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| 品牌(pai) | NobleRyder/諾(nuo)博萊(lai)德 | 貨號(hao) | BO6093 |
|---|---|---|---|
| 規格(ge) | 100T/48S | 供(gong)貨周期 | 現(xian)貨 |
| 主要(yao)用途 | 它(ta)能(neng)將(jiang)食(shi)品(pin)和飼料(liao)中植(zhi)酸(suan)及其鹽(yan)轉(zhuan)化為可供(gong)有機體(ti)利用的有效磷 | 應(ying)用領(ling)域(yu) | 環保(bao),化工,生(sheng)物產業,農林(lin)牧(mu)漁(yu),制藥/生(sheng)物制藥 |
土壤(rang)植(zhi)酸(suan)酶(phytase)試(shi)劑盒(he)說(shuo)明(ming)書
微(wei)量(liang)法 100T/48S
土壤(rang)植(zhi)酸(suan)酶phytase試(shi)劑盒(he)
正(zheng)式測(ce)定前(qian)務必(bi)取(qu) 2-3 個(ge)預期差(cha)異(yi)較(jiao)大的樣本(ben)做(zuo)預測定測(ce)定意義:
植(zhi)酸(suan)酶(phytase)是(shi)催化植(zhi)酸(suan)及其鹽(yan)類(lei)水(shui)解(jie)為肌醇(chun)與(yu)磷酸(suan)(鹽(yan))的壹(yi)類(lei)酶(mei)的總(zong)稱(cheng),屬磷(lin)酸(suan)單酯(zhi)水解(jie)酶(mei),它(ta)能(neng)將(jiang)食(shi)品(pin)和飼料(liao)中植(zhi)酸(suan)及其鹽(yan)轉(zhuan)化為可供(gong)有機體(ti)利用的有效磷,降低糞便(bian)中的磷(lin)含(han)量,減(jian)輕(qing)對(dui)環(huan)境(jing)的汙(wu)染(ran),改善營(ying)養成分的吸(xi)收(shou)和利用,因(yin)此(ci)具有極(ji)其(qi)廣泛(fan)的研(yan)究(jiu)和應(ying)用價(jia)值。
測定原(yuan)理(li):
植(zhi)酸(suan)酶在壹(yi)定溫(wen)度和pH 值條件下,水(shui)解(jie)底(di)物植(zhi)酸(suan)鈉(na)生(sheng)成(cheng)無(wu)機磷(lin)與(yu)肌醇(chun)衍生(sheng)物,無(wu)機磷(lin)在酸(suan)性環(huan)境中與(yu)鉬酸(suan)銨顯色劑反應(ying)生成(cheng)藍色復合物,在 700nm 處(chu)有特(te)征(zheng)吸(xi)收峰(feng),根(gen)據 700nm 處(chu)吸光(guang)值變化可計算得植(zhi)酸(suan)酶活(huo)性。
組(zu)成:
產品名(ming)稱 | BO6093-100T/48S | Storage |
緩沖液(ye):液(ye)體(ti) | 60ml | 4℃ |
試(shi)劑壹(yi):粉(fen)劑 | 1 瓶(ping) | 4℃避光(guang) |
試(shi)劑二:液體(ti) | 15ml | 4℃ |
顯色劑:粉(fen)劑 | 6 管 | 4℃避光(guang) |
說明(ming)書 | 壹(yi)份 | |
試(shi)劑壹(yi):粉(fen)劑×1 瓶(ping),4℃避光(guang)保(bao)存(cun),臨(lin)用(yong)前(qian)加緩沖液(ye) 30ml 配(pei)制,現(xian)用現(xian)配;用(yong)不完的試(shi)劑 4℃保(bao)存(cun)壹(yi)個(ge)月。
顯色劑:粉(fen)劑×6 管,4℃避光(guang)保(bao)存(cun),臨(lin)用(yong)前(qian)根據用量(liang)每(mei)瓶(ping)加 0.4ml 雙(shuang)蒸水溶解(jie),再加 1.6ml 試(shi)劑二混勻(yun)。
自備(bei)儀器(qi)和用(yong)品(pin):
天平、低溫(wen)離心機、酶(mei)標(biao)儀、96 孔(kong)板、恒(heng)溫(wen)水(shui)浴鍋(guo),甲苯(ben)(不允(yun)許(xu)快(kuai)遞)。
樣本(ben)處(chu)理(li):
新鮮(xian)土樣自(zi)然(ran)風(feng)幹或(huo) 37 度烘箱風(feng)幹,過(guo) 30~50 目(mu)篩。
測定操(cao)作(zuo)表(biao):
對照(zhao)管(guan) | 測定管(guan) | |
樣本(ben)(g) | 0.03 | 0.03 |
甲苯(ben) | 20 | 20 | ||
振蕩(dang)混勻(yun),室(shi)溫(wen)放(fang)置 15min | ||||
緩沖液(ye)(µl) | 500 | |||
試(shi)劑壹(yi)(µl) | 500 | |||
混勻(yun),37℃孵育(yu) 24h,10000g,4℃離心 5min,取上(shang)清(qing) | ||||
上清(qing) | 100 | 100 | ||
顯色劑(µl) | 100 | 100 | ||
混勻(yun),靜置 15min,測定 700nm 處(chu)吸光(guang)值,△A=A 測(ce)定管(guan)-A 對(dui)照 管。每(mei)個(ge)測定管(guan)設(she)壹(yi)個(ge)對照(zhao)管。 | ||||
酶活(huo)性(xing)計算公式:
標準(zhun)曲(qu)線(xian):y = 0.8795x + 0.0084,R2 = 0.9977;x 為標準(zhun)品(pin)濃(nong)度(μmol/ml),y 為吸光(guang)值△A。
酶活(huo)性(xing)定義:在 37℃,pH5.5 的條件下,每(mei)克土樣每(mei)小時從 5mmol/L 的植(zhi)酸(suan)鈉(na)溶液(ye)中釋放出 1μmol 的無(wu)機磷(lin)為壹(yi)個(ge)酶活(huo)力(li)單位。
植(zhi)酸(suan)酶活(huo)性(μmol/h /g 土樣)=(△A-0.0084)÷0.8795×V 反總÷W÷T
=0.82×(△A-0.0084)
V 反總:反應(ying)總體(ti)積(ji),0.52ml;T:反應(ying)時間,24h;W:樣本(ben)質(zhi)量,0.03g。
註意事項:
1、顯色劑需要臨用(yong)前(qian)根據用量(liang)配制,每(mei)壹(yi)瓶(ping)是 10 個(ge)樣本(ben)的用(yong)量(liang),新配(pei)制的顯(xian)色劑若有顏色則已經汙(wu)染(ran)或(huo)者(zhe)試(shi)劑過(guo)期,應(ying)放棄(qi)使(shi)用(yong)。
2、ΔA 線性(xing)範(fan)圍為 0.01-0.5。
土壤(rang)植(zhi)酸(suan)酶phytase試(shi)劑盒(he)