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| 品牌(pai) | NobleRyder/諾(nuo)博萊(lai)德 | 貨號 | BO6087 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格 | 100T/48S | 供(gong)貨周期(qi) | 現貨 |
| 主要(yao)用途(tu) | 能催(cui)化(hua)水解木聚糖,也被(bei)稱為戊聚糖酶或(huo)半纖維(wei)素(su)酶 | 應用領(ling)域(yu) | 環(huan)保(bao),化(hua)工,生(sheng)物產(chan)業(ye),農林牧(mu)漁(yu),制(zhi)藥(yao)/生(sheng)物制藥 |
土(tu)壤堿性(xing)木(mu)聚糖酶(Soil Basic Xylanase,S-BAX)測(ce)定試劑(ji)盒(he)說(shuo)明書(shu)
微(wei)量(liang)法 100T/48S
土(tu)壤堿性(xing)木(mu)聚糖酶測(ce)定試劑(ji)盒(he)
正式(shi)測(ce)定前(qian)務(wu)必取(qu) 2-3 個預期(qi)差異(yi)較大的(de)樣(yang)本做(zuo)預測(ce)定測(ce)定意(yi)義:
木聚(ju)糖酶(EC 3.2.1.8)主要(yao)由微(wei)生(sheng)物產(chan)生(sheng),能催(cui)化(hua)水解木聚糖,也被(bei)稱為戊聚糖酶或(huo)半纖維(wei)素(su)酶,可分(fen)解釀造(zao)或(huo)飼(si)料(liao)工(gong)業(ye)中的(de)原料(liao)細胞(bao)壁以(yi)及β-葡(pu)聚糖,降(jiang)低釀造(zao)中物料的(de)粘(zhan)度,促(cu)進(jin)有效(xiao)物質(zhi)的(de)釋(shi)放,以(yi)及降(jiang)低飼料中的(de)非(fei)澱粉(fen)多糖,促(cu)進(jin)營(ying)養物質(zhi)的(de)吸收利(li)用,因(yin)而廣泛的(de)應(ying)用於(yu)釀造(zao)和(he)飼(si)料工業(ye)中,BAX 壹般(ban)分離(li)自最適(shi)生(sheng)長pH 為 9 -11 的(de)微(wei)生(sheng)物。
測(ce)定原理(li):
BAX 在堿性(xing)環(huan)境(jing)中催(cui)化(hua)木聚(ju)糖降(jiang)解成(cheng)還(hai)原性(xing)寡(gua)糖和單糖,在沸水浴(yu)條(tiao)件(jian)下進(jin)壹步(bu)與 3,5-二(er)硝基水楊(yang)酸發生(sheng)顯(xian)色(se)反應,在(zai) 540nm 處(chu)有特(te)征吸收峰(feng),反應液(ye)顏色(se)的(de)深(shen)淺與酶(mei)解產(chan)生(sheng)的(de)還(hai)原糖量(liang)成(cheng)正比,通(tong)過(guo)測(ce)定反應液(ye)在(zai) 540nm 吸光值增(zeng)加速(su)率(lv),可計(ji)算(suan)BAX 活力(li)。
組成(cheng):
產(chan)品名(ming)稱 | BO6087-100T/48S | Storage |
緩(huan)沖(chong)液(ye):液(ye)體(ti) | 10ml | 4℃ |
試劑(ji)壹:液(ye)體(ti) | 3ml | 4℃避光 |
試劑(ji)二(er):液(ye)體(ti) | 10ml | 4℃避光 |
說明(ming)書(shu) | 壹份 | |
自備儀(yi)器(qi)和用品:
天平、常溫離(li)心(xin)機、震(zhen)蕩(dang)儀、恒(heng)溫水浴(yu)鍋、可見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)/酶標(biao)儀、微(wei)量(liang)石英(ying)比色(se)皿(min)/96 孔(kong)板(ban)。
樣品處(chu)理(li):
新鮮(xian)土(tu)樣風(feng)幹,過 30-50 目篩(shai)。
測(ce)定操作(zuo)表:
1、分光(guang)光(guang)度(du)計(ji)/酶標(biao)儀預熱(re) 30min,調節波(bo)長至(zhi) 540nm。
2、操作(zuo)表
對(dui)照(zhao)管 | 測(ce)定管 | |||
土(tu)樣(g) | 0.02 | 0.02 | ||
緩(huan)沖(chong)液(ye)(μl) | 150 | 100 | ||
試劑(ji)壹(μl) | 50 | |||
混勻(yun),50℃震(zhen)蕩(dang)反應 30min,立即(ji) 90℃水浴(yu) 10min,8000g,25℃離心(xin) 10min,取上(shang)清(qing) 100μl | ||||
試劑(ji)二(er)(μl) | 100 | 100 | ||
混勻(yun),90℃水浴(yu)中顯(xian)色(se) 5min,取 180μl 於(yu)微(wei)量(liang)石英(ying)比色(se)皿(min)/96 孔(kong)板(ban)測(ce)定 540nm 處(chu)吸光值 A,分別(bie)記為(wei)A 對(dui)照(zhao)管、A 測(ce)定管,△A=A 測(ce)定管-A 對(dui)照(zhao)管。 | ||||
S-BAX 計(ji)算(suan)公(gong)式(shi):
a.用微(wei)量(liang)石英(ying)比色(se)皿(min)測(ce)定的(de)計(ji)算(suan)公(gong)式(shi)如(ru)下(xia)標(biao)準曲線:y = 2.8432x - 0.0293,R2 = 0.9985
酶活(huo)定義:50℃,pH9.0 條(tiao)件(jian)下,每克(ke)土(tu)壤每(mei)天(tian)分(fen)解木聚糖產(chan)生(sheng) 1μmol 還(hai)原糖所(suo)需(xu)的(de)酶(mei)量(liang)為壹個(ge)酶活(huo)單(dan)位。
S-BAX 活力(li)(μmol/d /g 土(tu)樣)=(△A+0.0293)÷ 2.8432×V 反總×103÷ W÷T÷ 150
= 16.88×(A540+0.0058)÷ W
V 反總:反應總體積(ji),0.15ml;T:反應時間(jian),1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量(liang)。 b.用 96 孔(kong)板(ban)測(ce)定的(de)計(ji)算(suan)公(gong)式(shi)如(ru)下(xia)
標(biao)準曲線:y = 1.4216x - 0.0293,R2 = 0.9985
酶活(huo)定義:50℃,pH9.0 條(tiao)件(jian)下,每克(ke)土(tu)壤每(mei)天(tian)分(fen)解木聚糖產(chan)生(sheng) 1μmol 還(hai)原糖所(suo)需(xu)的(de)酶(mei)量(liang)為壹個(ge)酶活(huo)單(dan)位。
S-BAX 活力(li)(μmol/d /g 土(tu)樣)=(△A+0.0293)÷ 1.4216×V 反總×103÷ W÷T÷ 150
= 33.76×(A540+0.0058)÷ W
V 反總:反應總體積(ji),0.15ml;T:反應時間(jian),1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量(liang)。
註意(yi)事(shi)項:
保證(zheng)震(zhen)蕩(dang)反應 30min,使(shi)酶與(yu)底物充分接觸(chu)。
註意(yi) 90℃水浴(yu)防(fang)止(zhi)爆(bao)開(kai),以(yi)免改(gai)變反應體(ti)系。
土(tu)壤堿性(xing)木(mu)聚糖酶測(ce)定試劑(ji)盒(he)