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| 品(pin)牌(pai) | NobleRyder/諾(nuo)博萊德 | 貨(huo)號 | BC6007 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格(ge) | 50T/48S / 100T/96S | 供(gong)貨(huo)周(zhou)期(qi) | 現(xian)貨(huo) |
| 主(zhu)要(yao)用(yong)途(tu) | 花(hua)色(se)苷是(shi)壹(yi)類(lei)易(yi)溶於極(ji)性(xing)溶劑的天(tian)然色(se)素,屬(shu)黃酮類(lei)化合(he)物(wu) | 應(ying)用(yong)領(ling)域 | 環保(bao),化(hua)工(gong),生(sheng)物(wu)產業,農(nong)林(lin)牧漁,制藥/生物(wu)制藥 |
植物(wu)花(hua)色(se)苷含量(liang)試(shi)劑盒(he)說(shuo)明(ming)書
分光(guang)光(guang)度(du)法(fa) 50 管/48 樣
植物(wu)花(hua)色(se)苷含量(liang)試(shi)劑盒(he) 氧化(hua)
正式測(ce)定(ding)前務(wu)必(bi)取(qu) 2-3 個(ge)預(yu)期(qi)差異較大的樣本(ben)做預測(ce)定(ding)測(ce)定(ding)意義:
花(hua)色(se)苷是(shi)壹(yi)類(lei)易(yi)溶於極(ji)性(xing)溶劑的天(tian)然色(se)素,屬(shu)黃酮類(lei)化合(he)物(wu)。花(hua)色(se)苷廣泛(fan)存在(zai)於(yu)植物(wu)的根、莖(jing)、葉(ye)、花(hua)和果實(shi)中(zhong),使(shi)其呈(cheng)現(xian)由紅(hong)到紫(zi)等(deng)不同顏色(se),是(shi)植(zhi)物(wu)主要的(de)呈(cheng)色(se)物(wu)質。
測(ce)定(ding)原理(li):
采(cai)用pH 示差法(fa)測(ce)定(ding)花(hua)色(se)苷含量(liang),當(dang) pH 為(wei) 1.0 時花(hua)色(se)苷在(zai) 530nm 處有最(zui)大吸收峰(feng),而(er)當pH 為(wei) 4.5 時, 花(hua)色(se)苷轉(zhuan)變為(wei)無(wu)色(se)查爾酮形(xing)式,在(zai) 530 處無(wu)吸(xi)收峰(feng), 利用(yong)此特(te)性(xing)分別(bie)測(ce)定(ding)在(zai)不(bu)同pH 下的 530nm 和(he) 700nm 處的(de)吸(xi)光(guang)度(du)值。pH 示(shi)差法(fa)減少(shao)了溶液(ye)pH 和(he)溶(rong)劑差異的(de)影響(xiang),排除(chu)了其他非(fei)花(hua)色(se)苷類(lei)物(wu)質對檢(jian)測(ce)結(jie)果的(de)幹擾。
試(shi)劑的組(zu)成(cheng)和配(pei)制:
產品(pin)名(ming)稱 | BC6007-50T/48S | Storage |
提(ti)取液(ye):液(ye)體(ti) | 50ml | 4℃ |
試(shi)劑壹:液(ye)體(ti) | 50ml | 4℃ |
試(shi)劑二:液(ye)體(ti) | 50ml | 4℃ |
說(shuo)明(ming)書 | 壹份(fen) | |
需自(zi)備儀(yi)器和用品(pin):
可見分光(guang)光(guang)度(du)計、水(shui)浴鍋(guo)、可(ke)調(tiao)式移(yi)液(ye)器、1ml 玻璃比色(se)皿、研(yan)缽和蒸(zheng)餾水(shui)
按(an)照(zhao)烘幹樣品(pin)質量(liang)(g):提(ti)取液(ye)體(ti)積(ji)(ml)為(wei) 1:5~10 的比例(建(jian)議稱(cheng)取(qu)約 0.1g 烘幹樣品(pin),加(jia)入 1ml 提(ti)取液(ye)),充(chong)分勻(yun)漿(jiang)後(hou)轉移(yi)到EP 管中(zhong),提(ti)取液(ye)定(ding)容至 1 ml,蓋(gai)緊後(hou) 4℃浸提(ti) 24 h,8000 g,25℃離心(xin) 10 min,取(qu)上清液(ye)待(dai)測(ce)。
測(ce)定(ding)步(bu)驟:
1、分光(guang)光(guang)度(du)計預(yu)熱 30min 以上;試(shi)劑壹和試(shi)劑二預熱 10min 以上。
2、取 100 µl 上清液(ye)和(he) 900 µl 試(shi)劑壹(相當於稀釋(shi) 10 倍),40℃水(shui)浴 20min,分別(bie)測(ce)定(ding) 530nm 和 700nm處的(de)吸(xi)光(guang)值(zhi),分別(bie)記為(wei)A1 和A2。
3、 取 100 µl 上清液(ye)和(he) 900 µl 試(shi)劑二(相當於稀釋(shi) 10 倍),40℃水(shui)浴 20min,分別(bie)測(ce)定(ding) 530nm 和 700nm處的(de)吸(xi)光(guang)值(zhi),分別(bie)記為(wei)A3 和A4。
4、 計算△A=(A1-A2)-(A3-A4)。
註意(yi)事(shi)項:
如果A1 大於 1,可以適當加(jia)大稀釋(shi)倍數,保(bao)證(zheng)總體(ti)積(ji) 1ml 不(bu)變(bian),如 50 µl 上清液(ye)和(he) 950 µl 試(shi)劑壹(相當於稀釋(shi) 20 倍);如果 A1 小於 0.1,可以適當縮(suo)小稀釋(shi)倍數,保(bao)證(zheng)總體(ti)積(ji)不(bu)變(bian),如 200 µl 上清液(ye)和(he) 800 µl試(shi)劑壹(相當於稀釋(shi) 5 倍),使(shi)A1 保(bao)持(chi)在(zai) 0.1~1 範圍(wei)內(nei),可(ke)提(ti)高檢(jian)測(ce)靈敏度(du);同樣調(tiao)整(zheng)上清液(ye)和(he)試(shi)劑二體(ti)積(ji)比例;計算時以實(shi)際(ji)稀釋(shi)倍數代入下(xia)述公(gong)式中(zhong)。
花(hua)色(se)苷含量(liang)計(ji)算:
花(hua)色(se)苷含量(liang)(µg/g 幹重(zhong))=[ΔA×V÷(ε×d)×M×F×106]÷W=16.7×ΔA× F÷W
V:提(ti)取液(ye)體(ti)積(ji),1×10-3L,ε:花(hua)色(se)苷的(de)摩爾消光(guang)系(xi)數,2.69×104 L / mol /cm;d:比色(se)皿光(guang)徑(jing),1cm; M:花(hua)色(se)苷的(de)相對分子(zi)質量(liang):449.2g/mol;F:稀釋(shi)倍數;106:1g=106µg;W:樣本(ben)幹重(zhong):g。
ΔA 線性(xing)範圍(wei)為(wei) 0.005-1。
植物(wu)花(hua)色(se)苷含量(liang)試(shi)劑盒(he) 氧化(hua)