XOD（EC 1.17.3.2）催化(hua)黃(huang)piao呤氧化生(sheng)成(cheng)尿(niao)酸和(he)超(chao)氧陰(yin)離(li)子(zi)，是(shi)活性(xing)氧主要來(lai)源(yuan)之(zhi)壹(yi)；同時也(ye)是(shi)核苷酸代(dai)謝(xie)的(de)關鍵酶之壹(yi)。XOD 主要分布(bu)於(yu)哺乳(ru)動(dong)物的(de)心(xin)，肺，肝臟等組織中，當(dang)肝功能(neng)受損時，XOD 大量釋放到(dao)血(xue)清(qing)中，對肝損害(hai)的(de)診斷具有特(te)異性(xing)的意(yi)義。
黃(huang)piao呤氧化酶試(shi)劑(ji)盒(he)

黃(huang)piao呤氧化酶（xanthione oxidase, XOD）試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明書(shu)

分光光度法 50 管/48 樣(yang)

黃(huang)piao呤氧化酶試(shi)劑(ji)盒(he)

正(zheng)式測定(ding)前務(wu)必取(qu) 2-3 個(ge)預(yu)期(qi)差異較(jiao)大的樣(yang)本做預(yu)測(ce)定(ding)測定(ding)意(yi)義：

XOD（EC 1.17.3.2）催(cui)化黃(huang)piao呤氧化生(sheng)成(cheng)尿(niao)酸和(he)超(chao)氧陰(yin)離(li)子(zi)，是(shi)活性(xing)氧主要來(lai)源(yuan)之(zhi)壹(yi)；同時也(ye)是(shi)核苷酸代(dai)謝(xie)的(de)關鍵酶之壹(yi)。XOD 主要分布(bu)於(yu)哺乳(ru)動(dong)物的(de)心(xin)，肺，肝臟等組織中，當(dang)肝功能(neng)受損時，XOD 大量釋放到(dao)血(xue)清(qing)中，對肝損害(hai)的(de)診斷具有特(te)異性(xing)的意(yi)義。

測(ce)定(ding)原理(li)：

XOD 催化(hua)黃(huang)piao呤產(chan)生(sheng)尿(niao)酸，尿(niao)酸在(zai) 290nm 下(xia)有特(te)征吸收(shou)峰(feng)

試(shi)劑(ji)組成(cheng)和配(pei)制：

自備儀器和用品：

紫外分光光度計(ji)、臺(tai)式(shi)離(li)心(xin)機(ji)、可(ke)調式移(yi)液器、1ml 石(shi)英(ying)比色(se)皿(min)、研(yan)缽(bo)、冰(bing)和蒸(zheng)餾水(shui)。

粗(cu)酶液提(ti)取(qu)：

1、細菌、細胞或組織樣(yang)品(pin)的(de)制備：

細(xi)菌(jun)或培(pei)養(yang)細(xi)胞：先(xian)收(shou)集(ji)細菌(jun)或細(xi)胞到(dao)離(li)心(xin)管內(nei)，離(li)心(xin)後棄(qi)上(shang)清(qing)；按(an)照(zhao)細菌或細(xi)胞數(shu)量（104 個(ge)）：提(ti)取(qu)液體積(ji)（ml）為 500~1000：1 的(de)比例(li)（建議(yi) 500 萬細(xi)菌(jun)或細(xi)胞加入 1ml 提(ti)取(qu)液），超聲波破碎(sui)細(xi)菌或細(xi)胞（冰(bing)浴(yu)，功率(lv) 20％或 200W，超(chao)聲 3s，間隔(ge) 10s，重復 30 次(ci)）；8000g 4℃離(li)心(xin) 10min，取(qu)上(shang)清(qing)，置冰(bing)上(shang)待(dai)測(ce)。

2、組織：按(an)照(zhao)組織質(zhi)量（g）：提取(qu)液體積(ji)(ml)為 1：5~10 的(de)比例(li)（建議(yi)稱(cheng)取(qu)約(yue) 0.1g 組織，加入 1ml提(ti)取(qu)液），進(jin)行冰(bing)浴(yu)勻漿。8000g 4℃離(li)心(xin) 10min，取(qu)上(shang)清(qing)，置冰(bing)上(shang)待(dai)測(ce)。 3、血(xue)清(qing)（漿）樣(yang)品：直(zhi)接(jie)檢測(ce)。

