脂蛋(dan)白(bai)酯(zhi)酶是(shi)脂肪(fang)細(xi)胞(bao)、心(xin)肌細胞(bao)、骨骼肌細胞(bao)、乳腺(xian)細(xi)胞(bao)及(ji)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)等(deng)實質(zhi)細胞(bao)合成(cheng)的壹(yi)種(zhong)酶，可催(cui)化(hua)甘油三脂水(shui)解(jie)為(wei)脂肪(fang)酸和單酸甘油酯(zhi)，以(yi)供(gong)組織(zhi)氧(yang)化(hua)供(gong)能和(he)貯(zhu)存(cun)，並在(zai)不(bu)同(tong)的組織(zhi)表(biao)現出(chu)不(bu)同的(de)生(sheng)理意義(yi)。
脂蛋(dan)白(bai)酯(zhi)酶試劑盒(he) 脂肪(fang)酸系(xi)列

脂蛋(dan)白(bai)酯(zhi)酶（Lipoprotein lipase，LPL）試劑盒(he)說明書

微量法 100T/48S

脂蛋(dan)白(bai)酯(zhi)酶試劑盒(he) 脂肪(fang)酸系(xi)列

正式(shi)測定(ding)前(qian)務(wu)必取 2-3 個預(yu)期差異(yi)較(jiao)大(da)的(de)樣(yang)本做(zuo)預(yu)測定(ding)

測定(ding)意義(yi)：

脂蛋(dan)白(bai)酯(zhi)酶是(shi)脂肪(fang)細(xi)胞(bao)、心(xin)肌細胞(bao)、骨骼肌細胞(bao)、乳腺(xian)細(xi)胞(bao)及(ji)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)等(deng)實質(zhi)細胞(bao)合成(cheng)的壹(yi)種(zhong)酶，可催(cui)化(hua)甘油三脂水(shui)解(jie)為(wei)脂肪(fang)酸和單酸甘油酯(zhi)，以(yi)供(gong)組織(zhi)氧(yang)化(hua)供(gong)能和(he)貯(zhu)存(cun)，並在(zai)不(bu)同(tong)的組織(zhi)表(biao)現出(chu)不(bu)同的(de)生(sheng)理意義(yi)。

測定(ding)原理：

脂蛋(dan)白(bai)酯(zhi)酶水解 4-硝基苯棕櫚酸酯(zhi)產生(sheng) 4-硝基苯fen，在 400nm 有(you)特(te)征(zheng)吸收(shou)峰。

組(zu)成(cheng)：

自備儀(yi)器和(he)用(yong)品：

天(tian)平(ping)、冷(leng)凍離心(xin)機(ji)、研缽、水浴(yu)鍋、可見(jian)分(fen)光光度計/酶標(biao)儀(yi)、微量石英(ying)比色皿/96 孔板。

樣(yang)品(pin)處(chu)理：

組(zu)織(zhi)：按照質(zhi)量（g）：試劑壹(yi)體積(ji)(ml)為 1：5~10 的(de)比(bi)例（建議稱取(qu)約 0.1g，加(jia)入 1ml 試劑壹(yi)）加(jia)入試劑壹(yi)，冰浴勻(yun)漿(jiang)後於(yu) 4℃，10000g 離心(xin) 10min，取(qu)上清待測。

細(xi)胞(bao)：按照細胞(bao)數量（104 個）：試劑壹(yi)體積(ji)（ml）為 500~1000：1 的(de)比(bi)例（建議 500 萬(wan)細(xi)胞(bao)加(jia)入 1ml試劑壹(yi)）加(jia)入試劑壹(yi)，冰浴超聲(sheng)波破碎細(xi)胞(bao)（功率(lv) 300w，超聲(sheng) 3 秒，間隔 7 秒(miao)，總(zong)時間(jian) 3min）；然後(hou)於(yu) 4℃，10000g 離心(xin) 10min，取(qu)上清待測。

血(xue)清：直接(jie)測定(ding)。

測定(ding)操作(zuo)：

計(ji)算(suan)公(gong)式：

用(yong)微量石英(ying)比色皿測定(ding)的計(ji)算公(gong)式如下(xia) 標(biao)準曲(qu)線(xian)：y= 0.0581x -0.0169，R2=0.9982

按照蛋(dan)白(bai)濃度計算(suan)

酶活性定(ding)義：在(zai) 45℃，pH7.5 條件(jian)下(xia)，每毫(hao)克蛋(dan)白(bai)每分(fen)鐘水解產生(sheng) 1μmol 4-硝基苯fen為壹個酶活力單位(wei)。 LPL 活(huo)性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.0581×V 反(fan)總(zong)÷（V 樣(yang)×Cpr）÷T

= 17.21×（△A+0.0169）÷Cpr

按照樣(yang)本質(zhi)量計算(suan)

酶活性定(ding)義：在(zai) 45℃，pH7.5 條件(jian)下(xia)，每克組織(zhi)每分(fen)鐘水解產生(sheng) 1μmol 4-硝基苯fen為壹個酶活力單位(wei)。 LPL 活(huo)性（μmol /min/g 鮮重(zhong)）=（△A+0.0169）÷0.0581×V 反(fan)總(zong)÷（W×V 樣(yang)÷V 樣(yang)總(zong)）÷T

