木(mu)聚糖(tang)酶(EC 3.2.1.8)主要由微生(sheng)物(wu)產(chan)生(sheng)，能(neng)催(cui)化(hua)水(shui)解(jie)木聚糖(tang)，也(ye)被稱(cheng)為(wei)戊聚糖(tang)酶或(huo)半(ban)纖(xian)維(wei)素酶，可(ke)分(fen)解釀(niang)造或(huo)飼料(liao)工(gong)業中的原料(liao)細(xi)胞(bao)壁(bi)以(yi)及(ji)β-葡(pu)聚糖(tang)，降低(di)釀(niang)造中(zhong)物(wu)料(liao)的粘度(du)，促(cu)進(jin)有效(xiao)物(wu)質的釋放，以(yi)及(ji)降低(di)飼料(liao)中(zhong)的非澱粉(fen)多糖(tang)，促進(jin)營養(yang)物(wu)質的吸收利(li)用(yong)，因而廣泛的應用(yong)於釀(niang)造和(he)飼料(liao)工(gong)業中，ACX 壹(yi)般(ban)分(fen)離自(zi)耐酸(suan)的真(zhen)菌，細菌(jun)及(ji)部分(fen)黴(mei)菌。
酸(suan)性(xing)木(mu)聚糖(tang)酶測(ce)定試(shi)劑盒 糖(tang)代謝(xie)

酸(suan)性(xing)木(mu)聚糖(tang)酶（Acidic Xylanase，ACX）測(ce)定試(shi)劑盒說明書(shu)

微(wei)量(liang)法(fa) 100 管(guan)/48 樣

酸(suan)性(xing)木(mu)聚糖(tang)酶測(ce)定試(shi)劑盒 糖(tang)代謝(xie)

正式(shi)測(ce)定前(qian)務必取 2-3 個(ge)預(yu)期(qi)差異(yi)較(jiao)大的樣本(ben)做(zuo)預(yu)測(ce)定測(ce)定意(yi)義：

木(mu)聚糖(tang)酶(EC 3.2.1.8)主(zhu)要由微生(sheng)物(wu)產(chan)生(sheng)，能(neng)催(cui)化(hua)水(shui)解(jie)木聚糖(tang)，也(ye)被稱(cheng)為(wei)戊聚糖(tang)酶或(huo)半(ban)纖(xian)維(wei)素酶，可(ke)分(fen)解釀(niang)造或(huo)飼料(liao)工(gong)業中的原料(liao)細(xi)胞(bao)壁(bi)以(yi)及(ji)β-葡(pu)聚糖(tang)，降低(di)釀(niang)造中(zhong)物(wu)料(liao)的粘度(du)，促(cu)進(jin)有效(xiao)物(wu)質的釋放，以(yi)及(ji)降低(di)飼料(liao)中(zhong)的非澱粉(fen)多(duo)糖(tang)，促(cu)進(jin)營養(yang)物(wu)質的吸收利(li)用(yong)，因而廣泛的應用(yong)於釀(niang)造和(he)飼料(liao)工(gong)業中，ACX 壹(yi)般(ban)分(fen)離自(zi)耐酸(suan)的真(zhen)菌，細菌(jun)及(ji)部分(fen)黴(mei)菌。

測(ce)定原(yuan)理：

ACX 在(zai)酸性(xing)環境下(xia)能(neng)將(jiang)木(mu)聚糖(tang)降解成(cheng)還原性(xing)寡(gua)糖(tang)和(he)單(dan)糖(tang)，進(jin)壹(yi)步(bu)在(zai)沸(fei)水浴(yu)條件下與(yu) 3,5-二(er)硝基水(shui)楊(yang)酸(suan)發(fa)生(sheng)顯(xian)色反應，在(zai) 540nm 處有(you)特(te)征(zheng)吸(xi)收峰(feng)，反應液(ye)顏色的深淺(qian)與(yu)酶解產(chan)生(sheng)的還原(yuan)糖(tang)量(liang)成(cheng)正比(bi)，通過測(ce)定反應液(ye)在(zai) 540nm 吸光(guang)值(zhi)增(zeng)加(jia)速(su)率，可計(ji)算(suan)ACX 活(huo)力(li)。