測定(ding)步驟(zhou)：

1、分光光度計(ji)預(yu)熱 30min 以上(shang)，調節(jie)波長至 290nm，蒸(zheng)餾水(shui)調零。

2、XOD 檢測(ce)工作液(ye)的(de)配(pei)制：用時在每(mei)瓶(ping)試(shi)劑(ji)二中加入 15ml 試(shi)劑(ji)壹(yi)，充(chong)分混勻，現配(pei)現用；

3、測定(ding)前將(jiang)XOD 檢測(ce)工作液(ye) 37℃(哺乳(ru)動(dong)物)或 25℃（其(qi)它(ta)物種(zhong)）水(shui)浴(yu) 10min。

4、取(qu) 1mlXOD 檢測(ce)工作液(ye)於(yu) 1ml 石(shi)英(ying)比色(se)皿(min)中，再加入 35μL 樣(yang)本，混勻，室(shi)溫(wen)下立(li)即(ji)測定(ding) 290nm下的(de)初(chu)始(shi)吸(xi)光值A1 和 1min 後(hou)的(de)吸(xi)光值(zhi)A2，計(ji)算(suan)ΔA＝A2-A1。

XOD 活性(xing)計(ji)算(suan)：

1、血(xue)清(qing)（漿）XOD 計(ji)算(suan)：

單位的定(ding)義：每(mei)毫升血(xue)清(qing)（漿）每(mei)分鐘催化產(chan)生(sheng) 1nmol 尿(niao)酸定(ding)義為壹(yi)個(ge)酶活力單位。

XOD（nmol/min/ml）＝[ΔA×V 反(fan)總(zong)÷（ε×d）×109]÷V 樣÷T=2424×ΔA 2、組織、細(xi)菌(jun)或細(xi)胞中XOD 計(ji)算(suan)：

按(an)樣(yang)本蛋(dan)白(bai)濃度計(ji)算(suan)：

單位的定(ding)義：每(mei)mg 組織蛋(dan)白(bai)每(mei)分鐘催化產(chan)生(sheng) 1nmol 尿(niao)酸定(ding)義為壹(yi)個(ge)酶活力單位。

XOD（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V 反(fan)總(zong)÷（ε×d）×109]÷(V 樣×Cpr)÷T =2424×ΔA÷Cpr

按(an)樣(yang)本鮮重計(ji)算(suan)：

單位的定(ding)義：每(mei)g 組織每(mei)分鐘催化產(chan)生(sheng) 1nmol 尿(niao)酸定(ding)義為壹(yi)個(ge)酶活力單位。

XOD（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V 反(fan)總(zong)÷（ε×d）×109]÷（W ×V 樣÷V 樣總(zong)）÷T=2424×ΔA÷W

按(an)細(xi)菌或細(xi)胞密度計(ji)算(suan)：

單位的定(ding)義：每(mei)壹萬(wan)個(ge)細(xi)菌(jun)或細(xi)胞每(mei)分鐘催化產(chan)生(sheng) 1nmol 尿(niao)酸定(ding)義為壹(yi)個(ge)酶活力單位。

XOD（nmol/min/104 cell）=[ΔA×V 反(fan)總(zong)÷（ε×d）×109]÷（500×V 樣÷V 樣總(zong)）÷T=4.848×ΔA

V 反(fan)總(zong)：反(fan)應(ying)體系(xi)總(zong)體積(ji)，1.035×10-3 L；ε：尿(niao)酸摩爾(er)消(xiao)光系(xi)數(shu)，1.22×104 L/ mol /cm；d：比色(se)皿(min)光(guang)徑(jing)，1cm；V 樣：加入樣(yang)本體積(ji)，0.05 ml；V 樣(yang)總(zong)：加入提(ti)取(qu)液體積(ji)，1 ml；T：反(fan)應(ying)時間，1 min；W：樣(yang)本(ben)質(zhi)量，g；Cpr：樣本(ben)蛋(dan)白(bai)質(zhi)濃度，mg/ml；500：細胞或細(xi)菌(jun)總(zong)數，500 萬。

黃(huang)piao呤氧化酶試(shi)劑(ji)盒(he)