FDA 是(shi)壹種(zhong)無(wu)色化(hua)合(he)物，在介(jie)質中能被(bei)許多土(tu)壤酶(mei)所(suo)催(cui)化(hua)水解，並經(jing)脫(tuo)水反應，產(chan)生(sheng)酶(mei)解終產(chan)物熒(ying)光素，穩(wen)定不易被(bei)分(fen)解，並在 490nm 處(chu)有強(qiang)吸(xi)收(shou)峰，通過(guo)檢(jian)測(ce) 490nm 處(chu)的(de)吸光(guang)值(zhi)變化(hua)可(ke)計(ji)算(suan)得 FDA 水解酶(mei)活(huo)性(xing)。
FDA 水解酶(mei)試(shi)劑盒 土(tu)壤系(xi)列(lie)

FDA 水解酶(mei)（Fluorescein diacetate，FDA）試(shi)劑盒說(shuo)明(ming)書(shu)

微(wei)量(liang)法 100T/48S

FDA 水解酶(mei)試(shi)劑盒 土(tu)壤系(xi)列(lie)

正(zheng)式測(ce)定前(qian)務必取(qu) 2-3 個預(yu)期差異較(jiao)大的(de)樣本做預(yu)測(ce)定測(ce)定意義(yi)：

FDA 水解反應能(neng)很好(hao)的(de)反應土(tu)壤中(zhong)微(wei)生(sheng)物活(huo)性(xing)和(he)土(tu)壤質量(liang)的(de)變化(hua)以及(ji)生(sheng)態系統中(zhong)有機質的(de)轉化(hua)，是(shi)土(tu)壤質量(liang)研究(jiu)中(zhong)的(de)重(zhong)要生(sheng)物學(xue)指(zhi)標之(zhi)壹。

測(ce)定原理(li)：

FDA 是(shi)壹種(zhong)無(wu)色化(hua)合(he)物，在介(jie)質中能被(bei)許多土(tu)壤酶(mei)所(suo)催(cui)化(hua)水解，並經(jing)脫(tuo)水反應，產(chan)生(sheng)酶(mei)解終產(chan)物熒(ying)光素，穩(wen)定不易被(bei)分(fen)解，並在 490nm 處(chu)有強(qiang)吸(xi)收(shou)峰，通過(guo)檢(jian)測(ce) 490nm 處(chu)的(de)吸光(guang)值(zhi)變化(hua)可(ke)計(ji)算(suan)得 FDA 水解酶(mei)活(huo)性(xing)。

試(shi)劑組成(cheng)和(he)配(pei)制：

試(shi)劑二：粉(fen)劑 1 瓶(ping)，-20℃避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)，臨用前(qian)加(jia) 4ml 試(shi)劑三溶解。

自備儀(yi)器(qi)和(he)用品(pin)：

天(tian)平(ping)、低溫(wen)離心(xin)機、可(ke)見(jian)分(fen)光光度計(ji)/酶(mei)標(biao)儀(yi)、微量(liang)石(shi)英比(bi)色皿/96 孔(kong)板(ban)、恒溫(wen)水浴鍋(guo)

樣(yang)本處(chu)理(li)：

稱(cheng)取(qu)風幹過(guo) 30-50 目篩土(tu)壤約(yue) 0.1g，備用。

測(ce)定操(cao)作(zuo)表：

充(chong)分(fen)混勻，30℃，震蕩(dang) 1h

10000g，25℃，離(li)心(xin) 5min，取(qu) 200μl 上(shang)清(qing)於微(wei)量(liang)石(shi)英比(bi)色皿/96 孔(kong)板(ban)中測(ce)定 490nm 處(chu)吸光(guang)值(zhi)A，△A1=A標(biao)準(zhun)管(guan)-A 空(kong)白管(guan)，△A2=A 測(ce)定管(guan)-A 對(dui)照管(guan)。註意：空白(bai)管(guan)和(he)標(biao)準(zhun)管(guan)只需測(ce)定壹次。

酶(mei)活(huo)性(xing)計(ji)算(suan)公式：

用微量(liang)石(shi)英比(bi)色皿測(ce)定的(de)計(ji)算(suan)公式如下(xia)

酶(mei)活(huo)性(xing)定義(yi)：每(mei)克土(tu)壤每(mei)天(tian)產(chan)生(sheng) 1μmol 熒(ying)光素的(de)量(liang)為壹個酶(mei)活(huo)力(li)單(dan)位(wei)。

FDA 活(huo)性(xing)（μmol/d/g）=（△A2÷△A1×C 標(biao)準(zhun)品(pin)）×V 反(fan)總÷W

= 0.96×（△A2÷△A1）÷W

用 96 孔(kong)板(ban)測(ce)定的(de)計(ji)算(suan)公式如下(xia)

酶(mei)活(huo)性(xing)定義(yi)：每(mei)克土(tu)壤每(mei)天(tian)產(chan)生(sheng) 1μmol 熒(ying)光素的(de)量(liang)為壹個酶(mei)活(huo)力(li)單(dan)位(wei)。

FDA 活(huo)性(xing)（μmol/d/g）=（△A2÷△A1×C 標(biao)準(zhun)品(pin)）×V 反(fan)總÷W

= 0.96×（△A2÷△A1）÷W

C 標(biao)準(zhun)品(pin)：標(biao)準(zhun)品(pin)濃(nong)度 100μmol/L；V 反(fan)總：反(fan)應總體(ti)積，0.4ml；W：樣(yang)本質量(liang)，g

註意事(shi)項:

1、盡(jin)量(liang)采(cai)用新鮮(xian)土(tu)樣或者短期低溫(wen)保存(cun)樣品(pin)，否(fou)則很難準(zhun)確反(fan)映(ying)酶(mei)的(de)活(huo)性(xing)。

2、測(ce)定之(zhi)前(qian)進(jin)行(xing)預(yu)實驗，若吸光(guang)值(zhi)較(jiao)高(gao)，請(qing)進(jin)行(xing)適當的(de)稀釋(shi)再測(ce)定，並在計(ji)算(suan)公式中乘(cheng)以稀釋倍(bei)數。

FDA 水解酶(mei)試(shi)劑盒 土(tu)壤系(xi)列(lie)