糖原(yuan)是由葡(pu)萄(tao)糖單位構(gou)成的(de)高分(fen)子(zi)多(duo)糖，是糖(tang)的(de)主(zhu)要的(de)儲存(cun)形式之壹(yi)，主(zhu)要貯(zhu)存(cun)在肝和肌(ji)肉(rou)中作為(wei)備用能量，分別(bie)稱(cheng)為(wei)肝(gan)糖(tang)原(yuan)和肌(ji)糖(tang)原(yuan)。肝糖(tang)原(yuan)可(ke)調節(jie)血(xue)糖濃度，當血(xue)糖升高(gao)時(shi)可(ke)在肝臟合(he)成糖原(yuan)，血(xue)糖降低(di)時，肝糖(tang)原(yuan)則分解為葡(pu)萄(tao)糖以(yi)補充(chong)血(xue)糖。
糖原(yuan)含(han)量(liang)試(shi)劑(ji)盒(he) 糖(tang)代(dai)謝

糖(tang)原(yuan)含(han)量(liang)試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)書

分(fen)光(guang)光(guang)度法 50 管/48 樣

糖(tang)原(yuan)含(han)量(liang)試(shi)劑(ji)盒(he) 糖(tang)代(dai)謝

正(zheng)式測(ce)定(ding)前(qian)務必(bi)取 2-3 個預(yu)期差異(yi)較大(da)的(de)樣本做預(yu)測(ce)定(ding)測(ce)定(ding)意(yi)義(yi)：

糖(tang)原(yuan)是由葡(pu)萄(tao)糖單位構(gou)成的(de)高分(fen)子(zi)多(duo)糖，是糖(tang)的(de)主(zhu)要的(de)儲存(cun)形式之壹(yi)，主(zhu)要貯(zhu)存(cun)在肝和肌(ji)肉(rou)中作為(wei)備用能量，分別(bie)稱(cheng)為(wei)肝(gan)糖(tang)原(yuan)和肌(ji)糖(tang)原(yuan)。肝糖(tang)原(yuan)可(ke)調節(jie)血(xue)糖濃度，當血(xue)糖升高(gao)時(shi)可(ke)在肝臟合(he)成糖原(yuan)，血(xue)糖降低(di)時，肝糖(tang)原(yuan)則分解為葡(pu)萄(tao)糖以(yi)補充(chong)血(xue)糖。因此，肝糖原(yuan)對(dui)維持血(xue)糖的(de)相(xiang)對(dui)平衡(heng)十(shi)分重(zhong)要。肌(ji)糖(tang)原(yuan)是肌(ji)肉中糖(tang)的(de)儲存(cun)形式,在劇烈(lie)運(yun)動消(xiao)耗(hao)大量(liang)血(xue)糖時，肌(ji)糖(tang)原(yuan)不能(neng)直接分解(jie)成(cheng)血(xue)糖，必(bi)須先分解產(chan)生乳酸(suan),隨(sui)血(xue)液循環(huan)到肝(gan)臟,通(tong)過糖異(yi)生轉變(bian)為(wei)肝(gan)糖原(yuan)或葡(pu)萄(tao)糖。

測(ce)定(ding)原(yuan)理：

蒽(en)酮法。利用強jian性(xing)提取液提取糖原(yuan)，在強suan性(xing)條件(jian)下(xia)利用蒽酮顯色劑(ji)測(ce)定(ding)糖(tang)原(yuan)含(han)量(liang)。

組(zu)成(cheng)：

試(shi)劑(ji)壹(yi)：0.1mg/ml 的(de)葡(pu)萄(tao)糖標準(zhun)液 10ml×1 瓶(ping)，4℃保存(cun)；

自備儀器和用品(pin)：

可(ke)見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度計、水(shui)浴(yu)鍋、可(ke)調式移(yi)液(ye)器、1ml 玻璃比色皿、濃(nong)硫(liu)酸(suan)（不允許快(kuai)遞）和蒸餾(liu)水(shui)。

試(shi)劑(ji)的(de)組成(cheng)和配(pei)制：

提(ti)取液：液體 50ml×1 瓶(ping)，4℃保存(cun)；

試(shi)劑(ji)壹(yi)：0.1mg/ml 的(de)葡(pu)萄(tao)糖標準(zhun)液 10ml×1 瓶(ping)，4℃保存(cun)；試(shi)劑(ji)二：粉(fen)劑(ji)×1 瓶(ping)， 4℃保存(cun)；

