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| 品(pin)牌(pai) | NobleRyder/諾博(bo)萊德 | 貨號(hao) | BO6089 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 100T/48S | 供(gong)貨周期 | 現貨 |
| 主要(yao)用途 | 能(neng)催化水(shui)解木聚糖(tang),也被稱為(wei)戊(wu)聚糖(tang)酶或(huo)半(ban)纖(xian)維素(su)酶(mei) | 應用領域(yu) | 環(huan)保(bao),化工(gong),生物(wu)產(chan)業,農林(lin)牧(mu)漁,制藥/生物(wu)制藥 |
土(tu)壤酸性木(mu)聚糖(tang)酶(Soil Acidic Xylanase,S-ACX)測(ce)定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)書
微(wei)量(liang)法(fa) 100T/48S
土(tu)壤酸性木(mu)聚糖(tang)酶測(ce)定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)
正式測定(ding)前務(wu)必(bi)取 2-3 個(ge)預期差(cha)異較大的樣(yang)本(ben)做預(yu)測定(ding)測(ce)定(ding)意(yi)義(yi):
木(mu)聚糖(tang)酶(EC 3.2.1.8)主(zhu)要由微(wei)生(sheng)物(wu)產(chan)生,能(neng)催化水(shui)解木聚糖(tang),也被稱為(wei)戊(wu)聚糖(tang)酶或(huo)半(ban)纖(xian)維素(su)酶(mei),可分(fen)解(jie)釀造或飼(si)料(liao)工(gong)業中(zhong)的原(yuan)料(liao)細(xi)胞(bao)壁以(yi)及(ji)β-葡(pu)聚糖(tang),降低(di)釀(niang)造中(zhong)物(wu)料(liao)的粘(zhan)度,促進(jin)有(you)效(xiao)物(wu)質的釋放,以(yi)及(ji)降低(di)飼(si)料(liao)中(zhong)的非(fei)澱粉多(duo)糖(tang),促(cu)進(jin)營(ying)養(yang)物(wu)質的吸(xi)收(shou)利(li)用,因(yin)而廣泛(fan)的應用於釀造和(he)飼(si)料(liao)工(gong)業中(zhong),ACX 壹(yi)般(ban)分(fen)離自(zi)耐(nai)酸的真菌,細(xi)菌(jun)及(ji)部分(fen)黴菌(jun)。
測(ce)定(ding)原(yuan)理(li):
ACX 在酸性環(huan)境(jing)下(xia)能(neng)將木(mu)聚糖(tang)降解(jie)成(cheng)還(hai)原(yuan)性寡(gua)糖(tang)和(he)單(dan)糖(tang),進(jin)壹(yi)步(bu)在沸(fei)水(shui)浴條件(jian)下(xia)與 3,5-二硝基水(shui)楊酸發生顯(xian)色(se)反(fan)應,在 540nm 處(chu)有(you)特(te)征吸(xi)收峰,反應液顏色的深(shen)淺(qian)與酶(mei)解產(chan)生的還(hai)原(yuan)糖(tang)量(liang)成(cheng)正比,通過(guo)測(ce)定(ding)反(fan)應液在 540nm 吸(xi)光值(zhi)增加速率(lv),可計(ji)算ACX 活力(li)。
組(zu)成:
產(chan)品(pin)名(ming)稱 | BO6089-100T/48S | Storage |
緩(huan)沖(chong)液:液(ye)體 | 10ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)壹(yi):液(ye)體 | 3ml | 4℃避光 |
試(shi)劑(ji)二:液(ye)體 | 10ml | 4℃避光 |
說(shuo)明(ming)書 | 壹(yi)份 | |
自(zi)備(bei)儀(yi)器和(he)用品(pin):
