jing)下催化蛋白(bai)質(zhi)水(shui)解(jie)，與土壤(rang)有機質(zhi)含量、氮素(su)及(ji)其(qi)他(ta)土壤(rang)性質(zhi)有關(guan)。

測(ce)定(ding)原(yuan)理(li)：

酸(suan)性條件(jian)下(xia)，S-ACPT 可將(jiang)酪(lao)蛋白(bai)水(shui)解(jie)產(chan)生(sheng)酪(lao)an酸(suan)；在堿(jian)性條件(jian)下(xia)，酪(lao)an酸(suan)還(hai)原(yuan)磷(lin)鉬(mu)酸(suan)化合物生(sheng)成鎢(wu)藍；在 680nm 有(you)特征吸(xi)收峰。

試劑(ji)組(zu)成和配(pei)置(zhi)：

試劑(ji)壹(yi)的(de)配(pei)制(zhi)：臨(lin)用(yong)前按(an)液體壹：液體二：蒸餾(liu)水(shui)=140（μl）：20（μl）：21（ml）的(de)比例(li)配(pei)制(zhi)，現配(pei)現用(yong)，如(ru)出現白(bai)色絮狀(zhuang)沈(chen)澱(dian)則不(bu)能用(yong)。

試劑(ji)二(er)：粉劑(ji)×1 瓶(ping)，4℃保(bao)存(cun)；臨(lin)用(yong)前加(jia)入 6ml 蒸餾(liu)水(shui)充分(fen)溶(rong)解待用(yong)；用(yong)不(bu)完(wan)的(de)試劑(ji) 4℃保(bao)存(cun)；

試劑(ji)三(san)：粉劑(ji)×1 瓶(ping)，4℃保(bao)存(cun)；臨(lin)用(yong)前加(jia)入 2ml 試劑(ji)七(qi)，沸水(shui)浴加(jia)熱(re)溶(rong)解，然(ran)後加(jia)入(ru) 8ml 試劑(ji)壹(yi)，充分(fen)混(hun)勻(yun)備(bei)用(yong)，用(yong)不(bu)完(wan)的(de)試劑(ji) 4℃保(bao)存(cun)；

試劑(ji)四：粉劑(ji)×1 瓶(ping)，4℃保(bao)存(cun)；臨(lin)用(yong)前加(jia)入 40ml 蒸餾(liu)水(shui)充分(fen)溶(rong)解待用(yong)；用(yong)不(bu)完(wan)的(de)試劑(ji) 4℃保(bao)存(cun)；試劑(ji)六(liu)：液體 1.5ml×1 支，0.05mg/ml 標(biao)準(zhun)酪(lao)an酸(suan)溶(rong)液，4℃保(bao)存(cun)；

自備(bei)儀(yi)器和用(yong)品：

可見(jian)分(fen)光光(guang)度計(ji)、水(shui)浴鍋(guo)、磁力(li)攪拌器、可調(tiao)式(shi)移液槍、1ml 玻璃比色(se)皿(min)、蒸餾(liu)水(shui)

樣品(pin)處(chu)理：

新鮮土樣(yang)自然(ran)風(feng)幹或 37 度烘(hong)箱(xiang)風(feng)幹，過(guo) 30~50 目篩。

測(ce)定(ding)步驟(zhou)：

1、試劑(ji)壹(yi)的(de)配(pei)制(zhi)：見(jian)試劑(ji)的(de)組(zu)成和配(pei)制(zhi)。

2、分光(guang)光(guang)度計(ji)預(yu)熱 30min 以(yi)上(shang)，調(tiao)節波長至 680nm，蒸餾(liu)水(shui)調(tiao)零。

3、樣本測(ce)定(ding)：

混勻(yun)後(hou)，40℃水(shui)浴 30min，振(zhen)蕩 5-6 次(ci)，使(shi)土樣(yang)與反應(ying)液充分(fen)接觸(chu)：混(hun)勻(yun)，8000g 25℃離(li)心(xin) 10min，取上(shang)清(qing)液，在EP 管(guan)中加(jia)入(ru)下(xia)列試劑(ji)

混勻(yun)，40℃水(shui)浴 20min，8000g 25℃離(li)心(xin) 10min，取上(shang)清(qing)液，680nm 下讀取各(ge)管(guan)吸(xi)光(guang)值A。

註意(yi)事(shi)項

標(biao)準(zhun)管(guan)只(zhi)需測(ce)壹(yi)次(ci)。每(mei)個(ge)測(ce)定(ding)管(guan)設(she)壹個(ge)對照管(guan)。

S-ACPT 活性計算(suan)：

單位定義：每(mei)天(tian)每(mei)g 土樣(yang)中產(chan)生(sheng) 1mg 酪(lao)an酸(suan)為壹個 S-ACPT 活力(li)單位。

S-ACPT(mg/d/g 土樣(yang))=C 標(biao)準(zhun)×(A 測(ce)定(ding)管(guan)-A 對照管(guan))÷A 標(biao)準(zhun)管(guan)×V 反總÷W÷T=24×(A 測(ce)定(ding)管(guan)-A 對照管(guan))÷A 標(biao)準(zhun)管(guan)

C 標(biao)準(zhun)管(guan)：標(biao)準(zhun)管(guan)濃(nong)度，0.05mg/ml；V 反總：反應(ying)體系(xi)總體積，0.4ml；T：反應(ying)時間(jian)，30min=1/48d；

W：樣本質(zhi)量，0.04g。

土壤(rang)酸(suan)性蛋白(bai)酶試劑(ji)盒(he)