Glu 廣泛(fan)存(cun)在(zai)於動物(wu)、植(zhi)物(wu)、微(wei)生(sheng)物(wu)和培養(yang)細胞(bao)中，不(bu)僅是(shi)組(zu)成蛋白(bai)質(zhi)的(de) 20 種(zhong)氨(an)基酸之壹，而(er)且通過(guo)轉(zhuan)氨基作(zuo)用(yong)參與多種(zhong)氨(an)基酸合成，是(shi)生(sheng)物(wu)體(ti)內(nei)主(zhu)要(yao)氨基來(lai)源(yuan)之壹。此外，Glu 還(hai)是味精的(de)主要(yao)有效成分(fen)，常用(yong)做食品添(tian)加(jia)劑以及香(xiang)料生(sheng)產。
谷(gu)an酸含量(liang)測(ce)定(ding)試(shi)劑盒 氨基酸

谷(gu)an酸(glutamic acid，Glu)含量(liang)測(ce)定(ding)試(shi)劑盒說明(ming)書

分(fen)光(guang)光(guang)度法 50 管(guan)/48 樣(yang)

谷(gu)an酸含量(liang)測(ce)定(ding)試(shi)劑盒 氨基酸

正(zheng)式測(ce)定(ding)前(qian)務必取 2-3 個(ge)預期(qi)差異較大(da)的(de)樣本(ben)做預(yu)測(ce)定(ding)測(ce)定(ding)意(yi)義(yi)：

Glu 廣(guang)泛(fan)存(cun)在(zai)於動物(wu)、植(zhi)物(wu)、微(wei)生(sheng)物(wu)和培養(yang)細胞(bao)中，不(bu)僅是(shi)組(zu)成蛋白(bai)質(zhi)的(de) 20 種(zhong)氨(an)基酸之壹，而(er)且通過(guo)轉(zhuan)氨(an)基作(zuo)用(yong)參與多種(zhong)氨(an)基酸合成，是(shi)生(sheng)物(wu)體(ti)內(nei)主(zhu)要(yao)氨基來(lai)源(yuan)之壹。此外，Glu 還(hai)是味精的(de)主要(yao)有效成分(fen)，常用(yong)做食品添(tian)加(jia)劑以及香(xiang)料生(sheng)產。

測(ce)定(ding)原理：

利(li)用(yong)專用(yong)提(ti)取液(ye)提(ti)取，然後用(yong)顯色劑進(jin)行顯色，顯色後在(zai) 570nm 下進(jin)行測(ce)定(ding)。

組(zu)成：

試(shi)劑二(er)臨用(yong)前(qian)加(jia)入 10ml 蒸(zheng)餾(liu)水，充(chong)分混勻(yun)溶(rong)解(jie)，用(yong)不完(wan)的(de)試劑仍 4℃保存(cun)。

自備(bei)儀器和(he)用(yong)品：

可(ke)見(jian)分(fen)光光(guang)度(du)計、臺式離(li)心(xin)機、可調(tiao)式移(yi)液(ye)器、1 ml 玻(bo)璃(li)比色皿、研(yan)缽(bo)、冰(bing)、蒸(zheng)餾(liu)水。

谷(gu)an酸提(ti)取：

1、細(xi)菌(jun)或(huo)培養(yang)細胞(bao)樣(yang)品(pin)：先(xian)收(shou)集(ji)細菌(jun)或(huo)細胞(bao)到(dao)離(li)心(xin)管內，離(li)心(xin)後棄(qi)上(shang)清；按(an)照細菌或(huo)細胞(bao)數量(liang)（104個(ge)）：試劑壹體(ti)積(ji)（ml）為 500~1000：1 的(de)比例(li)（建議(yi) 1000 萬細(xi)菌(jun)或(huo)細胞(bao)加(jia)入 2ml 試(shi)劑壹），超聲波(bo)破碎(sui)細(xi)菌或(huo)細胞(bao)（冰(bing)浴，功率 20％或(huo) 200W，超聲 3s，間(jian)隔(ge) 10s，重復(fu) 30 次(ci)）；8000g 常溫離(li)心(xin) 10min，取上清(qing)，置冰(bing)上(shang)待測(ce)。

2、組(zu)織樣(yang)品：按照(zhao)組(zu)織質(zhi)量(liang)（g）：試(shi)劑壹體(ti)積(ji)(ml)為 1：5~10 的(de)比例(li)（建議(yi)稱取(qu)約 0.2g 組(zu)織，加(jia)入

