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聯(lian)系電(dian)話(hua):10-62817090
| 品牌 | NobleRyder/諾博萊(lai)德(de) | 貨(huo)號(hao) | BO6091 |
|---|---|---|---|
| 規格(ge) | 100T/48S | 供(gong)貨(huo)周期(qi) | 現貨(huo) |
| 主要(yao)用(yong)途 | 能催化水解木聚(ju)糖(tang),也(ye)被稱為戊聚(ju)糖(tang)酶(mei)或半纖(xian)維(wei)素(su)酶(mei) | 應用(yong)領(ling)域(yu) | 環(huan)保(bao),化(hua)工(gong),生(sheng)物產業,農(nong)林牧(mu)漁,制藥(yao)/生(sheng)物(wu)制藥(yao) |
土壤中(zhong)性木聚(ju)糖(tang)酶(mei)(Soil Neutral Xylanase,S-NEX)測(ce)定(ding)試劑盒說(shuo)明書(shu)
微量(liang)法 100T/48S
土壤中(zhong)性木聚(ju)糖(tang)酶(mei)測(ce)定(ding)試劑盒
正式(shi)測(ce)定(ding)前務必(bi)取(qu) 2-3 個預(yu)期(qi)差(cha)異較(jiao)大(da)的(de)樣(yang)本做(zuo)預(yu)測(ce)定(ding)測(ce)定(ding)意(yi)義:
木聚(ju)糖(tang)酶(mei)(EC 3.2.1.8)主要(yao)由(you)微(wei)生物產生,能(neng)催化(hua)水解木聚(ju)糖(tang),也(ye)被稱為戊聚(ju)糖(tang)酶(mei)或半纖(xian)維(wei)素(su)酶(mei),可分解釀(niang)造(zao)或飼料工業(ye)中(zhong)的(de)原料細胞壁(bi)以及(ji)β-葡聚(ju)糖(tang),降低釀(niang)造(zao)中(zhong)物(wu)料的(de)粘(zhan)度,促進(jin)有效(xiao)物質(zhi)的(de)釋放(fang),以及(ji)降低飼料中(zhong)的(de)非澱(dian)粉多(duo)糖,促進(jin)營(ying)養(yang)物(wu)質(zhi)的(de)吸收利(li)用(yong),因(yin)而(er)廣(guang)泛的(de)應用(yong)於釀(niang)造(zao)和(he)飼料工業(ye)中(zhong),NEX 壹(yi)般分離(li)自最(zui)適(shi)生(sheng)長pH 為 6-8 的(de)微生(sheng)物。
測(ce)定(ding)原理(li):
NEX 在中(zhong)性環境(jing)中(zhong)催(cui)化(hua)木聚(ju)糖(tang)降解成(cheng)還原性寡(gua)糖和單(dan)糖,在沸(fei)水浴(yu)條(tiao)件下(xia)進壹(yi)步與(yu) 3,5-二(er)硝基(ji)水楊(yang)酸(suan)發(fa)生顯(xian)色反應,在(zai) 540nm 處(chu)有(you)特征吸收峰(feng),反應液(ye)顏(yan)色(se)的(de)深淺與(yu)酶(mei)解產生的(de)還原糖量(liang)成(cheng)正比(bi),通(tong)過(guo)測(ce)定(ding)反應液(ye)在(zai) 540nm 吸光值增(zeng)加速(su)率(lv),可計算(suan)NEX 活(huo)力。
組成(cheng):
產品名稱(cheng) | BO6091-100T/48S | Storage |
緩沖(chong)液(ye):液體(ti) | 10ml | 4℃ |
試劑壹(yi):液體(ti) | 3ml | 4℃避光 |
試劑二:液體(ti) | 10ml | 4℃避光 |
說明(ming)書(shu) | 壹(yi)份 | |
自備儀(yi)器(qi)和(he)用(yong)品:
天平(ping)、常(chang)溫離心(xin)機、震(zhen)蕩儀(yi)、恒(heng)溫水浴(yu)鍋(guo)、可見(jian)分光(guang)光度計(ji)/酶(mei)標(biao)儀(yi)、微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比(bi)色(se)皿(min)/96 孔板(ban)。
