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| 品(pin)牌(pai) | NobleRyder/諾(nuo)博萊德(de) | 貨號 | BO6059 |
|---|---|---|---|
| 規格(ge) | 100T/48S | 供(gong)貨周期(qi) | 現貨 |
| 主要用(yong)途(tu) | 具有抵禦(yu)真菌侵染(ran)的(de)作(zuo)用(yong),成為抗真(zhen)菌病害(hai)的(de)研究熱點(dian) | 應用(yong)領(ling)域(yu) | 環(huan)保(bao),化(hua)工(gong),生(sheng)物(wu)產(chan)業,農(nong)林(lin)牧(mu)漁(yu),制藥/生(sheng)物(wu)制藥 |
土(tu)壤幾丁質酶(mei)（Soil Chitinase，S-Chitinase）試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)書
微(wei)量(liang)法 100T/48S
土(tu)壤幾丁質酶(mei)試(shi)劑(ji)盒(he)-常備(bei)現貨
正(zheng)式(shi)測定(ding)前務(wu)必取 2-3 個(ge)預(yu)期(qi)差(cha)異(yi)較(jiao)大(da)的(de)樣(yang)本(ben)做(zuo)預測定(ding)測定(ding)意(yi)義(yi)：
幾丁質主要存(cun)在於(yu)蝦(xia)、蟹(xie)、昆蟲(chong)等甲(jia)殼類動物(wu)的(de)外(wai)殼與軟(ruan)體動物(wu)的(de)器(qi)官(guan)(例(li)如烏賊(zei)的(de)軟(ruan)骨(gu))，以及(ji)真菌類(lei)的(de)細(xi)胞(bao)壁中，而幾丁質酶(mei)(EC 3.2.1.14)可(ke)催化(hua)幾丁質水(shui)解(jie)，具有抵禦(yu)真菌侵染(ran)的(de)作(zuo)用(yong)，成為抗真(zhen)菌病害(hai)的(de)研究熱點(dian)。
測定(ding)原理：
幾丁質酶(mei)水(shui)解幾丁質產(chan)生(sheng)N-乙(yi)酰(xian)氨(an)基葡(pu)萄糖(tang)，進(jin)壹步與對(dui)二甲(jia)氨基苯(ben)甲(jia)醛(quan)產(chan)生(sheng)紅色化(hua)合物(wu)，在 585nm處(chu)有特征(zheng)吸(xi)收峰，吸光(guang)值增加速率(lv)反(fan)映了幾丁質酶(mei)的(de)活性(xing)。
試(shi)劑(ji)組(zu)成和配制：
產(chan)品(pin)名(ming)稱 | BO6059-100T/48S | Storage |
試(shi)劑(ji)壹(yi)：液體 | 10ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)二：液體 | 4ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)三(san)：液體 | 65ml | 4℃避(bi)光(guang) |
說(shuo)明(ming)書 | 壹(yi)份(fen) | |
自(zi)備(bei)儀(yi)器和(he)用(yong)品：
天(tian)平(ping)、水浴(yu)鍋、離(li)心機(ji)、震(zhen)蕩(dang)儀(yi)、可(ke)見分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)/酶標儀(yi)、微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比(bi)色皿/96 孔板，甲(jia)苯、蒸(zheng)餾水(shui)。
樣(yang)品(pin)處(chu)理：
新(xin)鮮土(tu)樣風(feng)幹，過(guo) 30-50 目(mu)篩(shai)。
測定(ding)操作表(biao)：
對(dui)照(zhao)管(guan) | 測定(ding)管(guan) | |||||||
土(tu)樣（g） | 0.1 | 0.1 | ||||||
甲(jia)苯（μl） | 15 | 15 | ||||||
混勻，25℃靜(jing)置 15min | ||||||||
蒸(zheng)餾水(shui)（μl） | 100 | |||||||
試(shi)劑(ji)壹(yi)（μl） | 100 | |||||||
混勻，37℃培(pei)養 24h | ||||||||
蒸(zheng)餾水(shui)（μl） | 200 | 200 | ||||||
4000rpm，4℃，離(li)心(xin) 10min，取上(shang)清(qing) 200μl 於(yu)新(xin)的(de)EP 管(guan)中(zhong) | ||||||||
試(shi)劑(ji)二（μl） | 20 | 20 | ||||||
混勻，沸(fei)水(shui)浴(yu) 5min | ||||||||
試(shi)劑(ji)三(san)（μl） | 600 | 600 | ||||||
混勻，37℃顯(xian)色 20min，取 200μl 於(yu)微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比(bi)色皿/96 孔板中，蒸餾水(shui)調零(ling)，測定(ding) 585nm 處(chu)吸光(guang)值，記為(wei)A 對(dui)照(zhao)管(guan)和(he)A 測定(ding)管(guan)，ΔA=A 測定(ding)管(guan)-A 對(dui)照(zhao)管(guan)。 | ||||||||
計(ji)算公式(shi)：
用(yong)微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比(bi)色皿測定(ding)的(de)計(ji)算公式(shi)如下
標準曲(qu)線(xian)：y=5.2714x-0.0007，R2=0.9989；x 為(wei)標準品(pin)濃(nong)度(du)（mg/ml），y 為(wei)吸(xi)光(guang)值ΔA。
酶(mei)活性(xing)定(ding)義(yi)：37℃條件(jian)下，每(mei)克(ke)土(tu)壤每(mei)天(tian)分(fen)解(jie)幾丁質產(chan)生(sheng) 1μg N-乙酰(xian)氨基葡(pu)萄糖(tang)的(de)酶(mei)量(liang)為(wei)壹(yi)個(ge)酶活性(xing)單位。
土(tu)壤幾丁質酶(mei)活性(xing)（μg/d/g 土(tu)樣）=（ΔA +0.0007）÷5.2714×V 反(fan)總÷W÷T×1000
= 598×（ΔA +0.0007）
V 反(fan)總：反(fan)應(ying)體系總體積，0.315ml；W：樣(yang)本質(zhi)量(liang)，0.1g；T：反(fan)應(ying)時(shi)間(jian)，1d；1000：1mg/ml=1000μg/ml
用(yong) 96 孔板測定(ding)的(de)計(ji)算公式(shi)如下
標準曲(qu)線(xian)：y=2.6357x-0.0007，R2=0.9989；x 為(wei)標準品(pin)濃(nong)度(du)（μg/ml），y 為(wei)吸(xi)光(guang)值ΔA。
酶(mei)活性(xing)定(ding)義(yi)：37℃條件(jian)下，每(mei)克(ke)土(tu)壤每(mei)天(tian)分(fen)解(jie)幾丁質產(chan)生(sheng) 1μg N-乙酰(xian)氨基葡(pu)萄糖(tang)的(de)酶(mei)量(liang)為(wei)壹(yi)個(ge)酶活性(xing)單位。
土(tu)壤幾丁質酶(mei)活性(xing)（μg/d/g 土(tu)樣）=（ΔA +0.0007）÷2.6357×V 反(fan)總÷W÷T×1000
= 1195×（ΔA +0.0007）
V 反(fan)總：反(fan)應(ying)體系總體積，0.315ml；W：樣(yang)本質(zhi)量(liang)，0.1g；T：反(fan)應(ying)時(shi)間(jian)，1d；1000：1mg/ml=1000μg/ml
註(zhu)意(yi)事項(xiang):
試(shi)劑(ji)壹(yi)充(chong)分(fen)混勻後(hou)再(zai)使用(yong)。
土(tu)壤幾丁質酶(mei)試(shi)劑(ji)盒(he)-常備(bei)現貨