天平(ping)、常溫(wen)離心機、震(zhen)蕩儀(yi)、恒溫(wen)水(shui)浴鍋(guo)、可見分(fen)光光度計(ji)/酶標(biao)儀(yi)、微量(liang)石(shi)英比(bi)色(se)皿/96 孔板(ban)。
樣(yang)品(pin)處(chu)理(li):
新(xin)鮮土(tu)樣風幹,過(guo) 30-50 目(mu)篩(shai)。
測(ce)定(ding)操作表(biao):
1、分(fen)光光度計(ji)/酶(mei)標(biao)儀(yi)預熱(re) 30min,調節(jie)波(bo)長(chang)至 540nm。
2、操作表(biao)
對(dui)照管 | 測(ce)定(ding)管(guan) | |||
土(tu)樣(g) | 0.02 | 0.02 | ||
緩(huan)沖(chong)液(μl) | 150 | 100 | ||
試(shi)劑(ji)壹(yi)(μl) | 50 | |||
混(hun)勻,50℃震(zhen)蕩反(fan)應 30min,立(li)即 90℃水(shui)浴 10min,8000g,25℃離心 10min,取上清 100μl | ||||
試(shi)劑(ji)二(μl) | 100 | 100 | ||
混(hun)勻,90℃水(shui)浴中(zhong)顯(xian)色(se) 5min,取 180μl 於微量(liang)石(shi)英比(bi)色(se)皿/96 孔板(ban)測定(ding) 540nm 處(chu)吸光值(zhi) A,分(fen)別記為(wei)A 對(dui)照管、A 測(ce)定(ding)管(guan),△A=A 測(ce)定(ding)管(guan)-A 對(dui)照(zhao)管。 | ||||
S-ACX 計(ji)算公式:
a. 用微量(liang)石(shi)英比(bi)色(se)皿測定(ding)的計(ji)算公式如(ru)下(xia)標(biao)準(zhun)曲線:y = 2.5554x - 0.002 ,R2 = 0.9983
酶(mei)活定(ding)義(yi):50℃,pH4.8 條(tiao)件(jian)下(xia),每克(ke)土(tu)壤每(mei)天分(fen)解木聚糖(tang)產(chan)生 1μmol 還(hai)原(yuan)糖(tang)所需(xu)的酶(mei)量(liang)為(wei)壹(yi)個(ge)酶活單(dan)位(wei)。
S-ACX 活力(li)(μmol/d/g 土(tu)樣)= (△A+0.002)÷ 2.5554 ×V 反(fan)總(zong)×103÷ W÷T÷ 150
=18.78 ×(△A+0.002)÷ W
V 反(fan)總:反應總體積,0.15ml;T:反(fan)應時(shi)間(jian),1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖(tang)分子量(liang)。 b.用 96 孔板(ban)測定(ding)的計(ji)算公式如(ru)下(xia)
標(biao)準(zhun)曲線:y = 1.2777x - 0.002 ,R2 = 0.9983
酶(mei)活定(ding)義(yi):50℃,pH4.8 條(tiao)件(jian)下(xia),每克(ke)土(tu)壤每(mei)天分(fen)解木聚糖(tang)產(chan)生 1μmol 還(hai)原(yuan)糖(tang)所需(xu)的酶(mei)量(liang)為(wei)壹(yi)個(ge)酶活單(dan)位(wei)。
S-ACX 活力(li)(μmol/d/g 土(tu)樣)=(△A+0.002)÷1.2777×V 反(fan)總(zong)×103÷ W÷T÷ 150
= 37.56 ×(△A+0.002)÷ W
V 反(fan)總:反應總體積,0.15ml;T:反(fan)應時(shi)間(jian),1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖(tang)分子量(liang)。
註(zhu)意(yi)事項:
保(bao)證震(zhen)蕩反(fan)應 30min,使(shi)酶與底物(wu)充分(fen)接觸(chu)。
註(zhu)意(yi) 90℃水(shui)浴防止爆開,以免(mian)改變(bian)反(fan)應體系。
土(tu)壤酸性木(mu)聚糖(tang)酶測(ce)定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)