樣(yang)品處(chu)理(li):
新鮮(xian)土(tu)樣(yang)風(feng)幹,過(guo) 30-50 目(mu)篩(shai)。
測(ce)定(ding)操作(zuo)表(biao):
1、分光(guang)光度計(ji)/酶(mei)標(biao)儀(yi)預(yu)熱(re) 30min,調節(jie)波(bo)長至(zhi) 540nm。
2、操作(zuo)表(biao)
對照(zhao)管(guan) | 測(ce)定(ding)管 | |||
土樣(yang)(g) | 0.02 | 0.02 | ||
緩沖(chong)液(ye)(μl) | 150 | 100 | ||
試劑壹(yi)(μl) | 50 | |||
混勻,50℃震(zhen)蕩反應 30min,立(li)即(ji) 90℃水浴(yu) 10min,8000g,25℃離心(xin) 10min,取上(shang)清 100μl | ||||
試劑二(μl) | 100 | 100 | ||
混勻,90℃水浴(yu)中(zhong)顯(xian)色(se) 5min,取 180μl 於微量石英(ying)比(bi)色(se)皿(min)/96 孔板(ban)測(ce)定(ding) 540nm 處(chu)吸光值 A,分別(bie)記為A 對照(zhao)管(guan)、A 測(ce)定(ding)管,△A=A 測(ce)定(ding)管-A 對(dui)照管。 | ||||
S-NEX 計算(suan)公(gong)式(shi):
a. 用微(wei)量(liang)石英(ying)比(bi)色(se)皿(min)測(ce)定(ding)的(de)計算(suan)公(gong)式(shi)如(ru)下(xia)標(biao)準(zhun)曲線(xian):y = 1.6904x + 0.0058,R2 = 0.9989
酶(mei)活(huo)定(ding)義:50℃,pH6.0 條(tiao)件下(xia),每(mei)克(ke)土(tu)壤每(mei)天(tian)分解木聚(ju)糖(tang)產生 1μmol 還原糖所(suo)需的(de)酶(mei)量為壹(yi)個酶(mei)活(huo)單(dan)位(wei)。
S-NEX 活(huo)力(μmol/d/g 土(tu)樣(yang))=(△A-0.0058)÷ 1.6904×V 反總×103÷ W÷T÷ 150
= 28.4×(△A -0.0058)÷ W
V 反總:反應總(zong)體(ti)積(ji),0.15ml;T:反應時間(jian),1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖(tang)分子(zi)量(liang)。 b.用 96 孔板(ban)測(ce)定(ding)的(de)計算(suan)公(gong)式(shi)如(ru)下(xia)
標(biao)準(zhun)曲線(xian):y = 0.8452x + 0.0058,R2 = 0.9989
酶(mei)活(huo)定(ding)義:50℃,pH6.0 條(tiao)件下(xia),每(mei)克(ke)土(tu)壤每(mei)天(tian)分解木聚(ju)糖(tang)產生 1μmol 還原糖所(suo)需的(de)酶(mei)量為壹(yi)個酶(mei)活(huo)單(dan)位(wei)。
S-NEX 活(huo)力(μmol/d/g 土(tu)樣(yang))=(△A-0.0058)÷ 0.8452×V 反總×103÷ W÷T÷ 150
= 56.8×(A540-0.0058)÷ W
V 反總:反應總(zong)體(ti)積(ji),0.15ml;T:反應時間(jian),1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖(tang)分子(zi)量(liang)。
註意(yi)事(shi)項(xiang):
保(bao)證震(zhen)蕩反應 30min,使(shi)酶(mei)與(yu)底物充(chong)分接(jie)觸。
註意(yi) 90℃水浴(yu)防(fang)止爆(bao)開(kai),以免(mian)改變反應體(ti)系。
土壤中(zhong)性木聚(ju)糖(tang)酶(mei)測(ce)定(ding)試劑盒