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| 品(pin)牌 | NobleRyder/諾博(bo)萊德(de) | 貨(huo)號 | BO6095 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格(ge) | 100T/48S | 供貨周(zhou)期 | 現貨 |
| 主要用(yong)途 | 是催(cui)化(hua)木(mu)聚糖(tang)類半(ban)纖維素降解的(de)關鍵(jian)酶,產(chan)物木糖(tang)可作(zuo)為(wei)碳源(yuan)應用(yong)於(yu)微生物發(fa)酵 | 應用(yong)領域(yu) | 環保(bao),化(hua)工(gong),生(sheng)物產業,農林(lin)牧漁(yu),制藥/生(sheng)物制藥 |
土(tu)壤(rang)β-木(mu)糖(tang)苷酶(Solid-β- xylosidase, S-β-XYS)測定(ding)試劑盒說(shuo)明書(shu)
微(wei)量(liang)法 100T/48S
土(tu)壤(rang)β-木(mu)糖(tang)苷酶測定(ding)試劑盒
正式(shi)測定(ding)前務必取 2-3 個預(yu)期差(cha)異較大(da)的(de)樣本(ben)做(zuo)預(yu)測定(ding)測定(ding)意(yi)義(yi):
β-木(mu)糖(tang)苷酶(EC3.2.1.37)存在(zai)於(yu)植(zhi)物、細(xi)菌(jun)和(he)真(zhen)菌(jun)等(deng)生物體(ti),是催(cui)化(hua)木(mu)聚糖(tang)類半(ban)纖維素降解的(de)關鍵(jian)酶,產(chan)物木糖(tang)可作(zuo)為(wei)碳源(yuan)應用(yong)於(yu)微生物發(fa)酵。另(ling)外(wai),β-木(mu)糖(tang)苷酶還可以作(zuo)為(wei)生物(wu)漂(piao)白(bai)劑應用(yong)於(yu)造(zao)紙(zhi)工(gong)業(ye),比傳統(tong)的(de)漂(piao)白(bai)法環保(bao),具(ju)有廣(guang)泛的(de)應用(yong)價(jia)值(zhi)。
測定(ding)原理:
S-β-XYS 催(cui)化(hua)對(dui)硝基苯(ben)fen-β-D-木(mu)糖(tang)苷產生對硝(xiao)基苯(ben)fen,對(dui)硝(xiao)基苯(ben)fen在(zai) 405nm 處有特征(zheng)吸收峰,測定(ding)405nm 光吸收增加速(su)率(lv),可計(ji)算(suan)S-β-XYS 活(huo)性。
組成(cheng):
產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng) | BO6095-100T/48S | Storage |
提(ti)取(qu)液(ye):液體(ti) | 100ml | 4℃ |
試(shi)劑壹:液(ye)體(ti) | 1ml | 4℃避(bi)光(guang) |
試(shi)劑二(er):液(ye)體(ti) | 10ml | 4℃ |
試(shi)劑三:液(ye)體(ti) | 10ml | 4℃ |
說(shuo)明(ming)書(shu) | 壹(yi)份 | |
自(zi)備儀(yi)器(qi)和(he)用(yong)品(pin):
天(tian)平、低(di)溫(wen)離(li)心(xin)機、可見分(fen)光(guang)光度計(ji)/酶(mei)標儀(yi)、微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比色(se)皿/96 孔板(ban)和(he)蒸餾(liu)水。
粗(cu)酶(mei)液(ye)提(ti)取:
約(yue) 0.1g 鮮土(tu)或風(feng)幹(gan)土(tu)樣(yang),加入(ru) 1ml 提取(qu)液進行(xing)冰浴勻漿,室(shi)溫(wen)振蕩(dang)提取(qu) 30min,然(ran)後(hou) 10000g,4℃,離(li)心(xin) 10min,取上(shang)清待測。
測定(ding)操(cao)作(zuo)表:
1、分(fen)光(guang)光度計(ji)/酶(mei)標儀(yi)預(yu)熱 30min,調節(jie)波(bo)長至(zhi) 405nm。
2、操(cao)作(zuo)表
對(dui)照(zhao)管 | 測定(ding)管 | |
樣(yang)本(ben)(μl) | 40 | 40 |
試(shi)劑壹(μl) | 10 | |||
試(shi)劑二(er)(μl) | 80 | 70 | ||
混(hun)勻,45℃水浴 20min | ||||
試(shi)劑三(μl) | 80 | 80 | ||
混(hun)勻,靜置(zhi) 5min,405nm 處測定(ding)吸光(guang)值(zhi)A,計算(suan)ΔA=A 測定(ding)管-A 對(dui)照(zhao)管。每(mei)個測定(ding)管 設(she)壹(yi)個對照(zhao)管。 | ||||
β-木(mu)糖(tang)苷酶活(huo)性計算(suan)公式(shi):
用(yong)微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比色(se)皿測定(ding)的(de)計算公式(shi)如(ru)下
標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian):y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x 為(wei)標準(zhun)品(pin)濃(nong)度(du)(μmol/ml),y 為(wei)吸光(guang)值(zhi)ΔA。酶活(huo)定(ding)義(yi):每(mei)克(ke)土(tu)樣(yang)每(mei)天(tian)催(cui)化(hua)產(chan)生 1μmol 對硝基苯(ben)fen的(de)酶量(liang)為(wei)壹個酶活(huo)單位(wei)。
β-木(mu)糖(tang)苷酶活(huo)性(μmol/d /g 土(tu)樣(yang))=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反(fan)總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V 樣(yang)總:加入(ru)提取(qu)液體(ti)積,1ml; V 反總:反應總體(ti)積,0.12ml;V 樣:反應中樣(yang)品體(ti)積,0.04ml; W:樣品質(zhi)量(liang),g;T:反(fan)應時間,20min=1/72d;
用(yong) 96 孔板(ban)測定(ding)的(de)計算公式(shi)如(ru)下
標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian):y=6.613x+0.0011,R2=0.9998;x 為(wei)標準(zhun)品(pin)濃(nong)度(du)(μmol/ml),y 為(wei)吸光(guang)值(zhi)ΔA酶活(huo)定(ding)義(yi):每(mei)克(ke)土(tu)樣(yang)每(mei)天(tian)催(cui)化(hua)產(chan)生 1μmol 對硝基苯(ben)fen的(de)酶量(liang)為(wei)壹個酶活(huo)單位(wei)。
β-木(mu)糖(tang)苷酶活(huo)性(μmol/d /g 土(tu)樣(yang))=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V 反(fan)總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T
=32.66×(ΔA-0.0011)÷W
V 樣(yang)總:加入(ru)提取(qu)液體(ti)積,1ml; V 反總:反應總體(ti)積,0.12ml;V 樣:反應中樣(yang)品體(ti)積,0.04ml; W:樣品質(zhi)量(liang),g;T:反(fan)應時間,20min=1/72d;
ΔA 控(kong)制在(zai) 0.01-1 範(fan)圍內,若ΔA 大(da)於(yu) 1,可(ke)適(shi)當減小(xiao)樣(yang)本(ben)量(liang)。標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)線(xian)性範(fan)圍為(wei):0.01μmol/ml-0.5μmol/ml。
土(tu)壤(rang)β-木(mu)糖(tang)苷酶測定(ding)試劑盒