SBE（EC 2.4.1.18）主(zhu)要(yao)存在(zai)於(yu)植(zhi)物(wu)中(zhong)，是(shi)參(can)與(yu)支(zhi)鏈澱粉(fen)合(he)成(cheng)的(de)關(guan)鍵(jian)酶，測(ce)定SBE 活(huo)性在(zai)澱(dian)粉(fen)生(sheng)物(wu)合(he)成(cheng)、優質(zhi)農(nong)作物(wu)品(pin)種選育和(he)品(pin)質(zhi)遺傳(chuan)改良研究中(zhong)具(ju)有(you)重(zhong)要(yao)意義(yi)。
澱(dian)粉(fen)分支(zhi)酶試(shi)劑盒(he)

澱粉(fen)分支(zhi)酶（Starch branching enzyme，SBE）試(shi)劑盒(he)說(shuo)明書

分光光光度法 50 管/24 樣(yang)

澱粉(fen)分支(zhi)酶試(shi)劑盒(he)

正(zheng)式(shi)測(ce)定前(qian)務必取 2-3 個(ge)預(yu)期(qi)差異(yi)較(jiao)大(da)的(de)樣(yang)本做預測(ce)定測(ce)定意義(yi)：

SBE（EC 2.4.1.18）主(zhu)要(yao)存在(zai)於(yu)植(zhi)物(wu)中(zhong)，是(shi)參(can)與(yu)支(zhi)鏈澱粉(fen)合(he)成(cheng)的(de)關(guan)鍵(jian)酶，測(ce)定SBE 活(huo)性在(zai)澱(dian)粉(fen)生(sheng)物(wu)合(he)成(cheng)、優質(zhi)農(nong)作物(wu)品(pin)種選育和(he)品(pin)質(zhi)遺傳(chuan)改良研究中(zhong)具(ju)有(you)重(zhong)要(yao)意義(yi)。

測(ce)定原(yuan)理：

直(zhi)鏈澱粉(fen)和(he)碘(dian)結合(he)後(hou)在(zai) 660nm 有特(te)征光吸(xi)收(shou)，SBE 使(shi)直(zhi)鏈澱粉(fen)含(han)量減(jian)少，從(cong)而(er)降(jiang)低了澱粉(fen)-碘(dian)復(fu)合物(wu)在(zai) 660nm 吸(xi)收(shou)值，壹定時(shi)間內吸(xi)光度下(xia)降(jiang)的(de)百(bai)分率(lv)可以反(fan)映(ying)SBE 活(huo)性。

組成(cheng)：

試(shi)劑二臨用(yong)前(qian)每支(zhi)加(jia)入 1mL 蒸(zheng)餾(liu)水(shui)，95℃沸水浴(yu)充(chong)分溶(rong)解(jie)後(hou)備(bei)用(yong)；用(yong)不(bu)完(wan)的(de)試(shi)劑 4℃保(bao)存(cun)；

自備儀器(qi)和(he)用(yong)品(pin)：

可見(jian)分光光度計、水浴(yu)鍋(guo)、臺式(shi)離心(xin)機(ji)、可(ke)調式移(yi)液器、1 mL 玻(bo)璃(li)比(bi)色皿、研缽(bo)、冰(bing)、蒸(zheng)餾(liu)水(shui)

粗酶液制備(bei)：

按照(zhao)組織質(zhi)量（g）：提取液體積(ji)(mL)為(wei) 1：5~10 的比(bi)例（建議稱(cheng)取約(yue) 0.1g 組織，加入 1mL 提(ti)取液），進行(xing)冰(bing)浴(yu)勻(yun)漿。15000g 4℃離心(xin) 10min，取上(shang)清，置(zhi)冰上(shang)待測(ce)。

測(ce)定步驟：

混勻(yun)，37℃準(zhun)確保(bao)溫(wen) 20 min，95℃水浴(yu) 5min（蓋(gai)緊(jin)防(fang)止水(shui)分散(san)失），冷卻

混勻(yun)，室溫(wen)靜置(zhi) 10min，用(yong)蒸餾(liu)水(shui)調零，660nm 處讀(du)取各管(guan)吸(xi)光值。

註(zhu)意：

1、可以在(zai)不(bu)同(tong)對照(zhao)管中(zhong)加(jia)入不(bu)同(tong)樣(yang)品(pin)的(de)粗酶液，然後(hou)集(ji)中(zhong)進(jin)行(xing) 5min 95℃水(shui)浴(yu)處理。

2、試(shi)劑二如有沈澱(dian)，務必沸(fei)水(shui)浴(yu)溶(rong)解(jie)後(hou)使(shi)用(yong)。

SBE 活(huo)力單(dan)位的計算(suan)：

1、按照(zhao)蛋(dan)白濃(nong)度計算(suan)

單位的定義：以波(bo)長 660nm 的(de)吸(xi)光度下(xia)降(jiang)百(bai)分率(lv)表(biao)示(shi)，每(mei) mg 蛋(dan)白在反應體系中(zhong)每(mei)降(jiang)低 1％碘(dian)藍值為(wei)壹個(ge)酶活(huo)性單(dan)位。

SBE 活(huo)性(U/mg prot)=( A 對(dui)照(zhao)管-A 測(ce)定管)/A 對照(zhao)管÷Cpr ×100 2、按(an)照(zhao)樣(yang)本鮮(xian)重計算(suan)

單位的定義：以波(bo)長 660nm 的(de)吸(xi)光度下(xia)降(jiang)百(bai)分率(lv)表(biao)示(shi)，每(mei)g 組織在反(fan)應體系中(zhong)每(mei)降(jiang)低 1％碘(dian)藍值為(wei)壹個(ge)酶活(huo)性單(dan)位。

SBE 活(huo)性(U/g 鮮(xian)重)=(A 對(dui)照(zhao)管-A 測(ce)定管)/A 對照(zhao)管÷(W÷V 樣(yang)總(zong))×100

V 樣(yang)總(zong)：提取液總體積(ji)，1mL；Cpr：樣(yang)本蛋(dan)白質(zhi)濃(nong)度，mg/mL；W：樣(yang)品(pin)質(zhi)量，g。

澱粉(fen)分支(zhi)酶試(shi)劑盒(he)