肝酯酶是(shi)脂(zhi)肪(fang)分解(jie)酶，在(zai)肝(gan)實(shi)質(zhi)細(xi)胞(bao)中合(he)成(cheng)，存在(zai)於(yu)肝(gan)臟竇周間(jian)隙內(nei)皮細(xi)胞(bao)表面和(he)竇周間(jian)隙腔面(mian)的(de)肝細(xi)胞(bao)微(wei)絨(rong)毛(mao)表面，可促進脂(zhi)蛋(dan)白(bai)中的(de)膽(dan)gu醇(chun)向(xiang)類(lei)固(gu)醇(chun)激素轉(zhuan)化(hua)，血(xue)漿中的(de) HL 活(huo)性(xing)增高(gao)時(shi)，血漿中小顆(ke)粒可導(dao)致LDL 水(shui)平升高，加(jia)速(su)動脈(mai)粥(zhou)樣硬化的發(fa)生(sheng)。
肝酯酶試(shi)劑(ji)盒(he) 脂肪(fang)酸(suan)系列(lie)

肝(gan)酯酶(mei)（Hepatic lipase，HL）試(shi)劑(ji)盒(he)說明(ming)書(shu)

微(wei)量(liang)法(fa) 100T/48S

肝(gan)酯酶試(shi)劑(ji)盒(he) 脂肪(fang)酸(suan)系列(lie)

正(zheng)式測(ce)定前(qian)務(wu)必(bi)取 2-3 個(ge)預期差異較大(da)的樣本做(zuo)預測定

測(ce)定意義(yi)：

肝(gan)酯酶是(shi)脂(zhi)肪(fang)分解(jie)酶，在(zai)肝(gan)實(shi)質(zhi)細(xi)胞(bao)中合(he)成(cheng)，存在(zai)於(yu)肝(gan)臟竇周間(jian)隙內(nei)皮細(xi)胞(bao)表面和(he)竇周間(jian)隙腔面(mian)的(de)肝細(xi)胞(bao)微(wei)絨(rong)毛(mao)表面，可促進脂(zhi)蛋(dan)白(bai)中的(de)膽(dan)gu醇(chun)向(xiang)類(lei)固(gu)醇(chun)激素轉(zhuan)化(hua)，血(xue)漿中的(de) HL 活(huo)性(xing)增(zeng)高時(shi)，血漿中小顆(ke)粒可(ke)導(dao)致LDL 水(shui)平升高，加(jia)速(su)動脈(mai)粥(zhou)樣硬化的發(fa)生(sheng)。

測(ce)定原理(li)：

肝(gan)酯酶水(shui)解(jie)α-乙酸(suan)萘(nai)酯產生(sheng)α-萘(nai)酚(fen)，可(ke)與(yu)固藍(lan) B 鹽(yan)形成(cheng)紫紅(hong)色偶(ou)氮(dan)化合(he)物(wu)，在(zai) 595nm 有(you)特征吸收(shou)峰，顏(yan)色深(shen)淺(qian)在(zai)壹(yi)定範圍內(nei)與(yu)肝酯酶活(huo)性(xing)成(cheng)正(zheng)相關(guan)。

組(zu)成(cheng)：

自備(bei)儀(yi)器(qi)和(he)用(yong)品(pin)：

天平、冷(leng)凍離(li)心(xin)機、研缽、水浴鍋(guo)、可(ke)見分光光度(du)計(ji)/酶標(biao)儀(yi)、微量石(shi)英(ying)比(bi)色皿/96 孔(kong)板。

樣品處理(li)：

組(zu)織(zhi)：按(an)照(zhao)質(zhi)量(liang)（g）：試(shi)劑(ji)壹(yi)體(ti)積(ji)(ml)為 1：5~10 的(de)比(bi)例（建議(yi)稱取約 0.1g，加(jia)入 1ml 試(shi)劑(ji)壹(yi)）加(jia)入試(shi)劑(ji)壹(yi)，冰浴(yu)勻漿後(hou)於(yu) 4℃，10000g 離(li)心(xin) 10min，取上清(qing)待(dai)測。

細(xi)胞(bao)：按(an)照(zhao)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)（104 個(ge)）：試劑壹(yi)體(ti)積(ji)（ml）為 500~1000：1 的(de)比(bi)例（建議(yi) 500 萬(wan)細(xi)胞(bao)加(jia)入 1ml試(shi)劑(ji)壹(yi)）加(jia)入試(shi)劑(ji)壹(yi)，冰浴(yu)超聲波(bo)破(po)碎(sui)細(xi)胞(bao)（功(gong)率(lv) 300w，超聲 3 秒(miao)，間(jian)隔 7 秒(miao)，總(zong)時(shi)間 3min）；然後(hou)於(yu) 4℃，10000g 離(li)心(xin) 10min，取上清(qing)待(dai)測。

血(xue)清(qing)：直(zhi)接(jie)測(ce)定。

測(ce)定操作：

計(ji)算(suan)公(gong)式：

用(yong)微(wei)量石(shi)英(ying)比(bi)色皿測(ce)定的計算公(gong)式如(ru)下(xia)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)：y= 0.1519 x -0.1241，R2=0.9994

按(an)照(zhao)蛋(dan)白(bai)濃(nong)度(du)計(ji)算

酶(mei)活(huo)性(xing)定義：每毫(hao)克蛋(dan)白(bai)每分鐘(zhong)水解α-乙(yi)酸(suan)萘(nai)酯產生(sheng) 1μmol α-萘(nai)酚(fen)為壹(yi)個(ge)酶活力單(dan)位(wei)。 HL 活(huo)性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.1241）÷0.1519×V 反(fan)總(zong)÷（V 樣×Cpr）÷T

