乳(ru)酸(suan)是(shi)生物體(ti)代謝(xie)過(guo)程(cheng)中重(zhong)要(yao)的中間(jian)產(chan)物，與(yu)糖(tang)代(dai)謝(xie)、脂(zhi)類代謝、蛋(dan)白質(zhi)代謝(xie)及細(xi)胞內能(neng)量(liang)代謝(xie)密切(qie)相關，乳酸(suan)含(han)量(liang)是(shi)評估糖(tang)元代(dai)謝的和(he)有氧(yang)代謝的重(zhong)要(yao)指(zhi)標(biao)。
乳酸(suan)含(han)量(liang)試(shi)劑(ji)盒(he) 三(san)羧(suo)酸(suan)

乳(ru)酸(suan)含(han)量(liang)（lactic acid，LA）試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明書(shu)

微量(liang)法 100T/48S

乳(ru)酸(suan)含(han)量(liang)試(shi)劑(ji)盒(he) 三(san)羧(suo)酸(suan)

正式(shi)測(ce)定(ding)前務必取(qu) 2-3 個(ge)預期差異較大(da)的樣(yang)本(ben)做預測(ce)定(ding)測(ce)定(ding)意(yi)義：

乳(ru)酸(suan)是(shi)生物體(ti)代謝(xie)過(guo)程(cheng)中重(zhong)要(yao)的中間(jian)產(chan)物，與(yu)糖(tang)代(dai)謝(xie)、脂(zhi)類代謝、蛋(dan)白質(zhi)代謝(xie)及細(xi)胞內能(neng)量(liang)代謝(xie)密切(qie)相關，乳酸(suan)含(han)量(liang)是(shi)評估糖(tang)元代(dai)謝的和(he)有氧(yang)代謝的重(zhong)要(yao)指(zhi)標(biao)。

測(ce)定(ding)原理：

乳(ru)酸(suan)在(zai)乳酸(suan)脫(tuo)氫(qing)酶的作用下生成(cheng)丙(bing)tong酸(suan)，同時(shi)使(shi) NAD⁺還(hai)原生成(cheng)NADH 和(he)H⁺，H⁺傳遞(di)給PMS 生成(cheng)的PMSH2 還(hai)原INT 生成(cheng)紅色(se)物質(zhi)，在(zai) 530nm 處有(you)特(te)征吸(xi)收峰(feng)。

組(zu)成(cheng)：

試(shi)劑(ji)三(san)：粉劑(ji)×1 支(zhi)，-20℃避光(guang)保存。臨(lin)用前加(jia)入 0.6ml 蒸(zheng)餾(liu)水充分(fen)溶解(jie)。試(shi)劑(ji)四(si)：粉劑(ji)×1 瓶(ping)，4℃避(bi)光(guang)保存。臨(lin)用前加(jia) 6ml 蒸(zheng)餾(liu)水充分(fen)溶解(jie)。

顯(xian)色液：臨(lin)用前根(gen)據用量(liang)按(an)照提(ti)取(qu)液(ye)（V）：試(shi)劑(ji)三(san)（V）：試(shi)劑(ji)四(si)（V）：試(shi)劑(ji)五(wu)（m）=1（ml)：0.3（ml)：3（ml)：15（mg）的比(bi)例(li)充分(fen)混(hun)勻。（註(zhu)意(yi)：現配現(xian)用，用多少配多少，在(zai)棕色(se)瓶(ping)中配制(zhi)，試(shi)劑(ji)盒(he)中帶(dai)有(you)4 個棕色(se)空(kong)瓶）

自(zi)備儀(yi)器和(he)用品：

天平(ping)、研(yan)缽、離(li)心機、可(ke)見分光(guang)光(guang)度(du)計/酶標(biao)儀(yi)、微量(liang)石(shi)英(ying)比色(se)皿/96 孔板(ban)、恒(heng)溫(wen)水浴鍋。

樣(yang)本處理：

組(zu)織(zhi)：按(an)照質(zhi)量(liang)（g）：提(ti)取(qu)液(ye)體(ti)積(ml)為(wei) 1：5~10 的比(bi)例(li)（建議(yi)稱取(qu)約(yue) 0.1g，加入 1ml 提(ti)取(qu)液(ye)）加(jia)入(ru)提(ti)取(qu)液(ye)，冰(bing)浴勻漿(jiang)後於 4℃，12000g 離(li)心(xin) 10min，取(qu)上(shang)清測(ce)定(ding)。

細(xi)胞：按(an)照細胞數(shu)量(liang)（104 個）：提(ti)取(qu)液(ye)體(ti)積（ml）為(wei) 500~1000：1 的比(bi)例(li)（建議(yi) 500 萬(wan)細胞加入(ru) 1ml提(ti)取(qu)液(ye)），冰(bing)浴超(chao)聲波(bo)破(po)碎(sui)細(xi)胞（功率(lv) 300w，超聲(sheng) 3 秒，間(jian)隔(ge) 7 秒，總時(shi)間(jian) 3min）；於 4℃，12000g離(li)心(xin) 10min，取(qu)上(shang)清測(ce)定(ding)。

血(xue)清：直(zhi)接測(ce)定(ding)。

測(ce)定(ding)操作：

註(zhu)意(yi)：標(biao)準對照管和(he)標(biao)準測(ce)定(ding)管只(zhi)需(xu)測(ce)定(ding)壹次，每個(ge)樣(yang)品測(ce)定(ding)管設(she)壹個(ge)樣品對照管

計算公式(shi)：

按(an)照蛋(dan)白含(han)量(liang)計算

LA 含(han)量(liang)（μmol/mg prot）= △A 樣(yang)÷△A 標(biao)×C 標(biao)÷ Cpr

= 2×△A 樣(yang)÷△A 標(biao)÷ Cpr

按(an)照樣本質(zhi)量(liang)計算

LA 含(han)量(liang)（μmol/g 鮮重(zhong)）= △A 樣(yang)÷△A 標(biao)×C 標(biao)÷ W

= 2×△A 樣(yang)÷△A 標(biao)÷ W

按(an)照細胞數(shu)量(liang)計算

LA 含(han)量(liang)（μmol/10⁴ cell）= △A 樣(yang)÷△A 標(biao)×C 標(biao)÷ 細(xi)胞數(shu)量(liang)

= 2×△A 樣(yang)÷△A 標(biao)÷ 細胞數(shu)量(liang)

按(an)照液體(ti)體(ti)積計算

LA 含(han)量(liang)（μmol/ml）= △A 樣(yang)÷△A 標(biao)×C 標(biao)

= 2×△A 樣(yang)÷△A 標(biao)

C 標(biao)：標(biao)準品濃度(du)，2mmol/L；W：樣本質(zhi)量(liang)，g/ml；Cpr：樣本(ben)蛋(dan)白質(zhi)濃度(du)，mg/ml

註(zhu)意(yi)事項：

若吸(xi)光(guang)值(zhi)超(chao)過(guo) 2，請進(jin)行(xing)適(shi)當的稀(xi)釋後再(zai)進(jin)行測(ce)定(ding)，並(bing)在(zai)計算公式(shi)中乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數(shu)。

最(zui)di檢(jian)出限(xian)為 1.8μmol/L。

乳(ru)酸(suan)含(han)量(liang)試(shi)劑(ji)盒(he) 三(san)羧(suo)酸(suan)