澱(dian)fen酶(mei)負責(ze)水解澱(dian)粉，包(bao)括α-澱fen酶和(he)β-澱fen酶(mei)。α-澱fen酶(mei)(EC 3.2.1.1)可(ke)隨(sui)機地(di)作(zuo)用(yong)於(yu)澱粉中的(de)α-1,4-糖苷(gan)鍵，生(sheng)成(cheng)葡萄(tao)糖、麥(mai)芽糖、麥(mai)芽三糖、糊精(jing)等還(hai)原(yuan)糖，同(tong)時(shi)使澱粉的(de)粘度降低，因此又(you)稱為液化酶。
α-澱fen酶(mei)試(shi)劑盒 澱(dian)粉系(xi)列(lie)

α-澱fen酶（α-amylase，α-AL）試(shi)劑盒說(shuo)明(ming)書(shu)

分(fen)光(guang)光(guang)度法(fa) 50 管/48 樣

α-澱fen酶試(shi)劑盒 澱(dian)粉系(xi)列(lie)

正(zheng)式(shi)測(ce)定前務必取(qu) 2-3 個預期(qi)差(cha)異(yi)較(jiao)大(da)的(de)樣本(ben)做(zuo)預(yu)測(ce)定測(ce)定意義 V

澱fen酶(mei)負責(ze)水解澱(dian)粉，包(bao)括α-澱fen酶和(he)β-澱fen酶(mei)。α-澱fen酶(mei)(EC 3.2.1.1)可(ke)隨(sui)機地(di)作(zuo)用(yong)於(yu)澱粉中的(de)α-1,4-糖苷(gan)鍵，生(sheng)成(cheng)葡萄(tao)糖、麥(mai)芽糖、麥(mai)芽三糖、糊精(jing)等還(hai)原(yuan)糖，同(tong)時(shi)使澱粉的(de)粘度降低，因此又(you)稱為液化酶。

測(ce)定原(yuan)理：

還原(yuan)糖還(hai)原 3,5-二硝(xiao)基(ji)水楊酸生(sheng)成(cheng)棕紅色物質(zhi)。β-澱fen酶不耐(nai)熱，在 70℃鈍(dun)化 15min，從(cong)而測(ce)定α-澱(dian)fen酶(mei)活(huo)性(xing)。

組成(cheng)：

自備儀器(qi)和(he)用品(pin)：

可(ke)見分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)、恒(heng)溫(wen)水浴(yu)鍋、臺式(shi)離(li)心(xin)機(ji)、可(ke)調(tiao)式(shi)移液器、玻璃比(bi)色皿、研缽和(he)蒸餾(liu)水。

粗(cu)酶液制備：

組織(zhi)：稱取 0.1~0.2g 樣本（建(jian)議(yi)稱取約(yue) 0.1g 樣(yang)本），加 1 mL 蒸餾(liu)水勻(yun)漿；將(jiang)勻(yun)漿倒入離(li)心(xin)管(guan)中，在室溫(wen)下放置(zhi)提(ti)取(qu) 15min，每(mei)隔 5min 振(zhen)蕩(dang) 1 次，使其(qi)充分(fen)提(ti)取(qu)；3000g，25℃離(li)心(xin) 10min，吸(xi)取上清(qing)液並且(qie)加蒸餾(liu)水定容(rong)至 10 mL，搖勻(yun)，即(ji)為澱fen酶(mei)原液。

血清(qing)（漿(jiang)）：直接檢(jian)測(ce)。

操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)和(he)加樣表（在 1.5mLEP 管中依(yi)次(ci)加入下列(lie)試(shi)劑）：

1、分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)預熱(re) 30min 以(yi)上，調(tiao)節波(bo)長到 540 nm，蒸(zheng)餾(liu)水調(tiao)零。

2、試(shi)劑壹或(huo)試(shi)劑二 40℃預熱 10min

3、測(ce)定步(bu)驟(zhou)

70℃水浴(yu) 15min 左(zuo)右，冷卻

在 40℃恒(heng)溫(wen)水浴(yu)中準確(que)保(bao)溫(wen) 5min

混勻(yun)，95℃水浴(yu) 5min，冷卻， 540nm 處讀取(qu)對照(zhao)管和(he)測(ce)定管(guan)吸(xi)光(guang)度，計(ji)算ΔA=A 測(ce)定管(guan)-A 對照(zhao)管。

α-澱fen酶(mei)活性(xing)計算：

1、標(biao)準條件下測(ce)定回(hui)歸曲(qu)線為y=3.7215x -0.1778； x 為標(biao)準品(pin)濃(nong)度(du)（mg/mL），y 為吸(xi)光(guang)值。

2、α- 澱fen酶(mei)活性(xing)

按照(zhao)樣本(ben)質(zhi)量計(ji)算

單(dan)位定(ding)義：每(mei) g 組織(zhi)每(mei)分(fen)鐘催(cui)化(hua)產(chan)生(sheng) 1mg 還(hai)原糖定(ding)義為 1 個酶活(huo)力(li)單(dan)位。

α- 澱fen酶活(huo)性(xing)(mg/min/g 鮮重(zhong))=[(ΔA＋0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T=1.075×(ΔA＋

0.1778)÷W

按照(zhao)蛋白質(zhi)含量計(ji)算

單(dan)位定(ding)義：每(mei) mg 組織(zhi)蛋白每(mei)分(fen)鐘催(cui)化(hua)產(chan)生(sheng) 1mg 還(hai)原糖定(ding)義為 1 個酶活(huo)性(xing)單(dan)位。

α- 澱fen酶活(huo)性(xing)(mg/min/mg prot)= [(ΔA＋0.1778)÷3.7215×V 反總(zong)]÷（V 樣×Cpr）÷T=0.1075×(ΔA＋0.1778)÷Cpr

血清(qing)（漿(jiang)）樣(yang)本(ben)中α- 澱fen酶(mei)活性(xing)計算

單(dan)位定(ding)義：每(mei) mL 血清(qing)（漿(jiang)）每(mei)分(fen)鐘催(cui)化(hua)產(chan)生(sheng) 1mg 還(hai)原糖定(ding)義為 1 個酶活(huo)性(xing)單(dan)位。

α- 澱fen酶活(huo)性(xing)(mg/min/mL)= [(ΔA＋0.1778)÷3.7215×V 反總(zong)]÷V 樣÷T=0.1075×(ΔA＋0.1778)

V 反(fan)總(zong)：反應體(ti)系(xi)總(zong)體(ti)積(ji)，0.5mL；V 樣(yang)：加入反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)中樣本(ben)體(ti)積(ji)，0.25 mL；V 樣(yang)總(zong)：提(ti)取(qu)液總體(ti)積(ji)，10 mL； Cpr：樣(yang)本(ben)蛋白質(zhi)濃(nong)度(du)，mg/mL；W：樣本質量，g；T：反(fan)應(ying)時(shi)間，5min。

α-澱fen酶(mei)試(shi)劑盒 澱(dian)粉系(xi)列(lie)