多(duo)功(gong)能氧化(hua)酶又(you)稱(cheng)混合功能氧化(hua)酶，可產生降解反(fan)應(ying)，可(ke)使原(yuan)化學(xue)物(wu)質(zhi)變(bian)為(wei)低毒(du)的(de)或無(wu)毒(du)的(de)物(wu)質(zhi)從(cong)體(ti)內(nei)排(pai)出(chu)；還可(ke)產生激(ji)活(huo)反應，可(ke)使(shi)原(yuan)化學(xue)物(wu)質(zhi)轉(zhuan)化(hua)為具有(you)親(qin)電(dian)子(zi)性質(zhi)，導致(zhi)毒(du)性增(zeng)強(qiang)，成為致突變(bian)物(wu)或終致癌物(wu)。近(jin)年(nian)來(lai)對混(hun)合功(gong)能氧化(hua)酶系與外源性化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)相互作(zuo)用(yong)的(de)深入(ru)研(yan)究(jiu)，對(dui)於(yu)從分(fen)子(zi)生(sheng)物(wu)學(xue)水平(ping)上進壹步(bu)了(le)解外源性化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)的(de)毒(du)作(zuo)用具有(you)重(zhong)要意(yi)義(yi)。
多(duo)功(gong)能氧化(hua)酶試(shi)劑(ji)盒 抗(kang)氧

多(duo)功(gong)能氧化(hua)酶（(mixed function oxidase，MFO）試(shi)劑(ji)盒說(shuo)明書(shu)

微(wei)量(liang)法 100T/96S

多(duo)功(gong)能氧化(hua)酶試(shi)劑(ji)盒 抗(kang)氧

正(zheng)式測(ce)定前(qian)務(wu)必(bi)取 2-3 個預(yu)期(qi)差(cha)異(yi)較大的樣本做預(yu)測定測(ce)定意(yi)義(yi)：

多(duo)功(gong)能氧化(hua)酶又(you)稱(cheng)混合功能氧化(hua)酶，可產生降解反(fan)應(ying)，可(ke)使原(yuan)化學(xue)物(wu)質(zhi)變(bian)為(wei)低毒(du)的(de)或無(wu)毒(du)的(de)物(wu)質(zhi)從(cong)體(ti)內(nei)排(pai)出(chu)；還可(ke)產生激(ji)活(huo)反應，可(ke)使(shi)原(yuan)化學(xue)物(wu)質(zhi)轉(zhuan)化(hua)為具有(you)親(qin)電(dian)子(zi)性質(zhi)，導致(zhi)毒(du)性增(zeng)強(qiang)，成為致突變(bian)物(wu)或終致癌物(wu)。近(jin)年(nian)來(lai)對混(hun)合功(gong)能氧化(hua)酶系與外源性化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)相互作(zuo)用(yong)的(de)深入(ru)研(yan)究(jiu)，對(dui)於(yu)從分(fen)子(zi)生(sheng)物(wu)學(xue)水平(ping)上進壹步(bu)了(le)解外源性化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)的(de)毒(du)作(zuo)用具有(you)重(zhong)要意(yi)義(yi)。

測定(ding)原(yuan)理：

MFO 催化(hua)對(dui)硝(xiao)基(ji)苯(ben)甲(jia)醚產生對硝(xiao)基(ji)ben酚(fen)，在 400nm 下有(you)特(te)征吸光值(zhi)。

組成：

試(shi)劑(ji)二：粉劑(ji)×3 管，-20℃保(bao)存(cun)；臨(lin)用前(qian)取壹管(guan)加(jia)入(ru) 1.5ml 水(shui)溶解(jie)，現配(pei)現用(yong)。

自備儀(yi)器(qi)和用品(pin)：

酶標儀(yi)、臺(tai)式離(li)心機(ji)、可調式移(yi)液(ye)器(qi)、96 孔板(ban)、研(yan)缽、冰(bing)、蒸餾水、氯(lv)仿。

粗酶液(ye)提(ti)取：

按照(zhao)組(zu)織(zhi)質(zhi)量(liang)（g）：提取液(ye)（ml)為(wei) 1：5~10 的比例(li)（建(jian)議(yi)稱取約 0.1g 組(zu)織(zhi)，加(jia)入(ru) 1ml 提(ti)取液(ye)），進(jin)行冰(bing)浴(yu)勻(yun)漿(jiang)。12000g 4℃離(li)心 20min，取上清，置冰(bing)上待(dai)測。

測定(ding)步(bu)驟(zhou)：

1、酶標儀(yi)預(yu)熱 30min 以上，調節(jie)波(bo)長至 400nm。

2、在EP 管(guan)中(zhong)依(yi)次加(jia)入(ru)如(ru)下試(shi)劑(ji)

分別(bie)加(jia)入(ru) 1000μl 氯(lv)仿，充分混(hun)勻(yun)萃取，靜(jing)置 10min，取下層氯(lv)仿層 0.6ml 至新(xin)的EP 管中(zhong)。再(zai)加(jia)入(ru)試(shi)劑(ji)四 0.6ml，充(chong)分混(hun)勻(yun)萃取，取上層水相 0.2ml 於(yu) 96 孔板(ban)中(zhong)，400nm 下測定吸光值(zhi)A 測定(ding)與A 空白(bai)，△A=A 測(ce)定-A 空白(bai)。空白(bai)管(guan)只需(xu)測壹管(guan)。

MFO 活性計算:

標準(zhun)曲(qu)線(xian)：y = 0.0119x + 0.0021，R2 = 0.9997；y，吸光度(du)；x,標準(zhun)品濃(nong)度(du)，單(dan)位(wei)nmol/ml。

按樣本質(zhi)量(liang)計算

單位(wei)定義(yi)：每(mei)g 樣本每(mei)分鐘(zhong)產生 1nmol 對硝(xiao)基(ji)ben酚(fen)定義(yi)為壹個(ge)酶活力(li)單位(wei)。

MFO（nmol/min/g 鮮重(zhong)）=（△A-0.0021）÷0.0119×V 總(zong)÷(V 樣÷V 樣總(zong)×W)÷T

=8.4×（△A-0.0021）÷W

按樣本蛋(dan)白濃(nong)度(du)計算

單位(wei)定義(yi)：每(mei)mg 組織(zhi)蛋(dan)白每(mei)分鐘(zhong)產生 1nmol 對硝(xiao)基(ji)ben酚(fen)定義(yi)為壹個(ge)酶活力(li)單位(wei)。

MFO（nmol/min/mg prot）=（△A-0.0021）÷0.0119×V 總(zong)÷(V 樣×Cpr)÷T

=8.4×（△A-0.0021）÷Cpr

V 總(zong)：最終萃取液(ye)體(ti)積(ji)，0.6 ml；V 樣：反應中(zhong)樣品體(ti)積(ji)，200μl；T：反應時(shi)間，30min；W：樣品質(zhi)量(liang)，

g；Cpr：樣本蛋(dan)白濃(nong)度(du)，mg/ml。

多(duo)功(gong)能氧化(hua)酶試(shi)劑(ji)盒 抗(kang)氧