= 6.58×（△A+0.1241）÷Cpr

按(an)照(zhao)樣本質(zhi)量(liang)計(ji)算(suan)

酶(mei)活(huo)性(xing)定義：每克組(zu)織(zhi)每分鐘(zhong)水解α-乙(yi)酸(suan)萘(nai)酯產生(sheng) 1μmol α-萘(nai)酚(fen)為壹(yi)個(ge)酶活力單(dan)位(wei)。 HL 活(huo)性（μmol /min/g 鮮(xian)重）= （△A+0.1241）÷0.1519×V 反(fan)總(zong)÷（W×V 樣÷V 樣總(zong)）÷T

= 6.58×（△A+0.1241）÷W

按(an)照(zhao)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)計算

酶(mei)活(huo)性(xing)定義：每 104 個(ge)細(xi)胞(bao)每分鐘(zhong)水解α-乙(yi)酸(suan)萘(nai)酯產生(sheng) 1μmol α-萘(nai)酚(fen)為壹(yi)個(ge)酶活力單(dan)位(wei)。

HL 活(huo)性(xing)（μmol /min/104 cell）= （△A+0.1241）÷0.1519×V 反(fan)總(zong)÷（V 樣×細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)÷V 樣總(zong)）÷T

= 6.58×（△A+0.1241）÷細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)

按(an)照(zhao)液(ye)體(ti)體(ti)積(ji)計(ji)算

酶(mei)活(huo)性(xing)定義：每毫(hao)升血(xue)清每分鐘(zhong)水解α-乙(yi)酸(suan)萘(nai)酯產生(sheng) 1μmol α-萘(nai)酚(fen)為壹(yi)個(ge)酶活力單(dan)位(wei)。HL 活(huo)性（μmol

/min/ml）=（△A+0.1241）÷0.1519×V 反(fan)總(zong)÷V 樣÷T

= 6.58×（△A+0.1241）

V 反(fan)總(zong)：反(fan)應(ying)總(zong)體(ti)積(ji)，0.2ml；V 樣：反(fan)應(ying)體(ti)系中加(jia)入樣本體(ti)積(ji)，0.02ml；W：樣本質(zhi)量(liang)，g；V 樣總(zong)：加(jia)入提取液體(ti)積(ji)，1ml；T：反(fan)應(ying)時(shi)間，10min

用(yong) 96 孔(kong)板測(ce)定的計算公(gong)式如(ru)下(xia)

標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)：y= 0.076 x -0.1241，R2=0.9994

按(an)照(zhao)蛋(dan)白(bai)濃(nong)度(du)計(ji)算

酶(mei)活(huo)性(xing)定義：每毫(hao)克蛋(dan)白(bai)每分鐘(zhong)水解α-乙(yi)酸(suan)萘(nai)酯產生(sheng) 1μmol α-萘(nai)酚(fen)為壹(yi)個(ge)酶活力單(dan)位(wei)。

HL 活(huo)性(xing)（μmol /min/mg prot）= （△A+0.1241）÷0.076×V 反(fan)總(zong)÷（V 樣×Cpr）÷T

= 13.16×（△A+0.1241）÷Cpr

按(an)照(zhao)樣本質(zhi)量(liang)計(ji)算(suan)

酶(mei)活(huo)性(xing)定義：每克組(zu)織(zhi)每分鐘(zhong)水解α-乙(yi)酸(suan)萘(nai)酯產生(sheng) 1μmol α-萘(nai)酚(fen)為壹(yi)個(ge)酶活力單(dan)位(wei)。 HL 活(huo)性（μmol /min/g 鮮(xian)重）= （△A+0.1241）÷0.076×V 反(fan)總(zong)÷（W×V 樣÷V 樣總(zong)）÷T

= 13.16×（△A+0.1241）÷W

按(an)照(zhao)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)計算

酶(mei)活(huo)性(xing)定義：每 104 個(ge)細(xi)胞(bao)每分鐘(zhong)水解α-乙(yi)酸(suan)萘(nai)酯產生(sheng) 1μmol α-萘(nai)酚(fen)為壹(yi)個(ge)酶活力單(dan)位(wei)。

HL 活(huo)性(xing)（μmol /min/104 cell）= （△A+0.1241）÷0.076×V 反(fan)總(zong)÷（V 樣×細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)÷V 樣總(zong)）÷T

= 13.16×（△A+0.1241）÷細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)

按(an)照(zhao)液(ye)體(ti)體(ti)積(ji)計(ji)算

酶(mei)活(huo)性(xing)定義：每毫(hao)升血(xue)清每分鐘(zhong)水解α-乙(yi)酸(suan)萘(nai)酯產生(sheng) 1μmol α-萘(nai)酚(fen)為壹(yi)個(ge)酶活力單(dan)位(wei)。HL 活(huo)性（μmol

/min/ml）=（△A+0.1241）÷0.076×V 反(fan)總(zong)÷V 樣÷T

= 13.16×（△A+0.1241）

V 反(fan)總(zong)：反(fan)應(ying)總(zong)體(ti)積(ji)，0.2ml；V 樣：反(fan)應(ying)體(ti)系中加(jia)入樣本體(ti)積(ji)，0.02ml；W：樣本質(zhi)量(liang)，g；V 樣總(zong)：加(jia)入提取液體(ti)積(ji)，1ml；T：反(fan)應(ying)時(shi)間，10min

肝(gan)酯酶試(shi)劑(ji)盒(he) 脂肪(fang)酸(suan)系列(lie)