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聯(lian)系電(dian)話(hua):10-62817090
| 品(pin)牌 | NobleRyder/諾(nuo)博萊德 | 貨(huo)號(hao) | BN6005 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格(ge) | 50T/24S | 供(gong)貨(huo)周(zhou)期 | 現(xian)貨(huo) |
| 主要(yao)用(yong)途(tu) | 既可(ke)催化蔗(zhe)糖(tang)合成又可(ke)催化蔗(zhe)糖(tang)分解,是(shi)蔗(zhe)糖(tang)代謝(xie)的(de)關(guan)鍵酶(mei)之壹(yi) | 應(ying)用(yong)領(ling)域(yu) | 環保(bao),化(hua)工(gong),生(sheng)物產(chan)業(ye),農林(lin)牧(mu)漁,制藥/生物制藥 |
蔗(zhe)糖(tang)合成酶(合成方向(xiang);SS-Ⅱ)試(shi)劑盒(he)說明書(shu)
分光光(guang)度法(fa) 50 管(guan)/24 樣
蔗(zhe)糖(tang)合成酶合成方向(xiang)SS-Ⅱ試(shi)劑盒(he)
正(zheng)式(shi)測定(ding)前務必(bi)取 2-3 個(ge)預期差(cha)異較大(da)的樣本做(zuo)預(yu)測定(ding)測定(ding)意義:
蔗(zhe)糖(tang)是(shi)源(葉片等)光合產物向(xiang)“庫(ku)"器(qi)官(guan)運輸的(de)主要(yao)形(xing)態(tai)。蔗(zhe)糖(tang)合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是(shi)雙向(xiang)反(fan)應酶(mei),既可(ke)催化蔗(zhe)糖(tang)合成又可(ke)催化蔗(zhe)糖(tang)分解,是(shi)蔗(zhe)糖(tang)代謝(xie)的(de)關(guan)鍵酶(mei)之壹(yi)。研究其(qi)合成方向(xiang)SS-Ⅱ的活(huo)性(xing)對(dui)於(yu)植物蔗(zhe)糖(tang)合成具有重要(yao)意義。
測定(ding)原(yuan)理(li):
SS-Ⅱ催化遊(you)離(li)果(guo)糖(tang)與葡萄糖(tang)供(gong)體(ti) UDPG 反(fan)應生(sheng)成蔗(zhe)糖(tang),蔗(zhe)糖(tang)與間(jian)苯(ben)er酚(fen)反(fan)應可(ke)呈現(xian)顏色(se)變化(hua),在(zai)480nm 下有(you)特(te)征吸(xi)收峰(feng),酶活(huo)力大(da)小(xiao)與(yu)顏(yan)色(se)的深(shen)淺成正比(bi)。
組(zu)成:
產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng) | BN6005-50T/24S | Storage |
提(ti)取液:液體 | 60ml | 4℃ |
試(shi)劑壹(yi):液(ye)體 | 4ml | -20℃ |
試(shi)劑二(er):1000μg/ml 蔗(zhe)糖(tang)溶(rong)液 | 10ml | 4℃ |
試(shi)劑三(san):液(ye)體 | 3ml | 4℃ |
試(shi)劑四(si):液(ye)體 | 40ml | 4℃ |
試(shi)劑五:液體(ti) | 12ml | 4℃避光 |
說明書(shu) | 壹(yi)份(fen) | |
自備儀(yi)器(qi)和用(yong)品(pin):
可(ke)見(jian)分光光(guang)度計(ji)、水(shui)浴(yu)鍋(guo)、臺(tai)式(shi)離(li)心(xin)機(ji)、移(yi)液器(qi)、1 ml 玻(bo)璃比(bi)色(se)皿、研缽、冰和蒸餾(liu)水(shui)
樣品測定(ding)的準備(bei):
按(an)照(zhao)組織(zhi)質(zhi)量(liang)(g):提(ti)取液體積(ml)為(wei) 1:5~10 的比(bi)例(建議稱(cheng)取約 0.1g 組織,加入 1ml 提(ti)取液),進行(xing)冰浴(yu)勻漿(jiang)。8000g 4℃離(li)心(xin) 10min,取上清,置冰上(shang)待(dai)測。
測定(ding)步驟(zhou):
試(shi)劑名(ming)稱(cheng)(μl) | 測定(ding)管 | 對(dui)照(zhao)管 | 標準管(guan) | 空(kong)白(bai)管 |
樣本 | 30 | 30 |
蒸餾(liu)水(shui) | 150 | 150 | 180 | |||
試(shi)劑二(er) | 30 | |||||
試(shi)劑壹(yi) | 150 |
混(hun)勻,25℃準確(que)水(shui)浴(yu) 10min
試(shi)劑三(san) | 50 | 50 | 50 | 50 |
沸(fei)水(shui)浴(yu)中煮沸(fei) 10min 左(zuo)右(you)(蓋緊,以防止水(shui)分散失(shi)),冷(leng)卻
試(shi)劑四(si) | 700 | 700 | 700 | 700 |
試(shi)劑五 | 200 | 200 | 200 | 200 |
混(hun)勻,沸(fei)水(shui)浴(yu) 30min,冷(leng)卻後(hou), 480nm 下測定(ding)各(ge)管(guan)吸(xi)光(guang)值(zhi)。標準管(guan)和空(kong)白管(guan)只(zhi)要(yao)做壹管(guan)。每(mei)定(ding)管需(xu)要(yao)設壹個(ge)對照管(guan)。
SS-Ⅱ活(huo)性(xing)計(ji)算(suan)
1、按(an)照(zhao)蛋白濃度(du)計算(suan)
單(dan)位(wei)定(ding)義:每(mei)mg 組(zu)織(zhi)蛋白每(mei)分鐘催化產(chan)生(sheng) 1μg 蔗(zhe)糖(tang)定(ding)義為(wei)壹個(ge)酶活(huo)力單(dan)位(wei)。
SS-Ⅱ活(huo)性(xing)(μg /min/mg prot)= C 標準管(guan)×V1×(A 測定(ding)管-A 對(dui)照(zhao)管)÷(A 標準管(guan)-A 空(kong)白(bai)管)÷(V1×Cpr)÷T=100×(A 測定(ding)管-A 對照管)÷(A 標準管(guan)-A 空(kong)白管(guan))÷Cpr 2、按照樣本鮮(xian)重計算
單(dan)位(wei)定(ding)義:每(mei)g 組(zu)織(zhi)每(mei)分鐘催化產(chan)生(sheng) 1μg 蔗(zhe)糖(tang)定(ding)義為(wei)壹個(ge)酶活(huo)力單(dan)位(wei)。
SS-Ⅱ活(huo)性(xing)(μg /min /g 鮮(xian)重) = C 標準管(guan)×V1×(A 測定(ding)管-A 對照管)÷(A 標準管(guan)-A 空(kong)白管(guan))÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A 測定(ding)管-A 對照管)÷(A 標準管(guan)-A 空(kong)白管(guan))÷W
C 標準管(guan):標準管(guan)濃(nong)度,1000μg/ml;V1:加入反(fan)應體(ti)系(xi)中樣本體(ti)積(ji),0.03ml; V2:加入提(ti)取液體積,1ml; Cpr:樣本蛋白質(zhi)濃(nong)度(du),mg/ml;W:樣本鮮(xian)重,g;T :反(fan)應時間(jian):10min。
蔗(zhe)糖(tang)合成酶合成方向(xiang)SS-Ⅱ試(shi)劑盒(he)