組成：

試(shi)劑壹(yi)：液(ye)體 10ml×1 瓶(ping)，4℃避(bi)光(guang)保存。（若(ruo)出(chu)現(xian)白(bai)色絮狀或(huo)顆(ke)粒(li)狀(zhuang)沈澱，可(ke) 60℃加(jia)熱(re)溶解(jie)後使(shi)用(yong)）。

自(zi)備(bei)儀(yi)器和(he)用(yong)品(pin)：

天(tian)平、低(di)溫離(li)心(xin)機、恒(heng)溫(wen)水(shui)浴(yu)鍋(guo)，可見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)/酶標(biao)儀(yi)、微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比(bi)色皿(min)/96 孔板和(he)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)。

粗(cu)酶(mei)提取：

發(fa)酵(jiao)液(ye)：發(fa)酵(jiao)液(ye)於 8000g，4℃，離(li)心(xin) 15min，取上(shang)清(qing)，作(zuo)為(wei)待測(ce)樣品(pin)。

酶(mei)幹粉：稱約 0.1mg，加(jia) 1ml 緩(huan)沖(chong)液(ye)溶解(jie)待測(ce)。

組織樣本(ben)：按照組織質量(liang)（g）：提(ti)取液(ye)體積(ji)(ml)為(wei) 1：5~10 的比(bi)例(li)（建議稱(cheng)取約(yue) 0.1g 組織，加(jia)入(ru) 1ml緩(huan)沖(chong)液(ye)）進(jin)行冰(bing)浴(yu)勻漿，然(ran)後 8000g，4℃，離(li)心(xin) 10min，取上(shang)清(qing)待測(ce)。

測(ce)定操作(zuo)表：

1、分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)/酶(mei)標(biao)儀(yi)預(yu)熱(re) 30min，調(tiao)節波(bo)長至 540nm。

2、操作(zuo)表

ACX 計(ji)算(suan)公式(shi)：

用(yong)微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比(bi)色皿(min)測(ce)定的計(ji)算(suan)公式(shi)如(ru)下

標(biao)準(zhun)曲(qu)線：y = 2.5554x - 0.002 ，R2 = 0.9983

按液(ye)體體(ti)積(ji)活(huo)力(li)計(ji)算(suan)：

酶(mei)活(huo)定(ding)義：50℃，pH4.8 條件下，每(mei)毫升(sheng)液(ye)體樣本(ben)每分(fen)鐘分(fen)解木(mu)聚糖(tang)產(chan)生(sheng) 1nmol 還(hai)原糖(tang)所需(xu)的酶量(liang)為(wei)壹(yi)個(ge)酸(suan)性(xing)木(mu)聚糖(tang)酶的活(huo)力(li)單(dan)位(wei)。

ACX 活(huo)力(li)（nmol/min/ml）= （ΔA+0.002）÷2.5554÷150÷T×稀釋(shi)倍(bei)數(shu)×106

= 435× (ΔA+0.002)

按蛋白濃度(du)計(ji)算(suan)：

酶(mei)活(huo)定(ding)義：50℃，pH4.8 條件下，每(mei)毫克(ke)蛋白每分(fen)鐘分(fen)解木(mu)聚糖(tang)產(chan)生(sheng) 1nmol 還(hai)原糖(tang)所需(xu)的酶量(liang)為(wei)壹(yi)個(ge)酸(suan)性(xing)木(mu)聚糖(tang)酶的活(huo)力(li)單(dan)位(wei)。

ACX 活(huo)力(li)（nmol/min/mg prot）= （ΔA +0.002）÷2.5554÷150÷T×稀釋(shi)倍(bei)數(shu)×106÷Cpr

= 435×(ΔA +0.002 ) ÷Cpr

按鮮重計(ji)算(suan)：

酶(mei)活(huo)定(ding)義：50℃，pH4.8 條件下，每(mei)克(ke)樣本(ben)每分(fen)鐘分(fen)解木(mu)聚糖(tang)產(chan)生(sheng) 1nmol 還(hai)原糖(tang)所需(xu)的酶量(liang)為(wei)壹(yi)個(ge)酸(suan)性(xing)木(mu)聚糖(tang)酶的活(huo)力(li)單(dan)位(wei)。

