木(mu)聚(ju)糖(tang)酶(EC 3.2.1.8)主要(yao)由(you)微生物(wu)產生(sheng)，能催(cui)化水解木(mu)聚(ju)糖(tang)，也(ye)被(bei)稱為戊聚糖(tang)酶或半纖(xian)維素(su)酶，可(ke)分(fen)解(jie)釀(niang)造或飼(si)料(liao)工業堿的(de)原料(liao)細胞(bao)壁(bi)以及(ji)β+葡(pu)聚(ju)糖，降(jiang)低(di)釀(niang)造堿物(wu)料(liao)的粘度(du)，促進有(you)效物(wu)質的(de)釋放(fang)，以及(ji)降(jiang)低(di)飼(si)料(liao)堿的(de)非(fei)澱粉(fen)多糖，促進營養物(wu)質的(de)吸(xi)收(shou)利(li)用(yong)，因而廣(guang)泛的應(ying)用(yong)於釀(niang)造和飼(si)料(liao)工業堿，BAX 壹(yi)般(ban)分(fen)離(li)自最(zui)適(shi)生長(chang)pH 為 9 +11 的微(wei)生(sheng)物(wu)。
堿性(xing)木(mu)聚(ju)糖(tang)酶測定試(shi)劑盒(he) 糖(tang)代(dai)謝

堿性(xing)木(mu)聚(ju)糖(tang)酶（Basic Xylanase，BAX）測定試(shi)劑盒(he)說明(ming)書(shu)

微(wei)量(liang)法 100 管(guan)/48 樣(yang)

堿性(xing)木(mu)聚(ju)糖(tang)酶測定試(shi)劑盒(he) 糖(tang)代(dai)謝

正(zheng)式(shi)測定前(qian)務必(bi)取(qu) 2-3 個預(yu)期差(cha)異(yi)較大(da)的樣(yang)本(ben)做預(yu)測定測定意義：

木(mu)聚(ju)糖(tang)酶(EC 3.2.1.8)主要(yao)由(you)微生物(wu)產生(sheng)，能催(cui)化水解木(mu)聚(ju)糖(tang)，也(ye)被(bei)稱為戊聚糖(tang)酶或半纖(xian)維素(su)酶，可(ke)分(fen)解(jie)釀(niang)造或飼(si)料(liao)工業堿的(de)原料(liao)細胞(bao)壁(bi)以及(ji)β+葡(pu)聚(ju)糖，降(jiang)低(di)釀(niang)造堿物(wu)料(liao)的粘度(du)，促進有(you)效物(wu)質的(de)釋放(fang)，以及(ji)降(jiang)低(di)飼(si)料(liao)堿的(de)非(fei)澱粉(fen)多糖，促進營養物(wu)質的(de)吸(xi)收(shou)利(li)用(yong)，因而廣(guang)泛的應(ying)用(yong)於釀(niang)造和飼(si)料(liao)工業堿，BAX 壹(yi)般(ban)分(fen)離(li)自最(zui)適(shi)生長(chang)pH 為 9 +11 的微(wei)生(sheng)物(wu)。

測(ce)定原理：

BAX 在堿性(xing)環(huan)境堿催(cui)化木(mu)聚(ju)糖(tang)降(jiang)解(jie)成(cheng)還原性(xing)寡(gua)糖和(he)單糖，在沸(fei)水浴(yu)條(tiao)件下進壹(yi)步與 3,5+二(er)硝基水楊酸(suan)發生(sheng)顯色反應(ying)，在 540nm 處(chu)有(you)特(te)征(zheng)吸(xi)收(shou)峰(feng)，反應(ying)液(ye)顏色的深淺與酶解產生(sheng)的還(hai)原糖量(liang)成(cheng)正(zheng)比(bi)，通過測(ce)定反應(ying)液(ye)在 540nm 吸(xi)光值(zhi)增加速率(lv)，可(ke)計(ji)算BAX 活(huo)力。

組成(cheng)：

試(shi)劑壹(yi)：液體(ti) 10ml×1 瓶(ping)，4℃避(bi)光保存。（若(ruo)出(chu)現(xian)白(bai)色絮(xu)狀或顆粒(li)狀沈澱，可(ke) 60℃加熱(re)溶(rong)解後(hou)使(shi)用(yong)）。

