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我的(de)位置:首(shou)頁 > 產品中(zhong)心(xin) > 生化(hua)試(shi)劑 > 抗氧系列(lie) > BD6025酪(lao)an酸解氨(an)酶(mei)試(shi)劑盒(he) 抗氧

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| 品牌(pai) | NobleRyder/諾博(bo)萊(lai)德(de) | 貨(huo)號(hao) | BD6025 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 100T/48S | 供貨(huo)周(zhou)期(qi) | 現貨(huo) |
| 主要用途(tu) | TAL 廣泛存在於植(zhi)物(wu)和微(wei)生物(wu)中(zhong),是(shi)苯(ben)丙(bing)an酸代(dai)謝(xie)途(tu)徑的(de)關(guan)鍵酶(mei)之壹 | 應(ying)用領(ling)域(yu) | 環保,化工(gong),生物(wu)產業,農林牧(mu)漁(yu),制藥(yao)/生物(wu)制藥(yao) |
酪(lao)an酸解氨(an)酶(mei)(Tyrosine ammonilyase,TAL)試(shi)劑盒(he)說明書(shu)
微(wei)量(liang)法(fa) 100T/48S
酪(lao)an酸解氨(an)酶(mei)試(shi)劑盒(he) 抗氧
正式(shi)測定前(qian)務(wu)必(bi)取 2-3 個預期(qi)差異(yi)較大的(de)樣(yang)本做預測定測(ce)定意義(yi)
TAL 廣泛存在於植(zhi)物(wu)和微(wei)生物(wu)中(zhong),是(shi)苯(ben)丙(bing)an酸代(dai)謝(xie)途(tu)徑的(de)關(guan)鍵酶(mei)之壹。TAL 能(neng)夠(gou)躍過(guo)肉桂酸-4-羥基化(hua)酶(C4H)直(zhi)接將酪(lao)an酸轉化(hua)為香dou酸,香dou酸可進壹步(bu)生成白藜(li)蘆(lu)醇(chun)、柚(you)皮素等具(ju)有(you)抗氧化(hua)、抗衰(shuai)老(lao)作用的(de)苯(ben)bing素類天(tian)然產物(wu)。
測定原(yuan)理(li):
TAL 能(neng)夠(gou)分解(jie)酪(lao)an酸產生香豆酸,使(shi)反(fan)應(ying)溶(rong)液 333nm 下的(de)吸光(guang)度(du)隨(sui)反(fan)應(ying)時(shi)間(jian)而(er)上(shang)升(sheng),根據(ju)吸(xi)光(guang)度(du)的(de)變化率(lv)可計算出 TAL 活(huo)性(xing)。
組成:
產品名稱(cheng) | BD6025-100T/48S | Storage |
提取(qu)液:液體(ti) | 100ml | 4℃ |
試(shi)劑壹:液體(ti) | 50ml | 4℃ |
試(shi)劑二:粉(fen)劑 | 2 瓶 | 4℃ |
試(shi)劑三:液體(ti) | 5ml | 4℃ |
說明書(shu) | 壹份(fen) | |
自備儀器和用品(pin):
酶標儀、臺式(shi)離心(xin)機、可調式(shi)移(yi)液器、96 孔(kong)板(ban)(UV 板(ban))、研(yan)缽、冰(bing)和蒸餾(liu)水(shui)
粗酶液提取(qu):
1、細菌(jun)、細胞(bao)或(huo)組織樣(yang)品的(de)制備(bei):
細菌(jun)或培(pei)養(yang)細胞(bao):先(xian)收(shou)集(ji)細菌(jun)或細胞(bao)到(dao)離心(xin)管內,離(li)心(xin)後棄上(shang)清;按照細菌(jun)或細胞(bao)數(shu)量(104 個(ge)):提取(qu)液體(ti)積(ml)為 500~1000:1 的(de)比例(建議 500 萬(wan)細菌(jun)或細胞(bao)加入 1ml 提取(qu)液),超聲波破碎(sui)細菌(jun)或細胞(bao)(冰(bing)浴(yu),功率(lv) 20%或 200W,超聲 3s,間(jian)隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離(li)心(xin) 10min,取上(shang)清,置冰(bing)上(shang)待(dai)測(ce)。
組織:按照組織質(zhi)量(liang)(g):提取(qu)液體(ti)積(ml)為 1:5~10 的(de)比例(建議稱(cheng)取(qu)約(yue) 0.1g 組織,加入 1ml 提取(qu)液),進行(xing)冰(bing)浴(yu)勻漿。8000g 4℃離(li)心(xin) 10min,取上(shang)清,置冰(bing)上(shang)待(dai)測(ce)。