2ml 試(shi)劑壹），進(jin)行冰(bing)浴勻漿。8000g 常溫離(li)心(xin) 10min，取上清(qing)，置冰(bing)上(shang)待測(ce)。

3、血(xue)清（漿）或(huo)細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)樣(yang)品：按(an)照血(xue)清（漿）或(huo)細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)體(ti)積(ji)（ml）：試劑壹體(ti)積(ji)(ml)為 1：5~10 的(de)比例(li)（建議(yi)取 0.2ml 血(xue)清（漿）或(huo)者(zhe)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)加(jia)入 2ml 試(shi)劑壹），進(jin)行冰(bing)浴勻漿。8000g 常溫離(li)心(xin) 10min，取上清(qing)，置冰(bing)上(shang)待測(ce)。

測(ce)定(ding)步(bu)驟：

1、分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)預(yu)熱(re) 30min 以(yi)上(shang)，調(tiao)節(jie)波(bo)長至(zhi) 570nm，蒸(zheng)餾(liu)水調(tiao)零(ling)。

2、在(zai)有(you)蓋(gai)EP 管(guan)中加(jia)入下列(lie)試(shi)劑：

混勻(yun)，90℃水浴 20min（蓋(gai)緊(jin)，以(yi)防(fang)止(zhi)水分(fen)散(san)失），流水冷(leng)卻(que)，於 570nm 波(bo)長處比色，△A=A 測(ce)定(ding)管(guan)

-A 對(dui)照(zhao)管(guan)。對照(zhao)管(guan)只要(yao)做壹(yi)管(guan)。

谷(gu)an酸含量(liang)計(ji)算：

1、標準條件下測(ce)定(ding)回歸方(fang)程為(wei)y = 0.0074x- 0.5255；x 為谷(gu)an酸含量(liang)（µg/ml），y 為(wei)吸(xi)光(guang)值。

2、按(an)照(zhao)血(xue)清（漿）或(huo)者(zhe)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)體(ti)積(ji)計算

谷(gu)an酸含量(liang)(μg/ml)= [(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V3×V1÷V2）=1351×(△A+0.5255)

3、按(an)照(zhao)蛋白(bai)濃(nong)度計(ji)算

谷(gu)an酸含量(liang)(µg/mg prot)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(V1×Cpr)=135.1×(△A+0.5255) ÷Cpr

4、按(an)照(zhao)樣(yang)本質(zhi)量(liang)計(ji)算

谷(gu)an酸含量(liang)(µg/g 鮮(xian)重)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(W ×V1÷V2)=270.2×(△A+0.5255) ÷W

5、按(an)照(zhao)細(xi)菌或(huo)細胞(bao)密度(du)計(ji)算

谷(gu)an酸含量(liang)(μg/104 cell)=[(△A +0.5255)÷0.0074×V1]÷(1000×V1÷V2)=0.27×(△A+0.5255)

V1：加(jia)入反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)中樣(yang)本體(ti)積(ji)，1ml；V2：加入提(ti)取液(ye)體(ti)積(ji)，2 ml；V3：加入血(xue)清（漿）或(huo)細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)體(ti)積(ji)，0.2 ml； Cpr：樣本(ben)蛋白(bai)質(zhi)濃(nong)度，mg/ml；W：樣(yang)本(ben)質(zhi)量(liang)，g；1000：細(xi)菌(jun)或(huo)細胞(bao)總(zong)數，1000 萬。

註(zhu)意(yi)：

1、該試(shi)劑盒僅適(shi)用(yong)於發酵液(ye)或(huo)組織中谷(gu)an酸含量(liang)測(ce)定(ding)，檢(jian)測(ce)下限(xian)為(wei) 100µg/ml。

2、標準曲線線性(xing)範圍為(wei)：100µg/ml -600µg/ml。

3、ΔA 線性(xing)範圍為(wei)：0.01-2；若大於 2 則需要將(jiang)上清液(ye)用(yong)試劑壹稀釋至(zhi)適(shi)當倍數後測(ce)定(ding)，計(ji)算公式中乘(cheng)以(yi)相應(ying)稀釋倍數。

谷(gu)an酸含量(liang)測(ce)定(ding)試(shi)劑盒 氨基酸