土(tu)壤羥(qiang)胺(an)還(hai)原(yuan)酶(mei)能(neng)將(jiang)土(tu)壤中(zhong)氮(dan)代(dai)謝(xie)過(guo)程中(zhong)形(xing)成(cheng)的中間產物(wu)羥胺(an)還(hai)原(yuan)為氨，土(tu)壤中(zhong)的還(hai)原(yuan)態化(hua)合(he)物(wu)可作(zuo)為氫(qing)的供體(ti)，其強弱影(ying)響(xiang)到(dao)土(tu)壤氮(dan)代(dai)謝(xie)過(guo)程中(zhong)氮(dan)素(su)的氨揮(hui)發損失，間接影(ying)響(xiang)氮(dan)肥(fei)的利用(yong)效率(lv)。
土(tu)壤羥(qiang)胺(an)還(hai)原(yuan)酶(mei)試(shi)劑(ji)盒(he) 土(tu)壤系(xi)列(lie)

土(tu)壤羥(qiang)胺(an)還(hai)原(yuan)酶(mei)（hydroxylamine reductase,HR）試(shi)劑盒(he)說明(ming)書(shu)

微量(liang)法(fa) 100T/48S

土(tu)壤羥(qiang)胺(an)還(hai)原(yuan)酶(mei)試(shi)劑(ji)盒(he) 土(tu)壤系(xi)列(lie)

正(zheng)式(shi)測(ce)定(ding)前(qian)務(wu)必取 2-3 個(ge)預(yu)期(qi)差異(yi)較(jiao)大的樣本(ben)做(zuo)預(yu)測(ce)定(ding)測(ce)定(ding)意(yi)義(yi)：

土(tu)壤羥(qiang)胺(an)還(hai)原(yuan)酶(mei)能(neng)將(jiang)土(tu)壤中(zhong)氮(dan)代(dai)謝(xie)過(guo)程中(zhong)形(xing)成(cheng)的中間產物(wu)羥胺(an)還(hai)原(yuan)為氨，土(tu)壤中(zhong)的還(hai)原(yuan)態化(hua)合(he)物(wu)可作(zuo)為氫(qing)的供體(ti)，其強弱影(ying)響(xiang)到(dao)土(tu)壤氮(dan)代(dai)謝(xie)過(guo)程中(zhong)氮(dan)素(su)的氨揮(hui)發損失，間接影(ying)響(xiang)氮(dan)肥(fei)的利用(yong)效率(lv)。

測(ce)定(ding)原(yuan)理：

硫酸(suan)鐵(tie)銨(an)中的Fe³⁺可(ke)將羥(qiang)胺(an)氧(yang)化(hua)為氮氣，自身被還(hai)原(yuan)為 Fe²⁺，Fe²⁺在(zai)弱(ruo)酸(suan)條件(jian)下與鄰(lin)菲羅(luo)琳(lin)形(xing)成(cheng)橙(cheng)紅色配(pei)合(he)物(wu)，在(zai) 510nm 處(chu)有(you)吸(xi)收(shou)峰，羥胺(an)還(hai)原(yuan)酶(mei)作(zuo)用(yong)於(yu)羥(qiang)胺(an)，使配合(he)物(wu)形(xing)成(cheng)量(liang)減(jian)少，510nm 處吸(xi)光值(zhi)的減少可反(fan)映(ying)羥胺還(hai)原(yuan)酶(mei)的活(huo)性。

試(shi)劑組(zu)成(cheng)和(he)配(pei)制(zhi)：

試(shi)劑二：粉劑×1 瓶(ping)，4℃保(bao)存。臨用(yong)前加 4ml 蒸餾水充(chong)分溶(rong)解(jie)。

自(zi)備儀(yi)器和(he)用(yong)品：

天平(ping)、常(chang)溫(wen)離心機、可(ke)見分光光度(du)計(ji)/酶(mei)標(biao)儀(yi)、微量(liang)石(shi)英比色皿(min)/96 孔(kong)板、震(zhen)蕩(dang)儀(yi)、氮吹(chui)儀(yi)。

樣(yang)品處理：

新(xin)鮮土(tu)樣自(zi)然(ran)風幹(gan)或 37 度(du)烘箱風幹(gan)，過(guo) 30~50 目(mu)篩。

測(ce)定(ding)操作(zuo)表：

計(ji)算公(gong)式(shi)：

使用(yong)微量(liang)石(shi)英比色皿(min)測(ce)定(ding)的計(ji)算公(gong)式(shi)如(ru)下

標(biao)準曲線：y = 0.185x -0.1828，R2 = 0.9992

酶(mei)活(huo)定義(yi)：每克(ke)土(tu)壤每天轉化(hua) 1μg 羥(qiang)胺為壹個(ge)酶(mei)活(huo)力單(dan)位。

HR 活(huo)性（μg/d /g 土(tu)樣）=（△A+ 0.1828）÷ 0.185×V 反(fan)總÷W÷T

= 36.32×（△A+0.1828）÷W

使用(yong) 96 孔(kong)板測(ce)定(ding)的計(ji)算公(gong)式(shi)如(ru)下

標(biao)準曲線：y = 0.0925x -0.1828，R2 = 0.9992

酶(mei)活(huo)定義(yi)：每克(ke)土(tu)壤每天轉化(hua) 1μg 羥(qiang)胺為壹個(ge)酶(mei)活(huo)力單(dan)位。

HR 活(huo)性（μg/d /g 土(tu)樣）=（△A+ 0.1828）÷ 0.0925×V 反(fan)總÷W÷T

=72.64×（△A+0.1828）÷W

V 反(fan)總：加入(ru)提取(qu)液(ye)體(ti)積，0.28ml；W：樣(yang)本質量(liang)，g；T：1/24h

註意事(shi)項：

土(tu)壤表層(ceng)溶解(jie)氧濃(nong)度較(jiao)大，取樣應(ying)取表層(ceng) 5cm 以(yi)下的土(tu)壤，否(fou)則(ze)酶(mei)活(huo)性較(jiao)低或者(zhe)測(ce)定(ding)不(bu)到(dao)。

試(shi)劑三(san)盡(jin)量(liang)不(bu)要(yao)敞(chang)口(kou)放置(zhi)，取(qu)完立即(ji)加蓋(gai)擰緊(jin)。

反(fan)應體(ti)系(xi)最(zui)好(hao)能(neng)用(yong)氮吹(chui)儀(yi)排除(chu)溶(rong)解(jie)氧，若(ruo)無此裝(zhuang)置(zhi)，則(ze)加入(ru)試劑(ji)三(san)後(hou)立即(ji)密封(feng)，於(yu) 30℃反(fan)應 1h。

土(tu)壤羥(qiang)胺(an)還(hai)原(yuan)酶(mei)試(shi)劑(ji)盒(he) 土(tu)壤系(xi)列(lie)