= 17.21×（△A+0.0169）÷W

按照細胞(bao)數量計算(suan)

酶活性定(ding)義：在(zai) 45℃，pH7.5 條件(jian)下(xia)，每 104 個細(xi)胞(bao)每分(fen)鐘水解產生(sheng) 1μmol 4-硝基苯fen為壹個酶活力單位(wei)。 LPL 活(huo)性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.0581×V 反(fan)總(zong)÷（V 樣(yang)×細(xi)胞(bao)數量÷V 樣(yang)總(zong)）÷T= 17.21×（△A+0.0169）÷細胞(bao)數量

按照液(ye)體體積(ji)計算(suan)

酶活性定(ding)義：在(zai) 45℃，pH7.5 條件(jian)下(xia)，每毫(hao)升血清每分(fen)鐘水解產生(sheng) 1μmol 4-硝基苯fen為壹個酶活力單位(wei)。 LPL 活(huo)性（μmol /min/ml）=（△A+0.0169）÷0.0581×V 反(fan)總(zong)÷V 樣(yang)÷T

= 17.21×（△A+0.0169）

V 反(fan)總(zong)：反(fan)應總(zong)體積(ji)，0.2ml；V 樣(yang)：反(fan)應體系(xi)中加(jia)入樣(yang)本體積(ji)，0.02ml；W：樣(yang)本質(zhi)量，g；V 樣(yang)總(zong)：加(jia)入提取(qu)液(ye)體積(ji)，1ml；T：反(fan)應時間(jian)，10min

b．用(yong) 96 孔板測定(ding)的計(ji)算公(gong)式如下(xia)

標(biao)準曲(qu)線(xian)：y= 0.029x -0.0169，R2=0.9982

按照蛋(dan)白(bai)濃度計算(suan)

酶活性定(ding)義：在(zai) 45℃，pH7.5 條件(jian)下(xia)，每毫(hao)克蛋(dan)白(bai)每分(fen)鐘水解產生(sheng) 1μmol 4-硝基苯fen為壹個酶活力單位(wei)。 LPL 活(huo)性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.029×V 反(fan)總(zong)÷（V 樣(yang)×Cpr）÷T

= 34.42×（△A+0.0169）÷Cpr

按照樣(yang)本質(zhi)量計算(suan)

酶活性定(ding)義：在(zai) 45℃，pH7.5 條件(jian)下(xia)，每克組織(zhi)每分(fen)鐘水解產生(sheng) 1μmol 4-硝基苯fen為壹個酶活力單位(wei)。 LPL 活(huo)性（μmol /min/g 鮮重(zhong)）=（△A+0.0169）÷0.029×V 反(fan)總(zong)÷（W×V 樣(yang)÷V 樣(yang)總(zong)）÷T

= 34.42×（△A+0.0169）÷W

按照細胞(bao)數量計算(suan)

酶活性定(ding)義：在(zai) 45℃，pH7.5 條件(jian)下(xia)，每 104 個細(xi)胞(bao)每分(fen)鐘水解產生(sheng) 1μmol 4-硝基苯fen為壹個酶活力單位(wei)。 LPL 活(huo)性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.029×V 反(fan)總(zong)÷（V 樣(yang)×細(xi)胞(bao)數量÷V 樣(yang)總(zong)）÷T

=34.42×（△A+0.0169）÷細(xi)胞(bao)數量

按照液(ye)體體積(ji)計算(suan)

酶活性定(ding)義：在(zai) 45℃，pH7.5 條件(jian)下(xia)，每毫(hao)升血清每分(fen)鐘水解產生(sheng) 1μmol 4-硝基苯fen為壹個酶活力單位(wei)。 LPL 活(huo)性（μmol /min/ml）=（△A+0.0169）÷0.029×V 反(fan)總(zong)÷V 樣(yang)÷T

= 34.42×（△A+0.0169）

V 反(fan)總(zong)：反(fan)應總(zong)體積(ji)，0.2ml；V 樣(yang)：反(fan)應體系(xi)中加(jia)入樣(yang)本體積(ji)，0.02ml；W：樣(yang)本質(zhi)量，g；V 樣(yang)總(zong)：加(jia)入提取(qu)液(ye)體積(ji)，1ml；T：反(fan)應時間(jian)，10min

註(zhu)意事(shi)項(xiang)：

試劑三(san)加(jia)入混勻(yun)後(hou)靜(jing)置兩(liang)分(fen)鐘(zhong)立即(ji)測定(ding)，否則(ze)影(ying)響(xiang)吸光值(zhi)。

吸光值(zhi)過(guo)高(gao)或(huo)者測定(ding)結(jie)果不穩定(ding)，則(ze)將(jiang)酶液(ye)進行(xing)適(shi)當(dang)的稀(xi)釋，並在計(ji)算(suan)公式(shi)中乘以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數(shu)。

脂蛋(dan)白(bai)酯(zhi)酶試劑盒(he) 脂肪(fang)酸系(xi)列