2、血(xue)清(漿(jiang))果汁等液體(ti)樣(yang)品:直(zhi)接檢(jian)測(ce)。
測定操(cao)作(zuo)表:
1、酶標儀預熱(re) 30min 以上(shang),調(tiao)節(jie)波長至(zhi) 333nm。
2、準備 96 孔(kong) UV 板(ban)壹塊(kuai)(非普通酶(mei)標板(ban),普(pu)通酶(mei)標板(ban)只(zhi)能(neng)透過(guo)可見光(guang),不能(neng)透過(guo)紫外(wai)光(guang),檢測(ce)波長小於 340nm 務(wu)必(bi)使(shi)用 UV 板(ban))。
3、試(shi)劑二的(de)配置:臨(lin)用前(qian)在(zai)試(shi)劑二瓶中(zhong)加入 10ml 試(shi)劑壹充分(fen)溶(rong)解待(dai)用(用不(bu)完的(de)試(shi)劑 4℃保存壹周,註(zhu)意現配(pei)現用),在(zai) 37℃(哺乳動(dong)物(wu))或(huo) 25℃(其它(ta)物(wu)種(zhong))水(shui)浴 10min 以上(shang)。
4、在 EP 管中(zhong)依次(ci)加入如下試(shi)劑
試(shi)劑名稱(μl) | 測定管(guan) | 對照管(guan) |
樣(yang)本上(shang)清 | 40 | 40 |
試(shi)劑壹 | 360 | |
試(shi)劑二 | 360 | |
充分(fen)混(hun)勻,40℃保溫 60min | ||
試(shi)劑三 | 20 | 20 |
混勻,10000g 4℃離心(xin) 5min,取 200μl 上(shang)清至(zhi) 96 孔(kong) UV 板(ban),333nm 下(xia)測定吸(xi)光(guang)值 A 測(ce)定與 A 對(dui)照,
ΔA=A 測定-A 對(dui)照(zhao)
TAL 活性計(ji)算:
1、血(xue)清(漿(jiang))或(huo)果汁 TAL 活性
單位的(de)定義(yi):每(mei)分(fen)鐘每(mei) ml 血(xue)清(漿(jiang))或(huo)果汁在每(mei) ml 反(fan)應(ying)體(ti)系中(zhong)使(shi) 333nm 處(chu)吸(xi)光值變化
0.005 為壹個酶(mei)活(huo)力(li)單位。
TAL(U/ml)=ΔA×V 反(fan)總(zong)÷( V 樣(yang)÷V 樣(yang)總(zong))÷0.005÷T =35×ΔA
2、組織、細菌(jun)或細胞(bao) TAL 活性
按樣(yang)本蛋(dan)白濃(nong)度(du)計算:
單位定義(yi):每(mei)分(fen)鐘每(mei) mg 組織蛋(dan)白在(zai)每(mei) ml 反(fan)應(ying)體(ti)系中(zhong)使(shi) 333nm 處(chu)吸(xi)光值變化 0.005 為壹個酶(mei)活(huo)力(li)單位。
TAL(U/mg prot)=ΔA×V 反(fan)總(zong)÷(V 樣(yang)×Cpr)÷0.005÷T =35×ΔA÷Cpr
此法(fa)需要自行(xing)測(ce)定樣(yang)本蛋(dan)白質(zhi)濃(nong)度(du)。
按樣(yang)本鮮重計算:
單位定義(yi):每(mei)分(fen)鐘每(mei) g 組織在(zai)每(mei) ml 反(fan)應(ying)體(ti)系中(zhong)使(shi) 333nm 處(chu)吸(xi)光值變化 0.005 為壹個酶(mei)活(huo)力(li)單位。
TAL(U/g 鮮重)=ΔA×V 反(fan)總(zong)÷(W× V 樣(yang)÷V 樣(yang)總(zong))÷0.005÷T =35×ΔA÷W
按細菌(jun)或細胞(bao)密度(du)計算:
單位定義(yi):每(mei)分(fen)鐘每(mei) 1 萬(wan)個細菌(jun)或細胞(bao)在(zai)每(mei) ml 反(fan)應(ying)體(ti)系中(zhong)使(shi) 333nm 處(chu)吸(xi)光值變化 0.005 為壹個酶(mei)活(huo)力(li)單位。
TAL(U/104 cell)=ΔA×V 反(fan)總(zong)÷(500×V 樣(yang)÷V 樣(yang)總(zong))÷0.005÷T =0.07×ΔA
V 反(fan)總(zong):反(fan)應(ying)體(ti)系總(zong)體(ti)積,0.42ml;V 樣(yang):加入樣(yang)本體(ti)積,0.04ml;V 樣(yang)總(zong):加入提取(qu)液體(ti)積,1 ml; T:反(fan)應(ying)時(shi)間(jian),60 min;Cpr:樣(yang)本蛋(dan)白質(zhi)濃(nong)度(du),mg/ml;W:樣(yang)本質(zhi)量(liang),g;500:細胞(bao)或(huo)細菌(jun)總(zong)數(shu),500萬(wan)。
酪(lao)an酸解氨(an)酶(mei)試(shi)劑盒(he) 抗氧