蔗糖不僅(jin)是(shi)重要(yao)的(de)光(guang)合(he)產(chan)物(wu)，也(ye)是植物體內(nei)運輸(shu)的(de)主(zhu)要(yao)物(wu)質(zhi)，還是碳水(shui)化合(he)物(wu)的(de)貯(zhu)存形式之(zhi)壹。SPS（EC 2.4.1.14）以(yi)果(guo)糖(tang)-6-磷(lin)酸(suan)為(wei)受(shou)體(ti)，形(xing)成的(de)蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶(mei)的(de)作(zuo)用(yong)下(xia)形成蔗糖。壹般(ban)把蔗糖磷酸酯合(he)成酶(mei)-蔗糖磷酸酶(mei)系統(tong)看作(zuo)是(shi)蔗糖合(he)成的(de)主(zhu)要(yao)途徑(jing)。
蔗糖磷酸合(he)成酶(mei)試(shi)劑盒(he)

蔗糖磷酸合(he)成酶(mei)（Sucrose phosphate synthase，SPS）試(shi)劑盒(he)說(shuo)明書(shu)

分(fen)光光(guang)度(du)法 50 管/24 樣

蔗糖磷酸合(he)成酶(mei)試(shi)劑盒(he)

正式測(ce)定(ding)前務(wu)必取(qu) 2-3 個預(yu)期(qi)差異較大(da)的(de)樣本做(zuo)預(yu)測(ce)定(ding)測(ce)定(ding)意義(yi)：

蔗糖不僅(jin)是(shi)重要(yao)的(de)光(guang)合(he)產(chan)物(wu)，也(ye)是植物體內(nei)運輸(shu)的(de)主(zhu)要(yao)物(wu)質(zhi)，還是碳水(shui)化合(he)物(wu)的(de)貯(zhu)存形式之(zhi)壹。SPS（EC 2.4.1.14）以(yi)果(guo)糖(tang)-6-磷(lin)酸(suan)為(wei)受(shou)體(ti)，形(xing)成的(de)蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶(mei)的(de)作(zuo)用(yong)下(xia)形成蔗糖。壹般(ban)把蔗糖磷酸酯合(he)成酶(mei)-蔗糖磷酸酶(mei)系統(tong)看作(zuo)是(shi)蔗糖合(he)成的(de)主(zhu)要(yao)途徑(jing)。

測(ce)定(ding)原(yuan)理(li)：

蔗糖磷酸合(he)成酶(mei)催(cui)化果(guo)糖(tang)-6-磷(lin)酸(suan)形成蔗糖磷酸，蔗糖磷酸與間(jian)苯(ben)er酚(fen)反(fan)應(ying)可呈(cheng)現(xian)顏色變化，在 480nm下(xia)有特征(zheng)吸收(shou)峰(feng)，酶(mei)活(huo)力(li)大(da)小與顏色的(de)深(shen)淺成正比。

組成：

自備(bei)儀(yi)器(qi)和用(yong)品：

可見(jian)分(fen)光光(guang)度(du)計、水(shui)浴鍋、臺式離心機(ji)、移液器、1ml 玻璃比色皿(min)、研(yan)缽、冰(bing)和(he)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)

樣品測(ce)定(ding)的(de)準(zhun)備：

按照組織(zhi)質量（g）：提(ti)取(qu)液體積(ji)(ml)為(wei) 1：5~10 的(de)比例（建議稱取約(yue) 0.1g 組織(zhi)，加入(ru) 1ml 提(ti)取(qu)液），進(jin)行(xing)冰(bing)浴勻漿(jiang)。8000g 4℃離心 10min，取上(shang)清(qing)，置(zhi)冰(bing)上(shang)待測(ce)。

測(ce)定(ding)步驟(zhou)：

混勻(yun)，25℃準(zhun)確(que)水(shui)浴 10min

沸水(shui)浴中煮(zhu)沸 10min 左右（蓋(gai)緊，以防止水(shui)分(fen)散(san)失），冷(leng)卻

混勻(yun)，沸水(shui)浴 30min，冷(leng)卻後， 480nm 下(xia)測(ce)定(ding)各管吸光(guang)值(zhi)。標(biao)準(zhun)管和(he)空白管只(zhi)要(yao)做(zuo)壹管。每(mei)個(ge)測(ce)定(ding)管需(xu)要(yao)設壹個(ge)對(dui)照管。

SPS 活(huo)力(li)單(dan)位的(de)計算(suan):

1、按照蛋(dan)白濃(nong)度(du)計算(suan)

單位定(ding)義(yi)：每(mei)mg 組織(zhi)蛋白每(mei)分(fen)鐘催(cui)化產生(sheng) 1μg 蔗糖定(ding)義(yi)為(wei)壹個(ge)酶(mei)活(huo)力(li)單(dan)位。

SPS 活(huo)性(xing)(μg /min/mg prot)= C 標(biao)準(zhun)管×V1×（A 測(ce)定(ding)管-A 對(dui)照管)÷（A 標(biao)準(zhun)管-A 空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×

（A 測(ce)定(ding)管-A 對(dui)照管)÷（A 標(biao)準(zhun)管-A 空白管)÷Cpr 2、按(an)照樣本鮮重計算(suan)

單位定(ding)義(yi)：每(mei)g 組織(zhi)每(mei)分(fen)鐘催(cui)化產生(sheng) 1μg 蔗糖定(ding)義(yi)為(wei)壹個(ge)酶(mei)活(huo)力(li)單(dan)位。

SPS 活(huo)性(xing)(μg /min /g 鮮重) = C 標(biao)準(zhun)管×V1×（A 測(ce)定(ding)管-A 對(dui)照管)÷（A 標(biao)準(zhun)管-A 空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×（A 測(ce)定(ding)管-A 對(dui)照管)÷（A 標(biao)準(zhun)管-A 空白管)÷W

C 標(biao)準(zhun)管：標(biao)準(zhun)管濃(nong)度(du)，1000μg/ml；V1：加入(ru)反(fan)應(ying)體系中樣本體(ti)積(ji)，0.03ml； V2：加入(ru)提(ti)取(qu)液體積(ji)，1ml； Cpr：樣本蛋(dan)白質(zhi)濃(nong)度(du)，mg/ml；W：樣本鮮重，g；T ：反(fan)應(ying)時間：10min。

蔗糖磷酸合(he)成酶(mei)試(shi)劑盒(he)