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| 品(pin)牌 | NobleRyder/諾博萊(lai)德(de) | 貨(huo)號(hao) | BO6001 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格(ge) | 50T/24S | 供(gong)貨(huo)周(zhou)期(qi) | 現(xian)貨(huo) |
| 主要用途(tu) | 利用靛(dian)酚藍(lan)比(bi)色(se)法測定(ding)脲(niao)酶(mei)水解尿素產(chan)生(sheng)的(de) NH3-N | 應用領(ling)域(yu) | 環保(bao),化(hua)工,生(sheng)物產(chan)業(ye),農(nong)林牧(mu)漁(yu),制(zhi)藥(yao)/生(sheng)物制(zhi)藥(yao) |
土壤(rang)脲(niao)酶（Solid-Urease，S-UE）測定(ding)試(shi)劑盒(he)說明(ming)書
分(fen)光(guang)光(guang)度法 50 管/24 樣(yang)
土壤(rang)脲(niao)酶測定(ding)試(shi)劑盒(he)
正(zheng)式(shi)測定(ding)前(qian)務(wu)必取(qu) 2-3 個預(yu)期(qi)差異較(jiao)大的(de)樣(yang)本做預測定(ding)測定(ding)意(yi)義：
S-UE 能(neng)夠水(shui)解尿素，產(chan)生(sheng)氨和碳(tan)酸。土(tu)壤脲(niao)酶活(huo)性(xing)與土壤(rang)的(de)微(wei)生物數(shu)量(liang)、有(you)機物質(zhi)含(han)量(liang)、全(quan)氮和速(su)效(xiao)氮(dan)含(han)量(liang)呈(cheng)正(zheng)相(xiang)關。土壤(rang)脲酶活性(xing)反應了土壤的(de)氮素狀況(kuang)。
測定(ding)原(yuan)理(li)：
利用靛(dian)酚藍(lan)比(bi)色(se)法測定(ding)脲(niao)酶(mei)水解尿素產(chan)生(sheng)的(de) NH3-N。
試劑的(de)組(zu)成(cheng)和配制(zhi)：
產(chan)品(pin)名(ming)稱 | BO6001-50T/24S | Storage |
試劑壹：甲苯 | 10ml(自備(bei)） | 4℃ |
試劑二(er)：粉(fen)劑 | 1 瓶 | -4℃ |
試劑三(san)：液體 | 65ml | 4℃ |
試劑四(si)：A 液 | 1ml | 4℃ |
試劑四(si)：B 液 | 4ml | 4℃ |
試劑五：液(ye)體 | 5ml | 4℃ |
說明(ming)書 | 壹份 | |
試劑二(er)：粉(fen)劑×1 瓶(ping)，臨用前(qian)加(jia)入(ru) 20ml 蒸(zheng)餾水，充(chong)分(fen)溶解待(dai)用(yong)，4℃保存(cun)；用不完(wan)的(de)試劑 4℃保(bao)存(cun)；試劑四(si)A 液(ye)：液(ye)體 1ml×1 瓶，4℃保存(cun)；試(shi)劑四(si)B 液(ye)：液(ye)體 4ml×1 瓶，4℃保存(cun)；臨用前(qian)將(jiang)A 液(ye)倒入(ru)B 液中(zhong)混合(he)，待(dai)用(yong)；用不(bu)完(wan)的(de)試劑 4℃保(bao)存(cun)壹周(zhou)。
自備(bei)儀器和用(yong)品(pin)：
可見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度計、臺(tai)式(shi)離心機、可調式(shi)移液器、1 ml 玻(bo)璃比(bi)色(se)皿、研缽(bo)、冰和蒸(zheng)餾水。
樣(yang)品(pin)處理(li)：
新鮮土樣(yang)自然風幹(gan)或(huo) 37 度烘箱(xiang)風幹(gan)，過(guo) 30~50 目篩。
測定(ding)步(bu)驟(zhou)：
1、培養(yang)
測定(ding)管(guan) | 對照管(guan) | |||||||
風幹(gan)土(tu)樣(yang)(g) | 0.25 | 0.25 | ||||||
試劑壹（μl） | 125 | 125 | ||||||
振蕩(dang)混勻(yun)，室溫(wen)放(fang)置(zhi) 15min | ||||||||
試劑二(er)（μl） | 625 | |||||||
蒸(zheng)餾水（μl） | 625 | |||||||
試劑三(san)（μl） | 1250 | 1250 | ||||||
混勻(yun)，放(fang)入(ru) 37℃水浴(yu)培(pei)養(yang) 24h 後(hou)，10000g 25℃離心 10min，取(qu)上(shang)清液(ye)。 | ||||||||
2、將(jiang)培(pei)養(yang)結(jie)束(shu)的(de)上(shang)清液(ye)稀(xi)釋(shi) 10 倍(bei)（取(qu) 0.1ml 上(shang)清液(ye)，加入(ru) 0.9ml 蒸(zheng)餾水）。
3、測氨量(liang)：
測定(ding)管(guan) | 對照管(guan) | |
稀(xi)釋(shi)後(hou)的(de)上(shang)清液(ye)（μl） | 400 | 400 |
試劑四(si)（μl） | 80 | 80 |
試劑五（μl） | 60 | 60 |
充分(fen)混勻(yun)，室溫(wen)放(fang)置(zhi) 20min | ||
蒸(zheng)餾水（μl） | 460 | 460 |
混勻(yun)， 578nm 處蒸(zheng)餾水調零(ling)，測A 值(zhi)，ΔA=A 測定(ding)管(guan)-A 對(dui)照管(guan)。每個(ge)測定(ding)管(guan)設(she)壹個對照管(guan)。
脲酶(mei)活(huo)力(li)計(ji)算(suan)：
標準(zhun)條(tiao)件(jian)下(xia)測定(ding)的(de)回歸(gui)方程為y = 0.0915x +0.0373；x 為(wei)標準(zhun)品(pin)濃度（μg/ml），y 為吸光(guang)值(zhi)。單(dan)位(wei)的(de)定(ding)義：每天(tian)每 g 土(tu)樣(yang)中產(chan)生(sheng) 1μg NH3-N 定(ding)義為壹個酶活(huo)力(li)單(dan)位(wei)。
脲酶(mei)活(huo)力(li)（μg/d /g 土(tu)樣(yang)）＝(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反總(zong)÷W÷T =874×(ΔA -0.0373)
10：稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)；T：反應時間，1d； V 反總(zong)：反應體系總(zong)體積(ji)：2ml；W：樣(yang)本質(zhi)量(liang)，0.25g。
土壤(rang)脲(niao)酶測定(ding)試(shi)劑盒(he)