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我(wo)的(de)位(wei)置(zhi)：首(shou)頁(ye) > 產品中(zhong)心 > 生(sheng)化(hua)試(shi)劑 > 土(tu)壤系(xi)列 > BO6037土壤谷(gu)an酰(xian)胺(an)酶(mei)活(huo)性(xing)測定試(shi)劑盒(he)
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| 品牌(pai) | NobleRyder/諾博萊(lai)德(de) | 貨(huo)號(hao) | BO6037 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格 | 100T/96S | 供(gong)貨(huo)周(zhou)期 | 現(xian)貨(huo) |
| 主要用(yong)途 | S-GLS 催化谷(gu)an酰(xian)胺(an)水解成 L-谷氨酸(suan)和氨,利(li)用(yong)奈(nai)氏(shi)試(shi)劑檢(jian)測氨增(zeng)加(jia)的(de)速(su)率 | 應用(yong)領域 | 環(huan)保,化(hua)工,生(sheng)物產業,農(nong)林牧(mu)漁,制(zhi)藥/生(sheng)物制(zhi)藥 |
土(tu)壤谷(gu)an酰(xian)胺(an)酶(mei)(solid-glutaminase, S- GLS) 活(huo)性測定試(shi)劑盒(he)說(shuo)明(ming)書
微(wei)量法(fa) 100 管(guan)/96 樣
土(tu)壤谷(gu)an酰(xian)胺(an)酶(mei)活(huo)性(xing)測定試(shi)劑盒(he)
正式測定前(qian)務必(bi)取(qu) 2-3 個(ge)預期差(cha)異較大(da)的(de)樣本做預測定測定意義(yi)：
GLS（EC 3.5.1.2）存(cun)在(zai)於(yu)高(gao)等動物和(he)某(mou)些(xie)細(xi)菌(jun)以及植物根(gen)中(zhong)，催化谷(gu)an酰(xian)胺(an)水解成谷an酸和(he)氨，在(zai)氮素代(dai)謝(xie)中(zhong)具有重要(yao)調控(kong)作用(yong)，尤(you)其(qi)是(shi)調(tiao)節遊離(li)氨含(han)量(liang)和(he)尿素代(dai)謝(xie)。
測定原(yuan)理(li)：
S-GLS 催化谷(gu)an酰(xian)胺(an)水解成L-谷an酸和(he)氨，利用(yong)奈(nai)氏(shi)試(shi)劑檢(jian)測氨增(zeng)加(jia)的(de)速(su)率，即可計(ji)算(suan)其酶(mei)活(huo)性(xing)。
試(shi)劑組(zu)成和配制(zhi)：
產品名(ming)稱(cheng) | BO6037-100T/96S | Storage |
試(shi)劑壹(yi)：液(ye)體 | 15ml | 4℃ |
試(shi)劑二：液體 | 40ml | 4℃ |
試(shi)劑三(san)：液體 | 60ml | 常(chang)溫(wen) |
試(shi)劑四(si)：液體 | 5ml | 常(chang)溫(wen) |
試(shi)劑五(wu)：液(ye)體 | 3ml | 常(chang)溫(wen) |
試(shi)劑六(liu)：液體 | 3ml | 常(chang)溫(wen)避(bi)光(guang) |
說(shuo)明(ming)書 | 壹(yi)份 | |
自(zi)備儀(yi)器(qi)和用(yong)品：
臺(tai)式離(li)心機、可(ke)見(jian)分光(guang)光(guang)度(du)計/酶(mei)標(biao)儀(yi)、微(wei)量石英(ying)比色皿(min)/96 孔(kong)板(ban)、可調(tiao)式移(yi)液(ye)槍、研(yan)缽(bo)、甲(jia)苯、冰(bing)和雙(shuang)蒸水。
測定步(bu)驟：