ACX 活(huo)力(li)（nmol/min/g 鮮重）= （ΔA +0.002）÷2.5554÷150÷T×稀釋(shi)倍數(shu)×106÷W

= 435×(ΔA +0.002 ) ÷W

150：木(mu)糖(tang)的分(fen)子量(liang)；T：反應時(shi)間(jian)，30min；稀釋倍數=V 反總÷V 樣=300µL÷60µL=5；

106：轉(zhuan)化因子，即(ji) 1mg/ml=106ng/ml；Cpr：樣本(ben)蛋白濃度(du)，mg/ml；W：樣本(ben)質量(liang)，g。

用(yong) 96 孔板測(ce)定的計(ji)算(suan)公式(shi)如(ru)下

標(biao)準(zhun)曲(qu)線：y = 1.2777x - 0.002 ，R2 = 0.9983

按液(ye)體體(ti)積(ji)活(huo)力(li)計(ji)算(suan)：

酶(mei)活(huo)定(ding)義：50℃，pH4.8 條件下，每(mei)毫升(sheng)液(ye)體樣本(ben)每分(fen)鐘分(fen)解木(mu)聚糖(tang)產(chan)生(sheng) 1nmol 還(hai)原糖(tang)所需(xu)的酶量(liang)為(wei)壹(yi)個(ge)酸(suan)性(xing)木(mu)聚糖(tang)酶的活(huo)力(li)單(dan)位(wei)。

ACX 活(huo)力(li)（nmol/min/ml）= （ΔA+0.002）÷1.2777÷150÷T×稀釋(shi)倍(bei)數(shu)×106

= 869.6× (ΔA+0.002)

按蛋白濃度(du)計(ji)算(suan)：

酶(mei)活(huo)定(ding)義：50℃，pH4.8 條件下，每(mei)毫克(ke)蛋白每分(fen)鐘分(fen)解木(mu)聚糖(tang)產(chan)生(sheng) 1nmol 還(hai)原糖(tang)所需(xu)的酶量(liang)為(wei)壹(yi)個(ge)酸(suan)性(xing)木(mu)聚糖(tang)酶的活(huo)力(li)單(dan)位(wei)。

ACX 活(huo)力(li)（nmol/min/mg prot）= （ΔA +0.002）÷1.2777÷150÷T×稀釋(shi)倍(bei)數(shu)×106÷Cpr

= 869.6×(ΔA +0.002 ) ÷Cpr

按鮮重計(ji)算(suan)：

酶(mei)活(huo)定(ding)義：50℃，pH4.8 條件下，每(mei)克(ke)樣本(ben)每分(fen)鐘分(fen)解木(mu)聚糖(tang)產(chan)生(sheng) 1nmol 還(hai)原糖(tang)所需(xu)的酶量(liang)為(wei)壹(yi)個(ge)酸(suan)性(xing)木(mu)聚糖(tang)酶的活(huo)力(li)單(dan)位(wei)。

ACX 活(huo)力(li)（nmol/min/g 鮮重）= （ΔA +0.002）÷1.2777÷150÷T×稀釋(shi)倍數(shu)×106÷W

= 869.6×(ΔA +0.002 ) ÷W

150：木(mu)糖(tang)的分(fen)子量(liang)；T：反應時(shi)間(jian)，30min；稀釋倍數=V 反總÷V 樣=300µL÷60µL=5；

106：轉(zhuan)化因子，即(ji) 1mg/ml=106ng/ml；Cpr：樣本(ben)蛋白濃度(du)，mg/ml；W：樣本(ben)質量(liang)，g。

註(zhu)意(yi)事項：

吸(xi)光(guang)度(du)變(bian)化(hua)應(ying)該控(kong)制在(zai) 0.01～0.8 之間(jian)，否則(ze)加(jia)大樣品(pin)量(liang)或(huo)稀釋樣品(pin)，註意(yi)計(ji)算(suan)公式(shi)中(zhong)參與(yu)計(ji)算(suan)的稀釋(shi)倍(bei)數要相應(ying)改(gai)變。

試(shi)劑盒 2-8℃保存，保質期(qi) 3 個(ge)月(yue)，建議盡(jin)快使用(yong)。

酸(suan)性(xing)木(mu)聚糖(tang)酶測(ce)定試(shi)劑盒 糖(tang)代謝(xie)