自備儀器(qi)和(he)用(yong)品：

天(tian)平、低(di)溫(wen)離心(xin)機(ji)、恒(heng)溫水浴(yu)鍋(guo)，可(ke)見(jian)分(fen)光光度計(ji)/酶標儀、微(wei)量(liang)石英(ying)比(bi)色(se)皿/96 孔板和(he)蒸(zheng)餾(liu)水。

粗(cu)酶提取：

發(fa)酵(jiao)液：發酵液於(yu) 8000g，4℃，離(li)心(xin) 15min，取(qu)上(shang)清(qing)，作(zuo)為待測樣(yang)品。

酶幹粉(fen)：稱約(yue) 0.1mg，加 1ml 緩沖液溶(rong)解待測。

組織樣(yang)本(ben)：按(an)照(zhao)組織質量(liang)（g）：提取(qu)液體(ti)積(ji)(ml)為 1：5~10 的比(bi)例（建議(yi)稱取(qu)約(yue) 0.1g 組織，加入 1ml緩沖液）進行(xing)冰(bing)浴(yu)勻(yun)漿，然(ran)後(hou) 8000g，4℃，離心(xin) 10min，取(qu)上(shang)清(qing)待測。

測(ce)定操(cao)作(zuo)表：

1、分(fen)光光度計(ji)/酶標儀預(yu)熱(re) 30min，調(tiao)節(jie)波長(chang)至 540nm。

2、操(cao)作(zuo)表

BAX 計(ji)算公式：

用(yong)微量(liang)石英(ying)比(bi)色(se)皿測(ce)定的計(ji)算公式如(ru)下

標準曲線：y = 2.8432x - 0.0293，R2 = 0.9985

按(an)液體(ti)體(ti)積(ji)活(huo)力(li)計(ji)算：

酶活定義：50℃，pH9.0 條件下，每(mei)毫(hao)升(sheng)液(ye)體(ti)樣(yang)本(ben)每(mei)分(fen)鐘(zhong)分(fen)解(jie)木(mu)聚(ju)糖(tang)產生(sheng) 1nmol 還原糖所(suo)需(xu)的酶量(liang)為壹(yi)個堿性(xing)木(mu)聚(ju)糖(tang)酶的活力單位(wei)。

BAX 活(huo)力(li)（nmol/min/ml）= （ΔA+0.0293）÷2.8432÷150÷T×稀釋倍數(shu)×106

= 391× (ΔA+0.0293)

按(an)蛋(dan)白(bai)濃(nong)度計(ji)算：

酶活定義：50℃，pH9.0 條件下，每(mei)毫(hao)克(ke)蛋(dan)白(bai)每(mei)分(fen)鐘(zhong)分(fen)解(jie)木(mu)聚(ju)糖(tang)產生(sheng) 1nmol 還原糖所(suo)需(xu)的酶量(liang)為壹(yi)個堿性(xing)木(mu)聚(ju)糖(tang)酶的活力單位(wei)。

BAX 活(huo)力(li)（nmol/min/mg prot）= （ΔA +0.0293）÷2.8432÷150÷T×稀釋倍數(shu)×106÷Cpr

= 391×(ΔA +0.0293 ) ÷Cpr

按(an)鮮重(zhong)計(ji)算：

酶活定義：50℃，pH9.0 條件下，每(mei)克(ke)樣(yang)本(ben)每(mei)分(fen)鐘(zhong)分(fen)解(jie)木(mu)聚(ju)糖(tang)產生(sheng) 1nmol 還原糖所(suo)需(xu)的酶量(liang)為壹(yi)個堿性(xing)木(mu)聚(ju)糖(tang)酶的活力單位(wei)。

BAX 活(huo)力(li)（nmol/min/g 鮮重(zhong)）= （ΔA +0.0293）÷2.8432÷150÷T×稀釋倍數(shu)×106÷W

= 391×(ΔA +0.0293 ) ÷W

150：木(mu)糖(tang)的(de)分(fen)子量(liang)；T：反應(ying)時間(jian)，30min；稀(xi)釋倍數(shu)=V 反總(zong)÷V 樣(yang)=300µL÷60µL=5；