糖(tang)原(yuan)提取：

1﹑細胞(bao)或(huo)細菌(jun)：收(shou)集 500~1000 萬細菌(jun)或(huo)細胞(bao)到(dao)離心(xin)管內，離心(xin)後(hou)棄(qi)上(shang)清(qing)；加(jia)入(ru) 0.75ml 提取液超(chao)聲(sheng)波破碎(sui)細菌(jun)或(huo)細胞(bao)（功率(lv) 20％或 200W，超(chao)聲(sheng) 3s，間隔 10s，重(zhong)復 30 次(ci)）；轉移(yi)至 10ml 試(shi)管中，95℃水(shui)浴(yu) 20min（蓋緊(jin)，防(fang)止水(shui)分散失），隔 5min 振(zhen)搖(yao)試管 1 次(ci)，使充(chong)分混勻；取出(chu)試管冷卻(que)後(hou)，用蒸餾(liu)水(shui)定容到(dao) 5ml，混勻，8000g 25℃離心(xin) 10min，取上(shang)清(qing)液(ye)待測(ce)。

2﹑組(zu)織：稱取 0.1~0.2g 樣品(pin)，加(jia)入 0.75ml 提(ti)取液充(chong)分勻漿(jiang)；轉移(yi)至 10ml 試(shi)管中；95℃水(shui)浴(yu) 20min（蓋緊(jin)，防(fang)止水(shui)分散失），隔 5min 振(zhen)搖(yao)試管 1 次(ci)，使充(chong)分混勻；待組(zu)織全部(bu)溶(rong)解後(hou)，取出(chu)試管冷卻(que)後(hou)，用蒸餾(liu)水(shui)定容到(dao) 5ml，混勻，8000g 25℃離心(xin) 10min，取上(shang)清(qing)液(ye)待測(ce)。

步(bu)驟(zhou)和加(jia)樣表:

1、分(fen)光(guang)光(guang)度計預(yu)熱(re) 30min 以(yi)上(shang)，調節(jie)波長(chang)至 620nm，蒸餾(liu)水(shui)調零(ling)。

2、調節(jie)水(shui)浴(yu)鍋至 95℃。

3、試(shi)劑(ji)二工(gong)作液(ye)的(de)配(pei)制：在試劑(ji)二中倒(dao)入 10ml 蒸餾(liu)水(shui)，緩慢倒(dao)入 40ml 濃硫酸，充(chong)分溶(rong)解混勻後(hou)使(shi)用；用不完的(de)試劑(ji) 4℃保(bao)存(cun)壹(yi)周；

4、加(jia)樣表（在EP 管中反(fan)應(ying)）：

混勻，95℃水(shui)浴(yu) 10min（蓋緊(jin)，防(fang)止水(shui)分散失），冷(leng)卻(que)，於(yu) 620nm 波長(chang)處，以(yi)蒸餾(liu)水(shui)調零(ling)，分(fen)別(bie)讀(du)取空白(bai)管、標準(zhun)管和測(ce)定(ding)管吸光(guang)度，分別(bie)記(ji)為A1、A2 和A3。

註意(yi)：1、空(kong)白(bai)管和標準(zhun)管只要測(ce)壹(yi)次(ci)。

2、如(ru)果(guo)A3-A1 大(da)於(yu) 2，需(xu)要將(jiang)樣本用蒸餾(liu)水(shui)稀釋(shi)，計算公式中乘(cheng)以相(xiang)應(ying)稀釋(shi)倍數。

糖(tang)原(yuan)含(han)量(liang)的(de)計算：

1、按(an)照樣本質(zhi)量計算

糖(tang)原(yuan)（mg/g 鮮重(zhong)）＝1.11×(C 標準(zhun)×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)= 0.555×(A3-A1)÷（A2-A1)÷W

2、按(an)照蛋白(bai)質(zhi)含(han)量(liang)計(ji)算

糖(tang)原(yuan)(mg/mg prot)＝1.11×(C 標準(zhun)×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)=0.111×(A3-A1) ÷（A2-A1) ÷Cpr

1.11：是(shi)此法測(ce)得(de)葡(pu)萄(tao)糖含(han)量(liang)換(huan)算為(wei)糖(tang)原(yuan)含(han)量(liang)的(de)常(chang)數(shu)，即(ji) 111ug 糖原(yuan)用蒽酮試劑(ji)顯(xian)色(se)相(xiang)當(dang)於(yu) 100ug 葡(pu)萄(tao)糖用蒽酮所試劑(ji)顯(xian)示(shi)的(de)顏色(se)；C 標準(zhun)管：標準(zhun)管濃度，0.1mg/ml；V1：加入反應(ying)體系中糖(tang)原(yuan)提取液體積，0.25ml； V2：加(jia)入(ru)提取液體積，5ml； Cpr：樣本蛋白(bai)質(zhi)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重(zhong)，g。

註意(yi)：最(zui)di檢(jian)測(ce)限為 10ng/g 鮮重(zhong)或 0.1ng/ mg prot。

糖(tang)原(yuan)含(han)量(liang)試(shi)劑(ji)盒(he) 糖(tang)代(dai)謝