1、分光(guang)光(guang)度(du)計或酶(mei)標(biao)儀(yi)預(yu)熱 30min 以(yi)上，調節波長至 420nm，蒸(zheng)餾(liu)水調零。
2、樣品測定（在(zai) EP 管(guan)中(zhong)加(jia)入下列試(shi)劑）；
試(shi)劑名(ming)稱(cheng)（μl） | 測定管(guan) | 對(dui)照管(guan) |
樣本 | 0.1 | |
甲(jia)苯 | 25 | 25 |
振蕩(dang)混(hun)勻，室溫(wen)放(fang)置(zhi) 15min
試(shi)劑壹(yi) | 100 | 100 |
試(shi)劑二 | 400 | 400 |
混(hun)勻，37℃水浴(yu) 2 小(xiao)時
試(shi)劑三(san) | 525 | 525 |
混(hun)勻，8000 g，25℃離(li)心 10 min；取(qu)上清液，依(yi)次加(jia)入下列試(shi)劑
上清液 | 130 | 130 |
試(shi)劑四(si) | 30 | 30 |
試(shi)劑五(wu) | 20 | 20 |
試(shi)劑六(liu) | 20 | 20 |
註(zhu)意事(shi)項：
混(hun)勻，室溫(wen)靜(jing)置(zhi) 15min，420nm 處(chu)讀取測定管(guan)和(he)對(dui)照管吸光(guang)值，計(ji)算ΔA=A 測定管(guan)-A 對(dui)照(zhao)管。對照(zhao)管只要做壹(yi)管(guan)。
試(shi)劑六(liu)如出(chu)現沈澱，靜置(zhi)後取上清使(shi)用(yong)。
酶(mei)活(huo)性(xing)計(ji)算：
用(yong)微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比色皿(min)測定的(de)計(ji)算公(gong)式如下(xia)
標(biao)準條(tiao)件(jian)下(xia)測定的(de)回(hui)歸方程(cheng)為y = 3.8488x+0.0057；x 為標(biao)準品濃(nong)度(du)（μmol/ml），y 為吸光(guang)值A。單(dan)位定義(yi)：每(mei) g 土(tu)樣每(mei)min 催化谷(gu)an酰(xian)胺(an)生(sheng)成(cheng) 1nmol 氨(an)定義(yi)為壹(yi)個(ge)酶(mei)活(huo)力單位(wei)。
S-GLS（nmol/min/g 土(tu)樣）＝(ΔA-0.0057)÷3.8488×V 反總÷W÷T=2.27×(ΔA -0.0057)÷W。
V 反總：反應體系總體積：1.05ml；T：反應時(shi)間(jian)，2h=120min；W：樣本質(zhi)量，g; 1000，μmol 到(dao)nmol 換(huan)算系(xi)數。
用(yong) 96 孔(kong)板(ban)測定的(de)計(ji)算公(gong)式如下(xia)
標(biao)準條(tiao)件(jian)下(xia)測定的(de)回(hui)歸方程(cheng)為y = 1.9244x+0.0057；x 為標(biao)準品濃(nong)度(du)（μmol/ml），y 為吸光(guang)值A。單(dan)位定義(yi)：每(mei) g 土(tu)樣每(mei)min 催化谷(gu)an酰(xian)胺(an)生(sheng)成(cheng) 1nmol 氨(an)定義(yi)為壹(yi)個(ge)酶(mei)活(huo)力單位(wei)。
S-GLS（nmol/min/g 土(tu)樣）＝(ΔA-0.0057)÷1.9244×V 反總÷W÷T=4.55×(ΔA -0.0057)÷W。
V 反總：反應體系總體積：0.525ml；T：反應時(shi)間(jian)，2h=120min；W：樣本質(zhi)量，g; 1000，μmol 到(dao)nmol換算(suan)系數(shu)。
土(tu)壤谷(gu)an酰(xian)胺(an)酶(mei)活(huo)性(xing)測定試(shi)劑盒(he)