106：轉(zhuan)化因(yin)子，即(ji) 1mg/ml=106ng/ml；Cpr：樣(yang)本(ben)蛋(dan)白(bai)濃(nong)度，mg/ml；W：樣(yang)本(ben)質量(liang)，g。

用(yong) 96 孔板測(ce)定的計(ji)算公式如(ru)下

標準曲線：y = 1.4216x - 0.0293，R2 = 0.9985

按(an)液體(ti)體(ti)積(ji)活(huo)力(li)計(ji)算：

酶活定義：50℃，pH9.0 條件下，每(mei)毫(hao)升(sheng)液(ye)體(ti)樣(yang)本(ben)每(mei)分(fen)鐘(zhong)分(fen)解(jie)木(mu)聚(ju)糖(tang)產生(sheng) 1nmol 還原糖所(suo)需(xu)的酶量(liang)為壹(yi)個堿性(xing)木(mu)聚(ju)糖(tang)酶的活力單位(wei)。

BAX 活(huo)力(li)（nmol/min/ml）= （ΔA+0.0293）÷1.4216÷150÷T×稀釋倍數(shu)×106

= 782× (ΔA+0.0293)

按(an)蛋(dan)白(bai)濃(nong)度計(ji)算：

酶活定義：50℃，pH9.0 條件下，每(mei)毫(hao)克(ke)蛋(dan)白(bai)每(mei)分(fen)鐘(zhong)分(fen)解(jie)木(mu)聚(ju)糖(tang)產生(sheng) 1nmol 還原糖所(suo)需(xu)的酶量(liang)為壹(yi)個堿性(xing)木(mu)聚(ju)糖(tang)酶的活力單位(wei)。

BAX 活(huo)力(li)（nmol/min/mg prot）= （ΔA +0.0293）÷1.4216÷150÷T×稀釋倍數(shu)×106÷Cpr

= 782×(ΔA +0.0293 ) ÷Cpr

按(an)鮮重(zhong)計(ji)算：

酶活定義：50℃，pH9.0 條件下，每(mei)克(ke)樣(yang)本(ben)每(mei)分(fen)鐘(zhong)分(fen)解(jie)木(mu)聚(ju)糖(tang)產生(sheng) 1nmol 還原糖所(suo)需(xu)的酶量(liang)為壹(yi)個堿性(xing)木(mu)聚(ju)糖(tang)酶的活力單位(wei)。

BAX 活(huo)力(li)（nmol/min/g 鮮重(zhong)）= （ΔA +0.0293）÷1.4216÷150÷T×稀釋倍數(shu)×106÷W

= 782×(ΔA +0.0293 ) ÷W

150：木(mu)糖(tang)的(de)分(fen)子量(liang)；T：反應(ying)時間(jian)，30min；稀(xi)釋倍數(shu)=V 反總(zong)÷V 樣(yang)=300µL÷60µL=5；

106：轉(zhuan)化因(yin)子，即(ji) 1mg/ml=106ng/ml；Cpr：樣(yang)本(ben)蛋(dan)白(bai)濃(nong)度，mg/ml；W：樣(yang)本(ben)質量(liang)，g。

註(zhu)意(yi)事項(xiang)：

吸(xi)光度變(bian)化應(ying)該(gai)控制在 0.01～0.8 之間(jian)，否(fou)則(ze)加大(da)樣(yang)品量(liang)或稀(xi)釋樣(yang)品，註(zhu)意(yi)計(ji)算公式中(zhong)參(can)與計(ji)算的(de)稀釋倍數(shu)要(yao)相應(ying)改(gai)變(bian)；也(ye)可(ke)以延長(chang)或者縮短(duan)反應(ying)時間(jian)。

試(shi)劑盒(he) 2+8℃保(bao)存(cun)，保質期 3 個月(yue)，建(jian)議盡快使(shi)用(yong)。

堿性(xing)木(mu)聚(ju)糖(tang)酶測定試(shi)劑盒(he) 糖(tang)代(dai)謝