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聯(lian)系(xi)電(dian)話(hua):10-62817090
| 品牌 | NobleRyder/諾(nuo)博(bo)萊德 | 貨(huo)號 | BH6009 |
|---|---|---|---|
| 規格(ge) | 50T/48S | 供(gong)貨(huo)周(zhou)期(qi) | 現貨(huo) |
| 主要用(yong)途(tu) | 能促進人(ren)體發(fa)育、增(zeng)強(qiang)免疫(yi)功(gong)能,並(bing)有(you)提高中樞神經(jing)組(zu)織功(gong)能的作(zuo)用(yong) | 應(ying)用(yong)領(ling)域 | 環保(bao),化(hua)工,生(sheng)物產(chan)業(ye),農(nong)林(lin)牧漁(yu),制(zhi)藥(yao)/生(sheng)物制(zhi)藥(yao) |
賴(lai)an酸(lysine,Lys)含(han)量測(ce)定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明書
分(fen)光光度法(fa) 50 管(guan)/48 樣
賴(lai)an酸lysine Lys含量測(ce)定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he) 氨基酸
正(zheng)式(shi)測(ce)定(ding)前務(wu)必取(qu) 2-3 個預(yu)期(qi)差(cha)異較(jiao)大的樣本(ben)做(zuo)預(yu)測(ce)定(ding)測(ce)定(ding)意義(yi):
賴(lai)an酸是人(ren)體必需(xu)氨基酸之(zhi)壹,能促進人(ren)體發(fa)育、增(zeng)強(qiang)免疫(yi)功(gong)能,並(bing)有(you)提高中樞神經(jing)組(zu)織功(gong)能的作(zuo)用(yong)。賴(lai)an酸為(wei)堿性(xing)必需(xu)氨基酸。由於(yu)谷物食(shi)品中的賴(lai)an酸含量甚(shen)低,且在(zai)加(jia)工過程中易被(bei)破(po)壞(huai)而缺(que)乏(fa),故(gu)稱為(wei)第壹限(xian)制(zhi)性氨基酸。
測(ce)定(ding)原理:
蛋白(bai)質(zhi)中的賴(lai)an酸具有(you)壹個遊(you)離的ε-NH2,它與茚(yin)三(san)酮試(shi)劑(ji)反(fan)應(ying)生(sheng)成(cheng)藍(lan)紫(zi)色物質(zhi),其顏色的深(shen)淺(qian)在壹(yi)定(ding)範(fan)圍內(nei)與賴(lai)an酸的含(han)量成線性(xing)關系(xi)。亮(liang)an酸與賴(lai)an酸的碳(tan)原(yuan)子(zi)數目(mu)相(xiang)同(tong),而且(qie)僅(jin)有(you)—個遊(you)離氨基(ε-NH2),所(suo)以通(tong)常用(yong)亮(liang)an酸配制標準(zhun)液(ye)。
組(zu)成:
產(chan)品名稱(cheng) | BH6009-50T/48S | Storage |
提(ti)取(qu)液:液體 | 50ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)壹:粉劑 | 1 瓶(ping) | 4℃ |
試(shi)劑(ji)二:液體 | 12.5ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)三(san):液體(ti) | 15ml | 4℃ |
試(shi)劑(ji)四:60%乙醇(自(zi)備(bei)) | 1 瓶(ping) | 4℃ |
說(shuo)明書 | 1 份(fen) | |
試(shi)劑(ji)壹臨用(yong)前(qian)加(jia)入(ru) 12.5ml 試(shi)劑(ji)三(san)充分溶解(jie)混勻;
自(zi)備(bei)儀器和用(yong)品:
可(ke)見分(fen)光光度計(ji)、臺式(shi)離心(xin)機(ji)、可調(tiao)式(shi)移液(ye)器(qi)、1ml 玻(bo)璃比(bi)色皿、研(yan)缽(bo)、冰(bing)、蒸餾(liu)水(shui)、水(shui)浴(yu)鍋(guo)。
賴(lai)an酸提取(qu):
樣本(ben)烘幹粉(fen)碎(sui),稱取(qu)約 0.01g 樣本(ben),加(jia)入(ru) 1ml 提(ti)取(qu)液,充分勻漿(jiang)。80℃水(shui)浴(yu)提(ti)取(qu) 20min,冷(leng)卻後(hou) 10000g
離心(xin) 10min,取(qu)上(shang)清(qing)待(dai)測(ce)。
測(ce)定(ding)步驟:
1、分(fen)光光度計(ji)預(yu)熱(re) 30min 以上(shang),調(tiao)節波長至 570nm,蒸餾(liu)水(shui)調零(ling)。
2、工作(zuo)液的配制:取(qu) 10ml 試(shi)劑(ji)壹與 10ml 試(shi)劑(ji)二混合(he)搖(yao)勻,取(qu)上(shang)清(qing)備用(yong)。用(yong)不(bu)完的試(shi)劑(ji) 4℃保(bao)存(cun)。
3、在(zai)有(you)蓋EP 管(guan)中加(jia)入(ru)下(xia)列試(shi)劑(ji):
試(shi)劑(ji)名稱(cheng)(μl) | 測(ce)定(ding)管(guan) | 空(kong)白(bai)管(guan) |
樣本(ben) | 200 | |
提(ti)取(qu)液 | 200 | |
工作(zuo)液 | 400 | 400 |
混(hun)勻,80℃水(shui)浴(yu) 30min(蓋(gai)緊,以(yi)防止水(shui)分散(san)失),冷(leng)卻至常溫(wen)。
試(shi)劑(ji)四 | 600 | 600 |
混(hun)勻,取(qu) 1000μl 至 1ml 玻(bo)璃比(bi)色皿中,於 530nm 波長處(chu)記錄吸光值(zhi)A。△A=A 測(ce)定(ding)管(guan)-A 空(kong)白(bai)管(guan)。空(kong)白(bai)管(guan)只(zhi)要(yao)做(zuo)壹管(guan)。
賴(lai)an酸含量計(ji)算(suan):
標(biao)準條件下測(ce)定(ding)回歸方程(cheng)為(wei) y = 0.0062x - 0.0212;x 為(wei)賴(lai)an酸含量(µg/ml),y 為(wei)吸光值(zhi)。
按照(zhao)蛋白(bai)濃(nong)度計(ji)算(suan)
賴(lai)an酸含量(µg/mg prot)=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(Cpr ×V1)×1.1515
=185.73×(△A+0.0212) ÷Cpr
按照(zhao)樣本(ben)質(zhi)量計(ji)算(suan)
賴(lai)an酸含量(µg/g 幹重(zhong))=[(△A +0.0212)÷0.0062×V1]÷(W ×V1÷V2)×1.1515
=185.73×(△A+0.0212) ÷W
V1:加(jia)入(ru)反(fan)應(ying)體系(xi)中樣本(ben)體(ti)積,0.2ml;V2:加(jia)入(ru)提(ti)取(qu)液體積,1 ml; Cpr:樣本(ben)蛋白(bai)質(zhi)濃度,mg/ml; W:樣本(ben)質(zhi)量,g;1.1515,校正(zheng)系(xi)數。
賴(lai)an酸lysine Lys含量測(ce)定(ding)試(shi)劑(ji)盒(he) 氨基酸