LPS 又(you)稱(cheng)甘油酯(zhi)水解(jie)酶，催化(hua)甘(gan)油三酯(zhi)水解(jie)生成(cheng)脂(zhi)肪酸(suan)和(he)甘油（或者甘油二酯(zhi)和單酯(zhi)）。LPS 廣(guang)泛的存(cun)在於各種(zhong)生(sheng)物(wu)中(zhong)。
土壤脂(zhi)肪酶活性(xing)試(shi)劑盒

土壤脂(zhi)肪酶（Solid-Lipase，S-LPS）活性(xing)試(shi)劑盒說(shuo)明(ming)書

微(wei)量(liang)法(fa) 100T/96S

土壤脂(zhi)肪酶活性(xing)試(shi)劑盒

正(zheng)式測定前(qian)務(wu)必(bi)取(qu) 2-3 個(ge)預(yu)期(qi)差異較大(da)的(de)樣(yang)本(ben)做預測定測定意義：

LPS 又稱(cheng)甘油酯(zhi)水解(jie)酶，催化(hua)甘(gan)油三酯(zhi)水解(jie)生成(cheng)脂(zhi)肪酸(suan)和(he)甘油（或者甘油二酯(zhi)和單酯(zhi)）。LPS 廣(guang)泛的存(cun)在於各種(zhong)生(sheng)物(wu)中(zhong)。

測定原理：

LPS 催化(hua)油酯(zhi)水解(jie)成脂(zhi)肪酸(suan)，利用(yong)銅(tong)皂(zao)法(fa)測定脂(zhi)肪酸(suan)生(sheng)成速(su)率，即(ji)可(ke)計(ji)算(suan) LPS 活性(xing)。

試(shi)劑組成(cheng)和(he)配制：

試(shi)劑二(er)：液(ye)體 10ml×1 瓶，4℃保(bao)存(cun)。每次使(shi)用(yong)前(qian)用(yong)震蕩(dang)混(hun)勻器(qi)劇烈(lie)震蕩(dang) 20min。

標(biao)準(zhun)品：液(ye)體 10 μl×1 瓶，10 µmol/ml 的(de)標(biao)準(zhun)溶(rong)液(ye)，4℃保存(cun)。臨(lin)用(yong)前(qian)加入(ru) 3.168 ml 甲(jia)苯，充分(fen)溶(rong)解(jie)。

自備(bei)儀(yi)器和(he)用品(pin)：

研缽、臺式離(li)心(xin)機(ji)、震蕩(dang)混(hun)勻器(qi)、可(ke)見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)/酶標(biao)儀(yi)、微(wei)量(liang)石英(ying)比(bi)色(se)皿(min)/96 孔(kong)板(ban)、可(ke)調(tiao)式移液(ye)槍、甲(jia)苯 80ml、冰(bing)和蒸(zheng)餾水。

樣(yang)本(ben)處理：

建議稱(cheng)取約 0.1g 土樣(yang)，加入(ru) 1ml 試(shi)劑壹進(jin)行(xing)冰(bing)浴勻漿(jiang)，再用(yong)回旋(xuan)式振蕩(dang)器(qi)振蕩(dang)提取 15min，4℃，4000g離(li)心(xin) 10min，取(qu)上(shang)清(qing)待(dai)測。

S-LPS 測定操作：

1、分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)/酶標(biao)儀(yi)預熱 30 min，調(tiao)節波(bo)長(chang)到(dao) 710 nm，蒸(zheng)餾水調(tiao)零(ling)。

2、試(shi)劑壹和試(shi)劑二(er)置於(yu) 37℃水浴預(yu)熱 30min。

3、在 1.5ml EP 管中(zhong)依次加入(ru)下(xia)列(lie)試(shi)劑；

37℃振蕩(dang)反(fan)應 10 min。

37℃振蕩(dang)反(fan)應 10 min 後(hou)，8000g，25℃，離(li)心(xin) 10min，取(qu)上(shang)清(qing)液(ye)

37℃振蕩(dang)反(fan)應 5 min 後(hou)，靜(jing)置 5min，取 200μl 上(shang)層(ceng)液(ye)加入(ru)微(wei)量(liang)石英(ying)比(bi)色(se)皿(min)/96 孔(kong)板(ban)，於 710nm 處測定吸光(guang)值。

註意(yi)事項(xiang):

空(kong)白管(guan)和(he)標(biao)準(zhun)管只需(xu)測定壹次。

S-LPS 活性(xing)計(ji)算(suan)公(gong)式：

活性(xing)單位(wei)定義：37℃中(zhong)每克土(tu)樣(yang)每分(fen)鐘水解(jie)橄欖(lan)油生成 1μmol 脂(zhi)肪酸(suan)為(wei)壹個(ge)酶活單位(wei)。

S-LPS (μmol/min/g 土樣(yang)) = [C 標(biao)準(zhun)品×(A 測定管-A 空(kong)白管(guan))÷（A 標(biao)準(zhun)管- A 空(kong)白管(guan)）]×V 反(fan)總(zong)÷（W×V樣(yang)÷V 樣(yang)總(zong)）÷T=16×[(A 測定管－A 空(kong)白管(guan))÷（A 標(biao)準(zhun)管- A 空(kong)白管(guan)）]÷W

C 標(biao)準(zhun)品：10 µmol/ml；V 反(fan)總(zong)：反(fan)應總體積(ji)，0.8ml；V 樣(yang)：反(fan)應中(zhong)加入(ru)樣(yang)本(ben)體積(ji)，0.05ml；V 樣(yang)總(zong)：加入(ru)提取液(ye)體積(ji)，1ml； W：樣(yang)本(ben)質(zhi)量(liang)，g；T：催化(hua)反(fan)應時(shi)間，10 min。

土壤脂(zhi)肪酶活性(xing)試(shi)劑盒