漆酶（Laccase）是(shi)壹(yi)種含(han)銅的多(duo)酚(fen)氧(yang)化酶，屬(shu)於(yu)銅藍氧(yang)化酶家(jia)族(zu)，廣(guang)泛分布(bu)於(yu)真菌和(he)高(gao)等植(zhi)物(wu)中(zhong)，具有較(jiao)強的(de)氧(yang)化還原能力，在(zai)紙(zhi)漿(jiang)生(sheng)物(wu)漂(piao)白(bai)，環境(jing)汙染(ran)物降(jiang)解(jie)和(he)木(mu)質(zhi)纖維(wei)素(su)降(jiang)解(jie)以及(ji)生物(wu)檢(jian)測方(fang)面(mian)有非(fei)常廣泛的應(ying)用(yong)。
土壤漆酶試(shi)劑盒 土壤系(xi)列(lie)

土壤漆酶（Soil Laccase，SL）試(shi)劑盒說(shuo)明(ming)書

微量法 100T/48S

土壤漆酶試(shi)劑盒 土壤系(xi)列(lie)

正式測(ce)定前(qian)務必取(qu) 2-3 個預期差異(yi)較(jiao)大的(de)樣本做(zuo)預測定測(ce)定意義：

漆(qi)酶（Laccase）是(shi)壹(yi)種含(han)銅的多(duo)酚(fen)氧(yang)化酶，屬(shu)於(yu)銅藍氧(yang)化酶家(jia)族(zu)，廣(guang)泛分布(bu)於(yu)真菌和(he)高(gao)等植(zhi)物(wu)中(zhong)，具有較(jiao)強的(de)氧(yang)化還原能力，在(zai)紙(zhi)漿(jiang)生(sheng)物(wu)漂(piao)白(bai)，環境(jing)汙染(ran)物降(jiang)解(jie)和(he)木(mu)質(zhi)纖維(wei)素(su)降(jiang)解(jie)以及(ji)生物(wu)檢(jian)測方(fang)面(mian)有非(fei)常廣泛的應(ying)用(yong)。

測(ce)定原理(li)：

漆(qi)酶分解底物ABTS 產生(sheng)ABTS 自(zi)由(you)基，在(zai) 420nm 處(chu)的(de)吸光(guang)系(xi)數(shu)遠(yuan)大(da)於底物ABTS，測(ce)定 ABTS 自(zi)由(you)基的增(zeng)加(jia)速(su)率，可計算(suan)得(de)漆酶活性。

試(shi)劑組成(cheng)和(he)配制：

工(gong)作(zuo)液(ye)：粉劑×2 瓶(ping)，4℃避(bi)光保(bao)存，臨(lin)用(yong)前每(mei)瓶(ping)加(jia) 10ml 試(shi)劑壹溶(rong)解(jie)。

自(zi)備(bei)儀器和(he)用(yong)品：

天(tian)平(ping)、低溫離心機、可見分光光(guang)度計/酶標(biao)儀、微量石英(ying)比色(se)皿(min)/96 孔板(ban)、震(zhen)蕩儀。

樣品處(chu)理(li)：

新(xin)鮮(xian)土樣風幹(gan)，過(guo) 30-50 目篩。

測(ce)定步(bu)驟：

1、可(ke)見分光光(guang)度計/酶標(biao)儀預(yu)熱(re) 30min，調(tiao)節(jie)波(bo)長(chang)到 420nm，蒸餾(liu)水(shui)調零。

37℃震(zhen)蕩反(fan)應 10min，冰(bing)浴 5min，10000g，4℃離心 5min，分別取上(shang)清 200μl 於 420nm 處(chu)測(ce)定吸(xi)光值，記(ji)為記(ji)為A 對照(zhao)和A 測(ce)定。△A=A 測(ce)定-A 對照(zhao)。

酶活性計算(suan)公式：

用(yong)微量石英(ying)比色(se)皿(min)測(ce)定的(de)計算(suan)公式如(ru)下

酶活性定義：每(mei)克(ke)土壤每分鐘氧(yang)化 1nmol 底物ABTS 所需(xu)的酶量為壹(yi)個酶活力單位（U）。

SL 活性（nmol/min /g 土樣）=

A

 d

×V 反(fan)總÷W÷T= 0.694×△A÷W

ε：ABTS 毫摩爾消(xiao)光系(xi)數(shu)：36L/mmol/cm；d：比(bi)色(se)皿(min)光(guang)徑，1cm；V 反(fan)總：反(fan)應總(zong)體積(ji)，0.25ml；W：樣本質(zhi)量，g；T：反(fan)應時(shi)間，10min

用(yong) 96 孔板(ban)測(ce)定的(de)計算(suan)公式如(ru)下

酶活性定義：每(mei)克(ke)土壤每分鐘氧(yang)化 1nmol 底物ABTS 所需(xu)的酶量為壹(yi)個酶活力單位（U）。

SL 活性（nmol/min /g 土樣）=

A

 d

×V 反(fan)總÷W÷T= 1.388×△A÷W

ε：ABTS 毫摩爾消(xiao)光系(xi)數(shu)：36L/mmol/cm；d：比(bi)色(se)皿(min)光(guang)徑，0.5cm；V 反(fan)總：反(fan)應總(zong)體積(ji)，0.25ml；

W：樣本質(zhi)量，g；T：反(fan)應時(shi)間，10min

註(zhu)意事(shi)項(xiang)：

1、工(gong)作(zuo)液(ye)需(xu)臨(lin)用(yong)前配制，並(bing)且(qie)盡快(kuai)使用(yong)，4℃保(bao)存壹(yi)周(zhou)，若(ruo)變(bian)色(se)則不能(neng)使用(yong)。

2、測(ce)定之前進(jin)行(xing)預實(shi)驗，若(ruo)吸光(guang)值較(jiao)高(gao)，請將(jiang)樣品用(yong)提取(qu)液(ye)進(jin)行(xing)適當的稀釋再測定，並(bing)在(zai)計算(suan)公式中(zhong)乘(cheng)以稀釋倍(bei)數(shu)。

土壤漆酶試(shi)劑盒 土壤系(xi)列(lie)